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[发明专利]使用抗LGR7抗体的癌症的诊断和治疗-CN200980157661.2无效
发明人：油谷浩幸;上原由利子;舟桥真一 -专利权人：国立大学法人东京大学;株式会社未来创药研究所
申请日： 2009-12-25 - 公布日： 2012-03-28 - 主分类号： C07K16/30 文献下载
摘要：本发明人等进行了深入研究，结果发现：在卵巢癌中的明细胞腺癌细胞中，不仅LGR7的基因就连其蛋白也高度表达。并且，本发明人等还发现：抗LGR7抗体对LGR7表达细胞具有抗体依赖性细胞毒(ADCC)活性和补体依赖性细胞毒(CDC)活性。根据以上的认识，本发明人等发现：抗LGR7抗体对原发性或转移性卵巢明细胞腺癌的诊断、预防和治疗有效。
使用 lgr7 抗体癌症诊断治疗

[发明专利]一种Serpine2基因小鼠模型构建方法与应用-CN202110198446.X在审
发明人：柴人杰;陈蔚;张莎莎;程诚;高下 -专利权人：东南大学
申请日： 2021-02-20 - 公布日： 2021-05-18 - 主分类号： C12N5/0797 文献下载
摘要：一种Serpine2基因小鼠模型构建方法，包括以下步骤：培养初代OC细胞；通过siRNA敲减所述OC细胞中的Serpine2基因；取新生Lgr5‑EGFP小鼠耳蜗，放入培养液中培养，并消化成单细胞；从含有Lgr5‑EGFP细胞的单细胞悬液中分选出Lgr5+细胞；用所述siRNA敲除Lgr5+细胞中的Serpine2基因；培养Serpine2基因敲减的Lgr5+细胞，扫描电子显微镜观察并记录成球细胞的数量和直径；培养第一代所述成球细胞，用EdU染色以及DAPI、Myo7a抗体标记染色，观察毛细胞分化的情况。
一种 serpine2 基因小鼠模型构建方法应用

[发明专利]结合LGR5的人源化抗体-CN201580026619.2有效
发明人：克里斯多佛·里耶斯;彼得·朱;克里斯汀·M·史密斯;柳德米拉·A·坎贝尔;法波·舒贾埃;约翰·托马斯·诺顿 -专利权人：生态学有限公司
申请日： 2015-04-02 - 公布日： 2020-02-07 - 主分类号： C07K16/28 文献下载
摘要：本文公开了用于治疗癌症的人源化抗‑LGR5抗体。本文公开的抗体可以结合LGR5而不破坏LGR5‑RSPO1结合或信号转导，以及可以破坏独立于RSPO1的通过Wnt的LGR5信号转导。还公开了忍受LGR5(例如不破坏LGR5‑RSPO结合或信号转导)的重链和轻链多肽序列。
结合 lgr5 人源化抗体

[发明专利]纤维化疾病的治疗-CN201580049993.4在审
发明人： J·A·卡隐 -专利权人：昂考梅德药品有限公司
申请日： 2015-09-15 - 公布日： 2017-05-17 - 主分类号： A61K39/395 文献下载
摘要：本发明涉及RSPO和LGR拮抗剂，以及使用RSPO和LGR拮抗剂治疗或预防纤维化疾病的方法。本发明提供了治疗受试者中的纤维化疾病的方法，其中所述方法包括对受试者施用治疗有效量的RSPO和/或LGR拮抗剂，例如抗RSPO抗体、抗LGR抗体或可溶性LGR受体。本发明还提供了治疗或预防受试者中的纤维化疾病的方法，其包括对受试者施用治疗有效量的LGR结合剂、包括本文所述的那些LGR结合剂中的任一种。
纤维化疾病治疗

