[发明专利]溶血栓药物重组葡激酶

权利要求书

1．一种溶血栓药物重组葡激酶，其特征在于：重组葡激酶基因是由金黄色葡萄球菌的溶原性转换噬菌体α的DNA，经PCR扩增获得的，该基因的核苷酸全序列及其编码的氨基酸如下序列：TCA AGT TCA TTC GAC AAA GGA AAA TAT AAA AAA GGC GAT GAC GCG AGTSer Ser Ser Phe Asp Lys Gly Lys Tyr Lys Lys Gly Asp Asp Ala SerTAT TTT GAA CCA ACA GGC CCG TAT TTG ATG GTA AAT GTG ACT GGA GTT GATTyr Phe Glu Pro Thr Gly Pro Tyr Leu Met Val Asn Val Thr Gly Val AspAGT AAA GGA AAT GAA TTG CTA TCC CCT CAT TAT GTC GAG TTT CCT ATT AAA CCTSer Lys Gly Asn Glu Leu Leu Ser Pro His Tyr Val Glu Phe Pro Ile Lys ProGGG ACT ACA CTT ACA AAA GAA AAA ATT GAA TAC TAT GTC GAA TGG GCA TTA GATGly Thr Thr Leu Thr Lys Glu Lys Ile Glu Tyr Tyr Val Glu Trp Ala Leu AspGCG ACA GCA TAT AAA GAG TTT AGA GTA GTT GAA TTA GAT CCA ACC GCA AAG ATCAla Thr Ala Tyr Lys Glu Phe Arg Val Val Glu Leu Asp Pro Ser Ala Lys IleGAA GTC ACT TAT TAT GAT AAG AAT AAG AAA AAA GAA GAA ACG AAG TCT TTC CCTGlu Val Thr Tyr Tyr Asp Lys Asn Lys Lys Lys Glu Glu Thr Lys Ser Phe ProATA ACA GAA AAA GGT TTT GTT GTC CCA GAT TTA TCA GAG CAT ATT AAA AAC CCTIle Thr Glu Lys Gly Phe Val Val Pro Asp Leu Ser Glu His Ile Lys Asn ProGGA TTC AAC TTA ATT ACA AAG GTT GTT ATA GAA AAG AAA TAAGly Phe Asn Leu Ile Thr Lys Val Val Ile Glu Lys Lys End

2．根据权利1所述的溶血栓药物重组葡激酶，其特征在于将葡激酶活性高的菌株中分离的噬菌体α的DNA为模板，采用引物Ⅰ和引物Ⅱ经PCR扩增，得到含有完整葡激酶基因的DNA小片段，该基因DNA片段与pJLA₅₀₂载体质粒，分别以BamHⅠ和NcoⅠ酶切；再将酶切后的上述质粒和葡激酶基因DNA小片段，用T₄DNA连接酶连接获得含有葡激酶基因的pJLA₅₀₂质粒DNA，再转化入HB101大肠杆菌细胞内，构建成葡激酶高表达的工程菌株EcoliH15(中国微生物保藏中心保藏号CGMCC0432)。

3．根据权利要求2所述的溶血栓药物重组葡激酶，其特征在于所述的引物Ⅰ，其核苷酸序列为：

5′ATCCATGGCCATGCTCAAAAGAAGT 3′；引物Ⅱ，其核苷酸序列为：

5′CTTATAGAAAAGAAATAAGGATCCCC 3′。