[发明专利]一种新的多肽——人蛋白激酶TAK1－27和编码这种多肽的多核苷酸

说明书

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明描述了一种新的多肽——人蛋白激酶TAK1-27，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。

细胞通讯是指一个细胞发出的信息通过介质传递到另一个细胞产生相应的反应。细胞间的通讯对于多细胞生物体的发生和组织的构建，协调细胞的功能，控制细胞的生长和分裂是必须的。

细胞以三种方式进行通讯：(1)细胞通过分泌化学信号进行相互通讯；(2)细胞间直接接触，通过与质膜结合的信号分子影响其它细胞；(3)细胞间形成间隙连接使细胞质相互沟通，通过交换小分子来调节代谢反应。其中，细胞通过分泌化学信号进行细胞间通讯的过程包括6个基本步骤：(1)化学信号分子的合成；(2)信号细胞释放化学信号分子；(3)信号分子转运至靶细胞；(4)识别信号分子，通常是通过特异性受体识别；(5)信息的跨膜传递；(6)生物学效应。其中，细胞的化学信号分子又可分为亲脂性和亲水性两类：(1)亲脂性信号分子，主要代表是甾类激素和甲状腺素，可穿过细胞质膜进入细胞，与细胞质或细胞核中受体结合形成复合物；(2)亲水性信号分子，包括神经递质、生长因子、局部化学递质和大多数激素，他们不能穿过靶细胞质膜，而是通过与细胞表面受体结合，再经信号转换机制，在细胞内产生第二信使跨膜传递信息。

TAK1是一种老鼠的蛋白质激酶。它通过将信号分子磷酸化来参与并且调节转化生长β因子(TGF-β)的转录。进一步研究表明，TAK1的蛋白质激酶活性由TGF-β和骨骼形态发生蛋白激活。这表明TAK1的功能是TGF-β超家族成员信号通路的调节蛋白[Kyoko Yamaguchi,Kyoko Shiakabe et.al.,Science270(5244),2008-2011(1995)]。

TAK1基因编码579个氨基酸的蛋白质。TAK1蛋白的基本序列包含了一个有蛋白质激酶催化功能域的N端和一个大约300个氨基酸残基的C端结构域。TAK1蛋白的N端催化功能域包含有一个共有序列，该序列与蛋白质激酶RAF-1和MEKK1的亚结构域相对应[S.K.Hanks,A.M.Quinn,T.Hunter,Science241,42(1988)]。TAK1蛋白N端催化功能域与RAF-1和MEKK1的催化功能域有30％的一致性[T.I.Bonner et al.,Nucleic Acids Res.14,1009(1986)][C.A.Lange-Carter,C.M.Pleiman,A.M.Gardner,K.J.Blumer,G.L.Johnon,Science260,315(1993)]。TAK1蛋白的C末端300个氨基酸的下游序列与其它蛋白质激酶没有明显的相似性。TAK1蛋白N末端起始22个氨基酸中的11个氨基酸残基是丝氨酸或苏氨酸残基磷酸化后，可能起着召集信号分子或参与限制激酶活性的催化活动。

通过Northernblot实验表明，TAK1 mRNA几乎存在与所有的组织和器官，尤其是在胸腺和大脑中含量很丰富，而在肝中含量相对较少。

本发明的人的基因与蛋白激酶TAK1家族中的成员在蛋白水平上有50％的同一性及71％的相似性。且两者的蛋白序列均含有蛋白激酶TAK1家族的特征性重复序列。基于以上各点，故认为本发明的新基因为人蛋白激酶TAK1家族的新成员，命名为人蛋白激酶TAK1-27。并以此推断其与人蛋白激酶TAK1相似，同为人蛋白激酶家族的成员，并具有相似的生物学功能。

由于如上所述人蛋白激酶TAK1-27蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人蛋白激酶TAK1-27蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人蛋白激酶TAK1-27蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。

本发明的一个目的是提供分离的新的多肽——人蛋白激酶TAK1-27以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。

本发明的另一个目的是提供含有编码人蛋白激酶TAK1-27的多核苷酸的重组载体。

本发明的另一个目的是提供含有编码人蛋白激酶TAK1-27的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。

本发明的另一个目的是提供生产人蛋白激酶TAK1-27的方法。

本发明的另一个目的是提供针对本发明的多肽——人蛋白激酶TAK1-27的抗体。