[发明专利]物质的电泳辅助染色无效
申请号: | 00808751.2 | 申请日: | 2000-06-08 |
公开(公告)号: | CN1363006A | 公开(公告)日: | 2002-08-07 |
发明(设计)人: | R·L·凯尔施曼;R·奥多姆;T·库瓦哈拉;M·雷丁顿 | 申请(专利权)人: | 分析科学公司 |
主分类号: | D06P5/20 | 分类号: | D06P5/20;G01N27/36;G01N27/447 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人: | 罗宏,姜建成 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 物质 电泳 辅助 染色 | ||
1.生物样品的一种en boc染色方法,该方法包括以下步骤:
(a)将样品浸入染色液中,这种染色液含有一种离子导电溶液以及一种与样品组分相结合的带电染色剂前体或染色剂分子,
(b)施加穿越染色液的电场,其中第一抗体渗透入样品中。
2.权利要求1中的方法,其中染色剂前体是选自由抗体、核酸探针和外源凝集素组成的组中。
3.权利要求1中的方法,其中的染色剂分子含有一种标记的载体分子,该载体分子是选自包括抗体、核酸探针和外源凝集素在内的组中,并且该标记染色剂含有一个可在样品中产生颜色的组分。
4.权利要求3中的方法,其中的标记包括荧光探针。
5.权利要求3中的方法,其中的染色剂分子包括可反应生成永久着色产物的酶。
6.权利要求2中的方法,其中的染色剂前体是第一抗体。
7.权利要求6中的方法,进一步包括下列步骤:
(a)将会有第一抗体的样品浸入染色液中,这种染色液含有一种离子导电溶液以及与第一抗体结合的带电第二抗体。
(b)施加穿越染色液的电场,
籍此,第二抗体渗透入样品中。
8.权利要求6中的方法,进一步包括下面步骤:
将含有第一抗体的样品浸没在含有可与第一抗体相结合的第二抗体的溶液中。
9.权利要求7或8中的方法,其中第二抗体是被标记的,该标记包括可在样品中产生颜色的组分。
10.权利要求9中的方法,其中的标记包括荧光探针。
11.权利要求9中的方法,其中的染色剂分子包括可反应生成永久性着色产物的酶。
12.权利要求1中的方法,进一步包括下面的步骤:
在将样品在染色液中浸没之前用凝胶支持物对样品进行渗透。
13.权利要求12中的方法,其中的凝胶支持是选自包括琼脂糖和聚丙烯酰胺的组中。
14.权利要求1中的方法,其中染色液在窄槽中,并且样品基本上占用了且适应于槽的截面积。
15.权利要求1中的方法,其中应用的电压为100-400V。
16.权利要求15中的方法,其中应用的电压为50-700V。
17.权利要求1中的方法,其中电场维持时间为1-25小时。
18.权利要求1中的方法,其中电场维持时间为3-15小时。
19.权利要求1中的方法,其中染色液包括染色剂前体和染色剂分子或两种染色剂前体。
20.权利要求19中的方法,其中染色剂前体导入样品的第一面的染色液中,而染色剂分子或第二种染色剂前体则导入与第一面相对的、样品的另一面的染色液中;该染色剂前体和该染色剂分子或第二种染色剂前体要选那些在电场中以相反方向移动的那些。
21.一种可减少切片组织中的未结合染色剂分子的数量的方法,该方法包括下列步骤:
(a)将组织样品浸入染色液中,这种染色液含有一种离子导电溶液以及一种与样品组分相结合的染色剂前体或带电染色剂分子,
(b)施加穿越染色液的电场,
借此使染色剂前体渗透入样品中,未结合染色剂前体从样品中迁移。
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