[发明专利]分离细胞质级分而不影响卵母细胞和胚胎细胞活力的方法

权利要求书

1.一种从卵母细胞中分离细胞质级分而不会影响卵母细胞受精能力的方法，该方法包括从卵母细胞中释放约占该卵母细胞5％体积的细胞质级分的步骤。

2.一种根据权利要求2所述的方法，其中所述的级分约占所述卵母细胞体积的2％。

3.一种根据权利要求1所述的方法，该方法包括下列步骤：

(a)将释放装置插入卵母细胞；

(b)将约占卵母细胞体积5％的细胞质级分抽入释放装置；和

(c)从卵母细胞中抽出释放装置而使所述级分从释放装置中分离出来。

4.一种根据权利要求3所述的方法，其中所述级分的体积小于10pL。

5.一种根据权利要求4所述的方法，其中所述级分的体积等于卵母细胞细胞质可以抽取至胞质内精子注射(ICSI)移液管内约100μm的体积。

6.一种根据权利要求1所述的方法，其中所述的细胞质级分包括线粒体。

7.一种根据权利要求3所述的方法，其中所述的释放装置包括一种注射移液管。

8.一种根据权利要求7所述的方法，其中所述的注射移液管是一种ICSI移液管。

9.一种检测卵母细胞内线粒体的线粒体基因组中的核苷酸序列、多态性或突变而不影响该卵母细胞受精能力的方法，该方法包括下列步骤：

(a)按照权利要求1所述的方法从卵母细胞中分离包含线粒体的细胞质级分；和

(b)对细胞质级分中线粒体基因组的核苷酸序列进行分析以明确线粒体基因组中核苷酸序列、多态性或突变的存在。

10.一种根据权利要求9所述的方法，其中所述的核苷酸序列、多态性或突变可导致卵母细胞或来源于受精卵母细胞的子代中的疾病或功能异常，或怀疑可导致这些情况，或与这些情况相关。

11.一种根据权利要求10所述的方法，其中所述的核苷酸序列、多态性或突变如表1中所示。

12.一种测定卵母细胞中线粒体基因组的异质性水平而不影响卵母细胞受精能力的方法，该方法包括下列步骤：

(a)按照权利要求1所述的方法从卵母细胞中分离包含线粒体的细胞质级分；和

(b)将级分中含有核苷酸序列、多态性或突变的线粒体基因组的数量与级分中不含核苷酸序列、多态性或突变的基因组数量进行比较。

13.一种根据权利要求12所述的方法，其中分离出细胞质级分的卵母细胞是处于卵母细胞发育之生发泡期的初级卵母细胞或处于从减数分裂的中II期至融合生殖之前的卵母细胞发育期的次级卵母细胞。

14.一种根据权利要求13所述的方法，其中所述的线粒体基因组中的核苷酸序列、多态性或突变可导致卵母细胞或来源于受精卵母细胞的子代中的疾病或功能异常，或怀疑可导致这些情况的原因，或与这些情况相关。

15.一种根据权利要求14所述的方法，其中所述的核苷酸序列、多态性或突变如表1中所示。

16.一种从胚胎细胞中分离细胞质级分而不会影响该细胞发育潜能的方法，该方法包括从所述细胞中释放约占该细胞体积的5％的细胞质级分的步骤。

17.一种根据权利要求16所述的方法，其中所述的级分约占所述细胞体积的2％。

18.一种根据权利要求16所述的方法，该方法包括下列步骤：

(a)将释放装置插入胚胎细胞；

(b)将约占所述细胞体积5％的细胞质级分抽入释放装置；和

(c)从所述细胞中抽出释放装置而使所述级分从释放装置中分离出来。

19.一种根据权利要求18所述的方法，其中所述级分的体积小于10pL。

20.一种根据权利要求19所述的方法，其中所述级分的体积等于胚胎细胞细胞质可以抽入ICSI移液管内100μm的体积。

21.一种根据权利要求16所述的方法，其中所述的细胞质级分包括线粒体。

22.一种根据权利要求18所述的方法，其中所述的释放装置包括一种注射移液管。