[发明专利]Lgr5基因在保护内耳毛细胞及促进支持细胞再生上的应用-CN202110168127.4在审
发明人：柴人杰;张李燕;高下;唐明亮;张莎莎 -专利权人：东南大学
申请日： 2021-02-07 - 公布日： 2021-07-23 - 主分类号： C12N15/12 文献下载
摘要：本发明公开了Lgr5基因在保护内耳毛细胞及促进支持细胞再生上的应用。所述Lgr5的C端具有如SEQ NO.1所示的核苷酸序列，且N端的第190位具有编码丙氨酸的核苷酸序列。首先构建了Lgr5、Lgr5‑C（Lgr5上823位氨基酸后全部截断）和Lgr5‑190（Lgr5上190位氨基酸由丙氨酸变为天冬氨酸）的腺病毒，分别探究Lgr5基因的C末端和N末端对毛细胞的保护作用和内耳干细胞的再生作用，最后分别研究Lgr5基因的C末端和N末端在内耳中的作用机制，从而确定Lgr5基因对毛细胞的保护和支持细胞再生为毛细胞的作用机制，为治疗耳聋提供新的理论思路，代替助听器和人工耳蜗帮助患者恢复和重建听觉功能
lgr5 基因保护内耳细胞促进支持再生应用

[发明专利]一种猪Lgr5基因及其应用-CN201510082658.6有效
发明人：王修启;严会超;高春起;陈荣强;李长茂 -专利权人：华南农业大学
申请日： 2015-02-16 - 公布日： 2018-08-07 - 主分类号： C12N15/12 文献下载
摘要：本发明属于家畜分子分子生物学技术领域，具体公开了一种猪Lgr5基因及其应用，所述基因的序列如SEQ ID NO：1所示，本发明利用人Lgr5基因和小鼠Lgr5基因为参照序列，设计特异性引物，运用RACE、普通PCR、重叠PCR的方法首次克隆出猪Lgr5 cDNA；后续研究发现过表达Lgr5基因能够促进细胞增殖，加快损伤的细胞修复，本发明所述Lgr5为后续猪Lgr5基因的功能研究和小肠干细胞的研究奠定了重要基础
种猪 lgr5 基因及其应用

[发明专利]一种靶向结肠癌的重组腺相关病毒的构建方法及其应用-CN202310573387.9在审
发明人：张慧梨;王毅刚;李强;贾晓渊;黄飚 -专利权人：浙江理工大学绍兴生物医药研究院有限公司;浙江理工大学
申请日： 2023-05-19 - 公布日： 2023-09-22 - 主分类号： C12N15/864 文献下载
摘要：本发明公开的是一种靶向结肠癌的重组腺相关病毒的构建方法及其应用，筛选LGR5启动子的核心序列；表达MDA‑7/IL24基因的重组腺相关病毒；采用三质粒共转染悬浮细胞，以实现利用悬浮细胞建立了AAV‑lgr5‑IL24的批量生产建立悬浮包装系统；从悬浮包装系统中获取病毒粗液；密度梯度离心法纯化获的纯的重组病毒：通过氯化铯密度梯度离心进行纯化，获得纯的AAV‑lgr5‑IL24；qPCR绝对定量法检测病毒颗粒数：利用荧光定量PCR检测rAAV的病毒颗粒数，重组腺相关病毒AAV‑lgr5‑IL24能够抑制结肠癌细胞的增殖和发展，为临床上恶性肿瘤的治疗提供一定的参考价值，为抗肿瘤药物的开发提供新思路。
一种靶向结肠癌重组相关病毒构建方法及其应用

