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[发明专利]一种聚乙二醇修饰的rhG‑CSF活性药物组合物-CN201510033535.3有效
发明人：窦燕峰 -专利权人：石药集团百克（山东）生物制药有限公司
申请日： 2015-01-23 - 公布日： 2017-09-12 - 主分类号： A61K38/19 文献下载
摘要：本发明提供了一种聚乙二醇修饰的rhG‑CSF活性药物组合物。本发明的聚乙二醇修饰的rhG‑CSF活性组合物药物包括以下组分组分ⅠN‑末端mono‑mPEG‑rhG‑CSF，95.0%≤纯度＜98.0%；组分ⅡrhG‑CSF、非N‑末端mono‑mPEG‑rhG‑CSF、di‑mPEG‑rhG‑CSF、tri‑mPEG‑rhG‑CSF中的一种或者几种，0%≤含量≤5.0%，且0%≤rhG‑CSF含量≤3.0%；组分ⅢmPEG，0%≤含量≤5.0%；以及其他组分，包含外源性本发明提供的聚乙二醇修饰的rhG‑CSF组合物的药物活性，各项指标均符合药用要求，质量稳定，且体外活性、半衰期、安全性等方面均优于现有技术产品，能够保证聚乙二醇修饰的rhG‑CSF制剂的临床疗效及用药安全
一种聚乙二醇修饰 rhg csf 活性药物组合

[发明专利]一种聚乙二醇修饰的rhG-CSF药物组合物及其制备方法-CN201310022078.9有效
发明人：梁关军;窦燕峰;王龙山;徐光 -专利权人：石药集团百克(山东)生物制药有限公司
申请日： 2013-01-05 - 公布日： 2014-07-09 - 主分类号： A61K38/19 文献下载
摘要：本发明提供了一种聚乙二醇修饰的rhG-CSF药物组合物及其制备方法。本发明的聚乙二醇修饰的rhG-CSF药物组合物包括以下组分：组分I：N-末端mono-mPEG₂₀₀₀₀-rhG-CSF，纯度≥95.0％；组分II：选自rhG-CSF、非N-末端mono-mPEG₂₀₀₀₀-rhG-CSF、di-mPEG₂₀₀₀₀-rhG-CSF、tri-mPEG₂₀₀₀₀-rhG-CSF中的一种或几种，0≤含量≤5.0％，且0≤rhG-CSF含量≤3.0％；组分III：mPEG₂₀₀₀₀，0≤含量≤5.0％；以及残余量杂质，含量＜0.5％。本发明提供的聚乙二醇修饰的rhG-CSF药物活性组合物，各项指标均符合药用要求，质量均一，且体外活性、半衰期、安全性等方面均优于现有技术产品，能够保证聚乙二醇修饰的rhG-CSF制剂的临床疗效及用药安全
一种聚乙二醇修饰 rhg csf 药物组合及其制备方法

[发明专利]一种聚乙二醇单修饰的重组人粒细胞集落刺激因子的制备及分离纯化方法-CN201010569604.X在审
发明人：赵志全;刘忠;张培彪 -专利权人：山东新时代药业有限公司
申请日： 2010-12-02 - 公布日： 2012-06-06 - 主分类号： C07K1/113 文献下载
摘要：本发明属于生物医药领域，具体涉及蛋白质的聚乙二醇修饰及分离纯化，特别涉及一种聚乙二醇单修饰的重组人粒细胞集落刺激因子(PEG-rhG-CSF)的制备和纯化。通过优化修饰反应体系及反应条件，获得了大于70％的单修饰PEG-rhG-CSF和小于2.3％的多修饰PEG-rhG-CSF；通过控制分离纯化过程中的工艺参数，获得了高纯度和高活性的单修饰PEG-rhG-CSF，并且PEG-rhG-CSF收率达到85％以上。
一种聚乙二醇修饰重组粒细胞集落刺激因子制备分离纯化方法

