本发明公开了一种用于靶向敲除人NKG2A/KLRC1基因的sgRNA,属于基因工程技术领域,所述sgRNA具有如SEQ ID NO.1‑56中的任一种核苷酸序列,本发明还公开了用于靶向敲除人NKG2A/KLRC1基因的sgRNA组合物、表达载体、CRISPR/Cas9系统、试剂盒及其在制备治疗肿瘤疾病的免疫细胞药物中的用途;利用本发明制备的特异性靶向人NKG2A/KLRC1基因能够精确的靶向人NKG2A/KLRC1基因并实现有效的敲除,同时,所得的人NKG2A/KLRC1基因敲除免疫细胞适用于多种肿瘤细胞模型;该制备方法步骤简单、sgRNA靶向特异性好,CRISPR/Cas9系统的敲除效率高。
本发明公开了一种检测NKG2C基因型的试剂盒与应用。本发明公开的检测NKG2C基因型的试剂盒由检测NKG2C基因型的成套试剂、SsoAdvancedTM Universal SYBR Green Supermix(Bio‑rad公司)、TE缓冲液以及作为标准品的Hela细胞基因组DNA、293T细胞基因组DNA和K562细胞基因组DNA组成,检测NKG2C基因型的成套试剂由名称分别为P1、P2、P3和P4的四条单链DNA组成,P1、P2、P3和P4的序列分别为序列表中序列本发明的成套试剂和试剂盒在检测NKG2C基因型时,反应体系稳定,检测方便,准确率高。
本发明涉及基因工程领域,公开了一种用于靶向敲除人NKG2A/KLRC1基因的sgRNA,所述sgRNA具有如SEQ ID NO.1‑56中的任一种核苷酸序列,本发明还公开了用于靶向敲除人NKG2A/KLRC1基因的sgRNA组合物、表达载体、CRISPR/Cas9系统、试剂盒及其在制备治疗肿瘤疾病的免疫细胞药物中的用途;利用本发明制备的特异性靶向人NKG2A/KLRC1基因能够精确的靶向人NKG2A/KLRC1基因并实现有效的敲除,同时所得的人NKG2A/KLRC1基因敲除免疫细胞适用于多种肿瘤细胞模型,并且该制备方法具有步骤简单、sgRNA靶向特异性好以及CRISPR/Cas9系统敲除效率高的优点。