[发明专利]L－氨基酸生产菌以及用于生产L－氨基酸的方法

权利要求书

1.一种具有L-氨基酸生产能力的嗜甲基菌属细菌(Methylophilusbacteria)。

2.按照权利要求1的嗜甲基菌属细菌，其中所述L-氨基酸是L-赖氨酸、L-缬氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸或L-苏氨酸。

3.按照权利要求1的嗜甲基菌属细菌，它具有L-氨基酸类似物抗性或L-氨基酸辅源营养(auxotrophy)。

4.按照权利要求1的嗜甲基菌属细菌，其中L-氨基酸生物合成酶活性增强。

5.按照权利要求1的嗜甲基菌属细菌，其中二氢吡啶二羧酸盐合酶活性和天冬氨酸激酶活性增强，而且所述细菌具有L-赖氨酸生产能力。

6.按照权利要求1的嗜甲基菌属细菌，其中二氢吡啶二羧酸盐合酶活性增强，而且所述细菌具有L-赖氨酸生产能力。

7.按照权利要求1的嗜甲基菌属细菌，其中天冬氨酸激酶活性增强，而且所述细菌具有L-赖氨酸生产能力。

8.按照权利要求5-7任一项的嗜甲基菌属细菌，其中选自天冬氨酸半醛脱氢酶、二氢吡啶二羧酸盐还原酶和二氨基庚二酸盐脱羧酶中的1种、2种或3种酶的活性增强。

9.按照权利要求5的嗜甲基菌属细菌，其中通过将编码不受L-赖氨酸反馈抑制的二氢吡啶二羧酸盐合酶的DNA以及编码不受L-赖氨酸反馈抑制的天冬氨酸激酶的DNA导入细胞的转化作用而增强所述二氢吡啶二羧酸盐合酶活性和天冬氨酸激酶活性。

10.按照权利要求1的嗜甲基菌属细菌，其中天冬氨酸激酶、高丝氨酸脱氢酶、高丝氨酸激酶和苏氨酸合酶的活性增强，而且所述细菌具有L-苏氨酸生产能力。

11.按照权利要求1-10任一项的细菌，其中所述嗜甲基菌属细菌是食甲基嗜甲基菌。

12.一种生产L-氨基酸的方法，它包括在培养基中培养 1-11任一项定义的嗜甲基菌属细菌，以便在培养物中产生并累积L-氨基酸，以及从所述培养物中收集所述L-氨基酸。

13.按照权利要求12的方法，其中所述培养基含有用作主要碳源的甲醇。

14.一种产生L-氨基酸含量提高的嗜甲基菌属细菌的细菌细胞的方法，它包括在培养基中培养权利要求1-11任一项定义的嗜甲基菌属细菌，以便在所述细菌的细菌细胞中产生并累积L-氨基酸。

15.按照权利要求14的产生所述嗜甲基菌属细菌的细菌细胞的方法，其中所述L-氨基酸是L-赖氨酸、L-缬氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸或L-苏氨酸。

16.一种编码以下(A)或(B)定义的蛋白的DNA：

(A)具有SEQ ID NO：6的氨基酸序列的蛋白，或

(B)具有包括一个或几个氨基酸的取代、缺失、插入、添加或倒位的SEQ ID NO：6的氨基酸序列而且具有天冬氨酸激酶活性的蛋白。

17.按照权利要求16的DNA，它为以下(a)或(b)定义的DNA：

(a)具有包含SEQ ID NO：5第510-1736号核苷酸的核苷酸序列的核苷酸序列的DNA；或

(b)在严格条件下可与具有SEQ ID NO：5第510-1736号核苷酸的核苷酸序列或其部分的探针杂交，而且编码具有天冬氨酸激酶活性的蛋白的DNA。

18.一种编码以下(C)或(D)定义的蛋白的DNA：

(C)具有SEQ ID NO：8的氨基酸序列的蛋白，或

(D)具有包括一个或几个氨基酸的取代、缺失、插入、添加或倒位的SEQ ID NO：8的氨基酸序列而且具有天冬氨酸半醛脱氢酶活性的蛋白。

19.按照权利要求18的DNA，它为以下(c)或(d)定义的DNA：

(c)具有包含SEQ ID NO：7第98-1207号核苷酸的核苷酸序列的核苷酸序列的DNA；或

(d)在严格条件下可与具有SEQ ID NO：7第98-1207号核苷酸的核苷酸序列或其部分的探针杂交，而且编码具有天冬氨酸半醛脱氢酶活性的蛋白的DNA。