[发明专利]L－亮氨酸的生产方法及有关DNA和微生物有效
| 申请号： | 00120462.9 | 申请日： | 2000-07-10 |
| 公开（公告）号： | CN1280135A | 公开（公告）日： | 2001-01-17 |
| 发明（设计）人： | M·M·古斯雅廷纳;M·G·伦特斯;Y·I·科兹洛夫;L·V·伊万诺维斯卡雅;E·B·沃罗希洛瓦 | 申请（专利权）人： | 味之素株式会社 |
| 主分类号： | C07K14/00 | 分类号： | C07K14/00;C12N15/11;C12N1/20;C12P13/06 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 | 代理人： | 张广育,谭明胜 |
| 地址： | 日本*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 亮氨酸 生产 方法 有关 dna 微生物 | ||
1．编码以下(A)或(B)的蛋白的DNA：
(A)具有序列2所示氨基酸序列的蛋白，其中具有选自以下(a)到(e)的置换：
(a)482位另一种氨基酸残基置换苏氨酸残基，
(b)386位另一种氨基酸残基置换谷氨酸残基，
(c)428位另一种氨基酸残基置换脯氨酸残基，
(d)479位另一种氨基酸残基置换甘氨酸残基，以及
(e)462位另一种氨基酸残基置换甘氨酸残基，
(B)具有蛋白(A)氨基酸序列的蛋白，其序列中有一个或几个氨基酸残基的缺失、置换、插入或增加，所述蛋白(B)具有α—异丙基苹果酸合酶活性，L—亮氨酸对该活性的反馈抑制被脱敏至与蛋白(A)相同。
2．权利要求1的DNA，其中所述置换选自以下(a’)到(e’)：
(a’)482位异亮氨酸残基置换苏氨酸残基，
(b’)386位赖氨酸残基置换谷氨酸残基，
(c’)428位亮氨酸残基置换脯氨酸残基，
(d’)479位半胱氨酸残基置换甘氨酸残基，以及
(e’)462位天冬氨酸残基置换甘氨酸残基。
3．权利要求2的DNA，其具有序列1所示核苷酸序列，其中具有选自以下(ⅰ)到(ⅴ)的突变：
(ⅰ)1445位胞嘧啶突变为胸腺嘧啶，
(ⅱ)1156位鸟嘌呤突变为腺嘌呤，
(ⅲ)1283位胞嘧啶突变为腺嘌呤，
(ⅳ)1435位鸟嘌呤突变为胸腺嘧啶，以及
(ⅴ)1385位鸟嘌呤突变为腺嘌呤。
4．一种微生物，其已用权利要求1到3任一项的DNA转化并具有产生L—亮氨酸的能力。
5．权利要求4的微生物，其属于埃希氏菌属。
6．权利要求5的微生物，其为大肠杆菌。
7．生产L—亮氨酸的方法，包括以下步骤：
在培养基中培养权利要求4到6任一项的微生物以在培养基中产生和积累L—亮氨酸，并且
由培养基中回收L—亮氨酸。
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