[发明专利]Rps14和Foxg1调控内耳干细胞增殖分化方法及其应用-CN202110194253.7在审
发明人：柴人杰;张盼盼;张莎莎;程诚;高下 -专利权人：东南大学
申请日： 2021-02-20 - 公布日： 2021-06-04 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，具体的是Rps14和Foxg1调控内耳干细胞增殖分化方法及其应用，方法包括：一、Rps14基因对Lgr5+内耳干细胞增殖和分化的调控：1、OC‑1细胞培养；2、siRNA敲除Rps14基因；3、Lgr5+祖细胞的分离培养及Rps14基因敲除；4、Rps14基因敲除的Lgr5+祖细胞生物学效应，二、敲除Lgr5+祖细胞Foxg1对毛细胞增殖的影响。本发明将Lgr5‑EGFP‑CreERT2小鼠与Foxg1‑floxp小鼠杂交，在Lgr5+祖细胞中有条件地敲除Foxg1，发现Lgr5+祖细胞中敲除Foxg1能诱导新生小鼠耳蜗产生额外的IHCs。通过OC‑1细胞利用不同siRNA敲除Rps14基因，RT‑qPCR检测转染效果；分离培养Lgr5+内耳干细胞转染后检测增殖及分化，通过Lgr5+干细胞上进行成球分化实验表明敲减Rps14基因会抑制干细胞的增殖
rps14 foxg1 调控内耳干细胞增殖分化方法及其应用

[发明专利]抗LGR5蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞及其产生的抗LGR5单克隆抗体和应用-CN201510703789.1在审
发明人：何为无;马东晖;袁克湖;陈才伟;王宜;褚伯阳;王广力;舒又敏 -专利权人：无锡傲锐东源生物科技有限公司
申请日： 2015-10-26 - 公布日： 2016-01-27 - 主分类号： C12N5/20 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，公开了抗LGR5蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞及其产生的抗LGR5单克隆抗体和应用。本发明所述抗LGR5蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞保藏编号为CGMCC NO：11086。本发明提供的杂交瘤细胞可稳定分泌产生抗LGR5蛋白单克隆抗体，且与LGR5蛋白特异性结合，而与蛋白芯片上近10000种其他蛋白无交叉反应，显著提高了LGR5蛋白免疫检测的特异性、准确性和可靠性，广泛适用于各种干细胞和肿瘤干细胞的标记
lgr5 蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞及其产生应用

[发明专利]Gpm6b调控内耳干细胞增殖分化方法及在毛细胞再生中的应用-CN202110194117.8在审
发明人：柴人杰;蔡嘉颖;张莎莎;程诚;高下 -专利权人：东南大学
申请日： 2021-02-20 - 公布日： 2021-06-01 - 主分类号： C12N15/87 文献下载
摘要：分化方法的步骤：OC‑1细胞培养；siRNA敲低Gpm6b基因，采用N1301、N885、N1082三种不同的siRNA敲减OC‑1细胞中的Gpm6b基因；Lgr5+祖细胞的分离培养及Gpm6b基因敲低，Lgr5+祖细胞消化成单细胞后，采用流式细胞分选技术进行分选，经培养后再Gpm6b基因敲低；Gpm6b基因敲低对Lgr5+祖细胞增殖/分化的影响，采用细胞成球实验、EdU染色实验和免疫荧光实验研究Gpm6b基因敲减对Lgr5+细胞增殖/分化的影响，再评估Lgr5+细胞增殖、分化为毛细胞的能力；数据分析，采用GraphPadPrism 6进行数据统计分析。本发明敲低Gpm6b基因后对于Lgr5+细胞成球有抑制作用，即Gpm6b敲低抑制Lgr5+细胞增殖。而Gpm6b基因敲减对Lgr5+细胞分化再生毛细胞无调控作用。
gpm6b 调控内耳干细胞增殖分化方法细胞再生中的应用

[发明专利]一种Dkk3基因小鼠模型的构建方法与应用-CN202110194101.7有效
发明人：柴人杰;李益歌;张莎莎;程诚;高下 -专利权人：东南大学
申请日： 2021-02-20 - 公布日： 2023-08-18 - 主分类号： C12N15/113 文献下载
摘要：一种Dkk3基因小鼠模型的构建方法，包括以下步骤：步骤1：培养OC‑1细胞；用siRNA敲减所述OC‑1细胞中的Dkk3基因，检测敲减效率；步骤2：取新生Lgr5‑EGFP小鼠耳蜗，消化成单细胞；从所述Lgr5‑EGFP细胞悬液中分选出Lgr5+细胞；步骤3：OC‑1细胞中敲低效率最佳的siRNA敲低Lgr5+细胞中的Dkk3基因；步骤4：进行细胞成球试验，观察并量化球形的数量和直径来评估Lgr5+细胞的增殖能力
一种 dkk3 基因小鼠模型构建方法应用

