本发明公开了一种鸭疫里默氏杆菌PCR检测方法,包括如下步骤:根据鸭疫里默氏杆菌基因组DNA序列中gyrB基因的保守序列SEQ ID NO:1设计扩增引物;提取样品DNA,PCR法扩增;凝胶电泳检测扩增产物,判断样品是否含有鸭疫里默氏杆菌;所述判断具体为:如果电泳结果出现相应的单一扩增条带,则说明样品中含有鸭疫里默氏杆菌;如果没有出现相应的单一扩增条带,则样品中不含该菌。采用本发明的检测方法检测鸭疫里默氏杆菌,检测时间短,成本底,检测结果特异,结果判定简单。
本发明涉及一种基于鸭疫里默氏菌Imp基因的PCR检测试剂盒及其方法,所述试剂盒含有如SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3所示的引物对;其中鸭疫里默氏菌Imp基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;本发明通过以Imp基因为靶基因对鸭疫里默氏菌进行检测,具有显著的特异性和较高的灵敏度,对鸭疫里默氏菌的早期检测具有重要意义。
本发明属于兽医微生物学分子检测技术领域,具体公开了一种鸭疫里默氏菌特异性PCR引物对,其核苷酸序列为:SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2;扩增片段为702bp,用于鸭疫里默氏菌特异性扩增检测本发明又公开了一种鸭疫里默氏菌检测方法。本发明还公开了一种简单快速的鸭疫里默氏菌PCR检测试剂盒,包括盒体,盒体内的试剂包括:(1)SEQ ID NO.1‑2;(2)2倍PCR扩增混合物;(3)质粒DNA阳性对照;(4)阴性对照(H本试剂盒选择特异性的扩增鸭疫里默氏菌16S rRNA片段的引物,并优化了退火温度和反应条件,具有灵敏度高、特异性强的优点,可直接从鸭疫里默氏菌菌液和菌液上清中扩增出特异性片段,适合临床样本分子检测和诊断