[发明专利]聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子冻干制剂-CN202111323201.1有效
发明人：郝贵周;王苗苗 -专利权人：山东新时代药业有限公司
申请日： 2021-11-03 - 公布日： 2022-06-14 - 主分类号： A61K9/19 文献下载
摘要：本发明提供了一种聚乙二醇化重组人粒细胞集落刺激因子(PEG‑rhG‑CSF)冻干制剂，将PEG‑rhG‑CSF和赋形剂进行喷雾冷冻干燥处理，所制备的PEG‑rhG‑CSF冻干制剂临床使用时，配备含有氯化钠本发明所制备的PEG‑rhG‑CSF冻干制剂，不含表面活性剂吐温20，用药安全性高，稳定性好，可以长期储存，且制备工艺简单，生产周期短。
聚乙二醇重组粒细胞集落刺激因子制剂

[发明专利]聚乙二醇单修饰的重组人集落细胞刺激因子赖氨酸缺陷体-CN200710070374.0无效
发明人：金荣;刘晓妮;徐飞虎;单剑峰;戎亚雯;方井晋;马国昌;王同映;黄岩山 -专利权人：杭州九源基因工程有限公司
申请日： 2007-07-27 - 公布日： 2009-01-28 - 主分类号： A61K47/48 文献下载
摘要：本发明公开了一种聚乙二醇单修饰的重组人粒细胞集落刺激因子赖氨酸缺陷体(PEG－rhG－CSF－Lys^D)。通过噬菌体展示技术表达所有赖氨酸突变的重组人粒细胞集落刺激因子赖氨酸缺陷体(rhG－CSF－Lys^D)，然后利用重组人粒细胞集落刺激因子受体筛选出具有高活性的rhG－CSF－Lys最后，高活性的重组人粒细胞集落刺激因子赖氨酸缺陷体(rhG－CSF－Lys^D)经聚乙二醇氨基反应试剂定点化学修饰，获得N端定点修饰结构均一的PEG－rhG－CSF－Lys
聚乙二醇修饰重组集落细胞刺激因子赖氨酸缺陷

[发明专利]重组人粒细胞集落刺激因子及其化学修饰物的一步纯化工艺-CN200410007171.3无效
发明人：范开;王建;张宪;陈海蓉;胡伟 -专利权人：重庆富进生物医药有限公司
申请日： 2004-03-01 - 公布日： 2005-09-07 - 主分类号： C07K17/08 文献下载
摘要：本发明涉及一种简单高效的纯化重组人粒细胞集落刺激因子(rhG－CSF)及其化学修饰产物的一步纯化工艺。该工艺主要采用阳离子交换层析的方法，通过一步层析而有效地得到高活性、高纯度和高回收率的rhG－CSF和聚乙二醇化学修饰的rhG－CSF，特别适合于产业化生产。
重组粒细胞集落刺激因子及其化学修饰一步纯化工艺

[发明专利]一种聚乙二醇修饰的rhG-CSF注射液及其制备方法-CN201310022113.7有效
发明人：盖来兵;窦燕峰;张雪梅;王龙山 -专利权人：石药集团百克(山东)生物制药有限公司
申请日： 2013-01-05 - 公布日： 2014-07-09 - 主分类号： A61K9/08 文献下载
摘要：本发明提供了一种聚乙二醇修饰的rhG-CSF注射液及其制备方法。所述注射液由mPEG₂₀₀₀₀-rhG-CSF、稳定剂、等渗剂、pH3.5～4.5的缓冲液及注射用水组成，其中，每毫升注射液中含mPEG₂₀₀₀₀-rhG-CSF因此，本发明的聚乙二醇修饰的rhG-CSF注射液成本低廉、性质稳定，提高了患者临床用药的顺应性。
一种聚乙二醇修饰 rhg csf 注射液及其制备方法