[发明专利]半导体器件及其制造方法-CN201410419944.2有效
发明人：新井耕一 -专利权人：瑞萨电子株式会社
申请日： 2014-08-22 - 公布日： 2019-10-25 - 主分类号： H01L29/808 文献下载
摘要：在一实施方式中的半导体器件中，结型场效应晶体管的栅极区域(GR)具有低浓度栅极区域(LGR)和杂质浓度比低浓度栅极区域(LGR)高的高浓度栅极区域(HGR)，且高浓度栅极区域(HGR)内包于低浓度栅极区域(LGR)中。
半导体器件及其制造方法

[发明专利]一种GPA、Espin、Ikzf2小鼠模型的构建方法-CN202110194377.5有效
发明人：柴人杰;陈蔚;张莎莎;程诚;高下 -专利权人：东南大学
申请日： 2021-02-20 - 公布日： 2022-08-16 - 主分类号： C12N15/12 文献下载
摘要：一种GPA、Espin、Ikzf2小鼠模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：生成Lgr5‑CreER阳性、GPA阳性且tdTomato阳性小鼠，使GPA在表达Lgr5的耳蜗支持细胞中特异性表达，在小鼠鼠龄到达3天和4天时，给小鼠注射他莫昔芬，在鼠龄10天时解剖耳蜗；对Myo7a阳性、tdTomato阳性细胞进行标记，并统计其数量；鉴定小鼠耳蜗中的毛细胞生成情况。
一种 gpa espin ikzf2 小鼠模型构建方法

[发明专利]一种靶向消化道肿瘤双靶向溶瘤腺病毒的构建方法及其应用-CN202111508787.9在审
发明人：王毅刚;张蕾蕾;李强;周秀梅;黄飚;黄芳;刘慧慧;张慧梨 -专利权人：浙江理工大学;浙江理工大学绍兴生物医药研究院有限公司
申请日： 2021-12-10 - 公布日： 2023-01-31 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开的是一种靶向消化道肿瘤双靶向溶瘤腺病毒的构建方法及其应用，先得到LGR5核心启动子，双酶切后替换掉pXC2上E1A的野生型启动子，得到pXC2‑LGR5；再双酶切得到LGR5‑E1A片断后与pSD55相连，得到pSD55‑LGR5；需携带基因时，先获取目的基因，连接到pCA13载体上得到pCA13‑gene，酶切得到基因表达框，连接到pSD55‑LGR5载体上，得到pSD55‑LGR5‑gene质粒再线性化转化到含有全序列腺病毒骨架DNA的质粒Adeasy‑1大肠杆菌BJ5183中重组，产生携带目的基因的腺病毒骨架DNA质粒载体；酶切线性化后，转染到细胞中进行病毒包装，待细胞出现病变后，得到目的溶瘤腺病毒LGR5
一种靶向消化道肿瘤溶瘤腺病毒构建方法及其应用

[发明专利]一种Lgr5阳性肝脏干细胞诱导方法及其检测应用-CN201711019998.X在审
发明人：周伟杰;林媛 -专利权人：南方医科大学
申请日： 2017-10-26 - 公布日： 2018-05-04 - 主分类号： A61K38/18 文献下载
摘要：本申请公开了一种Lgr5阳性肝脏干细胞诱导方法及其检测应用。本发明Lgr5阳性肝脏干细胞诱导方法，通过HGF和/或Rspo1诱导Lgr5阳性肝脏干细胞回复肝功能损伤；所述方法利用各组织器官内源干细胞的自我更新和多功能分化能力，通过可溶性分子直接刺激活化体内组织器官内源干细胞本发明验证了HGF与Rspo1蛋白对人Lgr5+肝脏干细胞的诱导作用。
一种 lgr5 阳性肝脏干细胞诱导方法及其检测应用

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