[发明专利]一种新的多肽——人基质金属蛋白酶15.29和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人基质金属蛋白酶15.29，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

多数哺乳动物金属蛋白酶参与胞外蛋白代谢并可分为两大功能家族。基质降解的金属蛋白酶(胶原酶，明胶酶以及溶基质素)作为潜伏前形式被分泌入胞外空间，在那里被限制性蛋白酶解激活。基质活性被紧密控制在合成水平，通常是较低的并由细胞因子与其他物质诱导，还可由与特异性胞外蛋白质抑制物化合的整比化合物诱导(Nagase，H.and Salvesen，G.(1993)in Innovations in Proteases and theirInhibitors(Aviles，F.X.，ed.)，pp.315-332，Walter de Gruyter，Berlin)。第二个哺乳动物金属酶家族为膜整合蛋白，还包括内肽酶24.11(E24.11)，内皮缩血管肽转化酶(ECE)以及meprin。E24.11以及ECE与原核生物的嗜热芽孢菌蛋白酶具有相似的活性位点，而meprin是金属蛋白虾红素(一种含锌的内肽酶)家族的成员。E24.11与ECE的底物是相对小的肽链，meprin能够作用于较大的蛋白并可降解胞外基质成分。胞外蛋白代谢的缺陷对于各种疾病例如组织细胞瘤，淋巴瘤，结肠癌，肺癌，成视网膜细胞瘤都是重要的，而金属蛋白酶可用于形成进入靶向物以插入适当的抑制剂的疗法。

哺乳动物胞外基质金属蛋白酶是一种锌依赖的酶，它们由细胞分泌为一种非活性形式(酶原)，这种酶原与成熟的酶不同，它有一个N端的前肽。这个前肽C末端的下游两个氨基酸残基处有一个高度保守的八肽。该区域参与基质的自身抑制；在这个八肽中有一个半胱氨酸残基与活性位点的锌离子螯合，从而抑制酶，该区域被称为“半胱氨酸开关”或是“自身抑制区域”。该家族的特征序列模板为：P-R-C-[GN]-x-P-[DR]-[LIVSAPKQ]，其中的C与锌离子螯合(Woessner J.Jr.，FASEB J.5：2145-2154(1991))。

本发明的新的多肽与人基质金属蛋白酶家族具有相似的结构，序列以及生物学功能，且含有上述特征序列模板，因而被认为是人基质金属蛋白酶家族的新成员。该多肽及其激动剂，抑制剂，拮抗剂可用于诊断兼防治各种与胞外蛋白代谢相关的疾病例如组织细胞瘤，淋巴瘤，结肠癌，肺癌，成视网膜细胞瘤等。

由于如上所述人基质金属蛋白酶15.29蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人基质金属蛋白酶15.29蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人基质金属蛋白酶15.29蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人基质金属蛋白酶15.29以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人基质金属蛋白酶15.29的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人基质金属蛋白酶15.29的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人基质金属蛋白酶15.29的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人基质金属蛋白酶15.29的抗体。

本发明的另一个目的是提供了针对本发明多肽——人基质金属蛋白酶15.29的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。

本发明的另一个目的是提供诊断治疗与人基质金属蛋白酶15.29异常相关的疾病的方法。

本发明涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含：具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有SEQ ID NO：2氨基酸序列的多肽。

本发明还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体：

(a)编码具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；

(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。

更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种：(a)具有SEQ ID NO：1中87-506位的序列；和(b)具有SEQ ID NO：1中1-1045位的序列。