[发明专利]一种聚乙二醇修饰rhG-CSF的制备方法-CN202210466641.0在审
发明人：刘忠;王磊;刘文财 -专利权人：山东新时代药业有限公司
申请日： 2022-04-27 - 公布日： 2022-08-05 - 主分类号： C07K14/535 文献下载
摘要：本发明属于生物医药领域，具体涉及一种聚乙二醇修饰rhG‑CSF的制备方法。具体包括如下内容：以复合层析介质为固相反应载体，将rhG‑CSF蛋白上样吸附于层析填料上，以聚乙二醇修饰剂为流动相，在催化剂催化的条件下，完成修饰反应，反应完成后采用梯度洗脱获得聚乙二醇修饰的蛋白mPEG‑rhG‑CSF采用上述制备方法，可获得单修饰率与纯度较高的mPEG‑rhG‑CSF修饰蛋白，所得mPEG修饰蛋白单修饰率达91％以上，纯度达到99.3％以上；同时该制备方法简化了修饰、纯化反应操作，大大降低生产成本，
一种聚乙二醇修饰 rhg csf 制备方法

[发明专利]一种修复治疗脏器损伤的药物-CN200510045369.5无效
发明人：张雪山;徐宜铁;赵风 -专利权人：山东格兰百克生物制药有限公司
申请日： 2005-12-16 - 公布日： 2006-08-30 - 主分类号： A61K47/48 文献下载
摘要：本发明为一种修复治疗脏器损伤的蛋白质药物，其采用聚乙二醇修饰的重组人粒细胞集落刺激因子(PEG－rhG－CSF)为主要有效成分，具有较高的药效和较长的稳定的持效期，并能够方便的实现工业化生产。PEG化rhG－CSF半衰期延长，药效更持久；PEG化可以降低蛋白质药物抗原性，扩大药物的应用范围；PEG化还可能导致蛋白质药物具有某些新的活性特征。本发明PEG－rhG－CSF对心脏、肝脏等病理损伤的修复有较好的效果。该药可减小心肌梗死范围，增加心肌小血管密度，治疗作用优于治疗药物硫氮唑酮和rhG－CSF对照组，在临床上具有理想的治疗效果。
一种修复治疗脏器损伤药物

[发明专利]一种rhG-CSF重组工程菌的发酵培养方法-CN201010618757.9有效
发明人：赵志全;刘忠 -专利权人：山东新时代药业有限公司
申请日： 2010-12-31 - 公布日： 2011-08-17 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：通过种子的优化制备，发酵过程中通过在发酵液中添加乳糖、发酵期间乳糖的流加以及溶氧和补料控制，使得rhG-CSF蛋白的表达量占菌体总蛋白的50%以上，收集的菌体置于-20℃保存，或直接用于制备高纯度的rhG-CSF蛋白，采用本发明生产的rhG-CSF蛋白，经纯化后纯度可达99.6%以上，生物活性不低于5.0×108IU/mg。
一种 rhg csf 重组工程发酵培养方法

[发明专利]一种测定重组人粒细胞集落刺激因子二硫键组成的方法-CN201810126229.8在审
发明人：刘海龙;王英武;刘斌;孙莹莹 -专利权人：吉林大学
申请日： 2018-02-08 - 公布日： 2018-07-27 - 主分类号： G01N30/06 文献下载
摘要：是利用LC‑Q‑Q‑TOF联用技术与“柱后在线还原法”相结合测定rhG‑CSF二硫键以及二硫键错配比例的方法。测试步骤有采用胃蛋白酶在缓冲液pH5.0的条件下对rhG‑CSF进行酶切、还原样品和未还原样品的LC‑MS检测、未还原样品的在线柱后还原液相色谱质谱联用检测。本发明直接在酸性条件下对rhG‑CSF进行酶解，省略变性和烷基化步骤使操作简洁，反应条件温和，重复性好，灵敏度高；搭配在线柱后还原法可显著降低数据分析难度；鉴定rhG‑CSF的二硫键和计算二硫键错配比例结果更可靠
二硫键还原样品重组人粒细胞集落刺激因子还原法数据分析错配蛋白质组学烷基化步骤测试步骤反应条件结合测定联用技术实验过程酸性条件胃蛋白酶质谱联用还原液缓冲液灵敏度省略变性酶解酶切色谱搭配检测

