[发明专利]与ELAGIGILTV肽相结合的肠细菌OmpA蛋白用于治疗黑素瘤的用途

说明书

本发明涉及肠细菌，特别是肺炎克氏杆菌(Klebsillla pneumoniae)，OmpA膜蛋白，连同一种抗原或半抗原用于制备意欲产生或增强针对传染性因子或肿瘤细胞的细胞毒性T应答的药物组合物的用途。本发明包括这些化合物用于预防和治疗感染或癌症，特别是与肿瘤抗原相关的癌症，诸如黑素瘤的用途，和包含一些这些化合物的药物组合物。

接种疫苗是预防或治疗病毒或细菌感染的有效方法。接种疫苗运动在这些领域的成功使之有可能将至今在传染病学领域中用途的疫苗概念延伸到癌症和自身免疫疾病领域。单独施用于宿主的疫苗抗原的免疫原性常常不足以诱导免疫应答，因此必需与佐剂相伴或与载体蛋白偶联来诱导(或增强)免疫原性。在这些条件下，只能诱导体液类型的免疫应答。现在，在抗病毒治疗的过程中，产生能够识别并消灭病毒的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)是及其重要的(Bachmann等人，1994，欧洲免疫学杂志(Eur.J.Immunol.)24：2228-2236；P.Borrow，1997，病毒性肝炎杂志(J.Virol.Hepat.)4：16-24)，正如许多研究证明的，在体内显示针对病毒表位的应答的保护性作用(A.M.Arvin，1992，传染病杂志(J.Inf.Dis.)166：S35-S41；Koszinowski等人，1987，免疫学通讯(Immunol.Lett.)16：185-192)。

CTL应答的重要性在抗肿瘤应答中同样获得了证明，特别是针对黑素瘤细胞的应答(回顾见Rivoltini等人，1998，免疫学评论性回顾(Crit.Rev.Immunol.)18：55-63)。已经定义了多种抗原的CTL表位(与I型分子相互作用并呈递给CD8＋T淋巴细胞的肽序列)。

然而，困难在于在体内产生CTL，因为这些肽的免疫原性是微弱的(Melief，1992，癌症研究进展(Adv.Cancer Res.)58：143-175；Nandaz和Sercaz，1995，细胞(Cell)82：13-17)。

因此，研究针对鉴定使之有可能诱导CTL的新的佐剂或抗原投递系统。由于它们在呈递抗原和刺激免疫系统、树突细胞中的有效性，例如已经用于产生抗病毒CTL应答(B.Ludewig等人，1998，病毒学杂志(J.Virol.)72：3812-3818；P.Brossard等人，1997，免疫学杂志(J.Immunol.)158：3270-3276)或抗癌CTL应答(F.O.Nestle等人，1998，自然医学(Nat.Med.)4：328-332)。这些方法在于，给来自体内的树突细胞装载感兴趣的抗原(肽或溶胞产物)，并将这些细胞重新移植到患者体内。其它方法在于，用编码感兴趣抗原的基因转染来自体内的树突细胞，并重新注射这些经转染细胞(E.Gilboa等人，1998，癌症免疫学免疫疗法(Cancer Immunol.Immunother.)46：82-87)。这些方法已经成功的用于小鼠和最近用于人(F.J.Hsu等人，1996，自然医学(Nat.Med.)2：52-58)，但是由于细胞必需进行体外处理(细胞转化或抗原内化)并移植到宿主生物体内，因而仍然是复杂的。相似的，用途病毒类颗粒(G.T.Layton等人，1993，免疫学杂志(J.Immunol.)151：1097-1107)或不完全弗氏佐剂(IFA)(Valmori等人，1994，欧洲免疫学杂志(Eur.J.Immunol.)24：1458-1462)使之有可能产生CTL应答。然而，对应于CTL表位的抗病毒药物当存在这种佐剂时可能导致特异性耐受状态，这可能在某些情况中产生与期望相反的效果，即免疫应答降低(Toes等人，1996，美国国家科学院展(Proc.Nat.Acad.Sci.USA)93，7855-7860)。

由此，现在非常需要当与分子(特别是抗原或半抗原)相结合时能够产生针对所述分子的CTL的化合物。这种化合物能够(特别是)用于制备意欲诱导抗病毒、抗细菌、抗真菌、抗寄生虫、或抗肿瘤的CTL类型的免疫保护的疫苗组合物。

令人惊讶的是，已经证明革兰氏阴性细菌外膜蛋白，特别是肠细菌OmpA蛋白，诸如肺炎克氏杆菌P40蛋白(WO 95/27787和WO 96/14415中描述的蛋白质)，具有引发针对与之共价或非共价相结合的分子的CTL应答的特性，优选不需加入另一种佐剂。