[发明专利]白细胞功能相关抗原与细胞间粘着分子结合的抑制剂及其用途

说明书

                        背景技术

与白细胞功能相关的抗原(LFA-1、CD11a/CD18)是参与细胞/细胞黏合的白细胞特异性β2整合蛋白。LFA-1的结合活性是炎症反应中白细胞从循环系统外渗到受伤部位所必需的。已知主要有三种配体结合LFA-1，ICAM-1、ICAM-2和ICAM-3，它们是细胞间的黏着分子，在把白细胞定位黏合到受伤部位的上皮细胞中起着重要作用。ICAM-4和ICAM-5与LFA-1的结合也已有报导。大多数白细胞在结构上表达LFA-1，但是有人认为为了诱导构象变化并增大亲和性的配体结合，结合配体需要活化。例如，ICAM-1通常在上皮细胞上以低水平表达，然而受伤引起的炎症介质会增强其在受伤部位的细胞表面上表达，因而通过与活化的LFA-1结合而促进了白细胞的定位黏合。

LFA-1的结构包括被认为参与和/或调节ICAM结合的各种胞内域和胞间域。特别感兴趣的是α_L链中一段由大约200个氨基酸组成的区域，被称为I域，它是在所有的β₂整合蛋白以及许多其它的蛋白质中被发现的。有证据提示，I域是LFA-1与ICAM-1和3结合所必需的。例如，已经在I域内对阻断抗-LFA-1的单克隆抗体进行了表位定位。另外，已经证明，重组的I域多肽片段能抑制整合蛋白介导的ICAM-1黏合和结合。在LFA-1(以及其它蛋白质)的I域内有一个优先结合锰离子或镁离子的金属离子依赖型黏合位点(MIDAS)。配体相互作用需要结合其中一种阳离子，并且据认为这种结合引起了结合所必需的LFA-1的构象变化。因此，阳离子的结合可能是对胞外的白细胞环境变化作出反应的一种调节机制。这种假设受到以下观察的支持：钙离子的结合实际上抑制了LFA-1与ICAM-1的相互作用。确实，有人提出失活的LFA-1构象产生于钙的结合，并且用锰离子或镁离子替换钙离子是活化LFA-1的一个必要的步骤[Griggs等人，J.Biol.Chem.273：22113-22119(1998)]。还证明其它因素也引起LFA-1活化，这些因素包括T细胞受体的参与、细胞因子的激发和体外PMA的激发。

在实践中，对LFA-1/ICAM结合位点的鉴定提供了调节白细胞炎症反应的目标。已经分离出了许多能引起LFA-1活化的抗体[例如参见Landis等人，J.Cell Biol.120：1519-1527(1993)]或者例如能防止ICAM-1相互作用的抗体[参见例如Randi和Hogg，J.Biol Chem.269：12395-12398(1994)]。以前对那些抗-LFA-1活化的抗体的鉴定识别了多个不同的胞外表位，这提示存在不止一个调节区域，并且认为这些区域与胞质信号传递无关。通过使用包含人和猪蛋白的嵌合体LFA-1α亚基蛋白质，对结合ICAM-1的LFA-1位点的定位进行了研究[Huang和Springer，J.Biol.Chem.270：19008-19016(1995)]。研究表明，与配位阳离子结合的残基和与该位点邻近的残基是在相对平整的界面上结合ICAM-1所必需的。对胞外调节区域和结合ICAM-1的触点所作的更加精确的描绘将会使设计有效的调节剂成为可能。

因此，在本领域中需要精确地鉴定参与炎症反应的蛋白质的调节区域，特别是LFA-1和结合LFA-1的ICAMs。测定蛋白质的三级(或四级)结构可以鉴别出潜在的调节区域以便合理地设计出用于对炎症进行治疗性和预防性干扰的生物学上相容的小分子。在本领域中还需要鉴定出能抑制LFA-1与ICAMs结合的可用于治疗炎症的化合物。

                      发明概述

本发明涉及与LFA-1的I域中的新调节位点结合，从而抑制LFA-1与能结合LFA-1的ICAMs结合的化合物。因此，本发明还提供调节白细胞与上皮细胞黏合的方法。本发明的化合物可用于治疗下列疾病：与炎症有关的疾病、自免疫疾病、肿瘤转移、同种移植排斥和再灌注损伤。具体地，本发明是涉及通式结构(I)的二芳基硫醚、其药学上可接受的盐或其药物前体，以及二芳基硫醚的用途，特别是式(I)的化合物在抑制LFA-1与能结合LFA-1的ICAM的结合中的用途：其中

A和B独立地为选自5-员和6-员芳香环的芳基，包括但是不限于苯基、噻吩基、呋喃基、嘧啶基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、吡咯基和哒嗪基；