[发明专利]雪旺细胞源神经营养因子及其制备方法无效
申请号: | 00131010.0 | 申请日: | 2000-12-27 |
公开(公告)号: | CN1361174A | 公开(公告)日: | 2002-07-31 |
发明(设计)人: | 朱家恺 | 申请(专利权)人: | 中山医科大学附属第一医院 |
主分类号: | C07K14/47 | 分类号: | C07K14/47;C12P21/02 |
代理公司: | 广州三环专利代理有限公司 | 代理人: | 成明新 |
地址: | 510080 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞 神经 营养 因子 及其 制备 方法 | ||
1、一种雪旺细胞源神经营养因子,其特征在于它为一种酸性蛋白质,分子量为50~58KD,等电点为4.55。
2、一种雪旺细胞源神经营养因子的制备方法,其特征在于:(1)雪旺细胞的分离、培养和收集:把大鼠体内预损伤的周围神经或新生大鼠的周围神经取出,去掉其外膜,剪碎,用酶溶法处理后,进行细胞培养,用差速粘附法把成纤维细胞分离出来,纯化雪旺细胞,用无血清培养,以排除来自血清的细胞因子的影响,最后培养出纯度达95%的雪旺细胞;(2)提取雪旺细胞源神经营养因子;把雪旺细胞的无血清培养液或用超声捣碎细胞的上清液进行超滤浓缩、收集>10Kda的分子,然后用Sephadex G-100凝胶层析作初步分析,分段收集几个组分,把对脊髓前角运动神经元生物活性最好的一个组分、再上高效液相色谱(HLPC)分析,最后收集到一个对脊髓前角运动神经元生物活性最好的一组分。
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