[发明专利]一种新的多肽——Rab6鸟嘌呤核苷三磷酸活化蛋白69.41和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——Rab6鸟嘌呤核苷三磷酸活化蛋白69.41，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

高尔基体在细胞中能够将内质网合成的多种蛋白进行加工、分类与包装，然后分门别类地运送到细胞特定的部位或分泌到细胞外。在高尔基体上，存在许多功能性的蛋白，行使着蛋白加工、运输、分类等功能。鸟嘌呤核苷三磷酸结合调节蛋白(G蛋白)也存在于高尔基体中，实验已经证实G蛋白在高尔基的囊泡转运中起调节作用。Rab6 GTP活化蛋白属于这样的一类G蛋白。

在高尔基复合体上，Rab6 GTP活化蛋白能够以逆行的方向调节细胞内运输。与其他的GTP酶一样，Rab蛋白在不同的状况下分别与GDP和GTP的结合。天然的GTP酶活性很低，GTP酶活化蛋白(GAPs)能够刺激GTP的水解。GDP被GTP的取代是由鸟嘌呤核苷转换因子(GEFs)催化的。目前已经描述清楚的GEFs主要有Sec2p(活化Sec4p)，Rabex-5(活化Rab5)，一条对Rab3A特异性的细胞质蛋白(Horiuchi et al.，1997；Wada et al.，1997；Walch-Solimena et al.，1997)。在哺乳动物细胞中，一个130KD的蛋白行使着GAP的功能，属于Rab3亚家族(Fukui et al.，1997)。

大量的遗传学和生化研究都显示Rab蛋白在小泡运输和膜运输中的重要作用(Novick and Zerial，1997；Martinez and Goud，1998)。在分子水平上，Rab蛋白能够参与反应，成为转运小泡的靶结合和熔变的基础。它还能够调整小泡胞质面和膜甚上SNARE蛋白的进入。

Rab6是一个广泛存在的Rab蛋白，与高尔基体和反面管网结构(TGN)膜相结合(Goud et al.，1990；Antony et al.，1992)。Rab6涉及高尔基体水平上的转运事件。Rab6的GTP结合形式的超表达导致高尔基结构的缺失，并且引起高尔基上酶的重新分配，一些蛋白进入到内质网中，表明了Rab6蛋白的高尔基-内质网转运功能(Martinez et al.，1997)。Rab6还能够调节高尔基膜和小泡与微管的结合。

人Rab6作用蛋白GAPCenA是一种GAP蛋白，能够在体外特异性活化。免疫荧光检测和细胞分馏实验显示，GAPCenA主要存在于细胞质中，但是有一小部分于中心体结合。此外，GAPCebA能够与细胞质-微管蛋白形成复合物，在微管蛋白成核现象中起作用。

根据氨基酸同源比较的结果，本发明的多肽与上述的Rab6鸟嘌呤核苷三磷酸活化蛋白具有96％的相同性，96％相似性，并且包含了同源异型框基因家族家族特征性的保守序列，因此认为此蛋白是一种新的GTP酶活化蛋白，具有与Rab6鸟嘌呤核苷三磷酸活化蛋白相似的生物学功能，并且命名为Rab6鸟嘌呤核苷三磷酸活化蛋白69.41。

由于如上所述Rab6鸟嘌呤核苷三磷酸活化蛋白69.41蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的Rab6鸟嘌呤核苷三磷酸活化蛋白69.41蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新Rab6鸟嘌呤核苷三磷酸活化蛋白69.41蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——Rab6鸟嘌呤核苷三磷酸活化蛋白69.41以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码Rab6鸟嘌呤核苷三磷酸活化蛋白69.41的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码Rab6鸟嘌呤核苷三磷酸活化蛋白69.41的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产Rab6鸟嘌呤核苷三磷酸活化蛋白69.41的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——Rab6鸟嘌呤核苷三磷酸活化蛋白69.41的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——Rab6鸟嘌呤核苷三磷酸活化蛋白69.41的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与Rab6鸟嘌呤核苷三磷酸活化蛋白69.41异常相关的疾病的方法。