[发明专利]一种rhG-CSF的发酵培养基及其发酵方法-CN202111671633.1在审
发明人：张贵民;冀成法;马鲁南;刘忠 -专利权人：山东新时代药业有限公司
申请日： 2021-12-31 - 公布日： 2022-04-15 - 主分类号： C12N1/38 文献下载
摘要：本发明属于微生物发酵技术领域，特别涉及rhG‑CSF的发酵培养基及发酵方法。本发明通过优化不同时期发酵温度的控制范围和发酵pH值控制范围，改变基础培养基碳源的添加时间，优化培养基配比和补料量，限制性流加补料，低浓度的IPTG与乳糖协同诱导，更有利于rhG‑CSF发酵的高密度高表达发酵结束，发酵密度OD600值达到100以上，发酵目的蛋白表达量达到77％以上，质粒丢失率在4％以内，本发明的rhG‑CSF高密度发酵提高了生产效率，具有很好的应用前景。
一种 rhg csf 发酵培养基及其方法

[发明专利]重组人粒细胞集落刺激因子的高压定点聚乙二醇修饰方法-CN202211456278.0在审
发明人：王祺 -专利权人：浙江大学医学院附属第一医院
申请日： 2022-11-21 - 公布日： 2023-02-03 - 主分类号： C07K14/535 文献下载
摘要：本发明提供重组人粒细胞集落刺激因子的高压定点聚乙二醇修饰方法，通过对rhG‑CSF和马来酰亚胺聚乙二醇修饰试剂的混合溶液在0.1‑600MPa压力下反应6‑24h；对修饰后的产物进行分离纯化并进行结构和活性验证本发明方法能提高rhG‑CSF修饰反应效率，使用mPEG‑40kDa‑MAL和mPEG‑20kDa‑MAL定点修饰rhG‑CSF时分别能够提升蛋白单修饰率达到32％和45％，而常压下几乎不发生修饰反应，
重组粒细胞集落刺激因子高压定点聚乙二醇修饰方法

[发明专利]一种重组人粒细胞集落刺激因子的制备方法-CN201310150982.8无效
发明人：岑仡;宋宏 -专利权人：上海三维生物技术有限公司
申请日： 2013-04-26 - 公布日： 2014-10-29 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种重组人粒细胞集落刺激因子的制备方法，包括：对rhG-CSF基因工程菌进行发酵培养，然后将培养菌体混悬于裂解液中，制得包涵体；将包涵体进行变性处理，然后用柱层析进行复性，得rhG-CSF复性液采用柱层析复性的方法，简化了操作方式，使重组人粒细胞集落刺激因子的复性收率高于70%；复性液经过阳离子交换和分子筛层析后制备成rhG-CSF的原液。
一种重组粒细胞集落刺激因子制备方法

[发明专利]一种重组人粒细胞集落刺激因子的生产方法-CN96106418.8无效
发明人：苏勇;孔铁山;王昌梅;黄岩山;孙汉栋 -专利权人：杭州九源基因工程有限公司
申请日： 1996-06-05 - 公布日： 2002-04-24 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明涉及一种重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)的生产方法。该方法采用反转录后的聚合酶链式(RT-PCR)反应，钓取人粒细胞集落刺激因子基因，转化E.coli菌；蛋白以中空纤维超滤透析方式复性，经离子交换层析、疏水层析和分子筛层析顺序组合，纯化，大规模制得高纯度的药用rhG-CSF
一种重组粒细胞集落刺激因子生产方法

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