本发明公开了一种柔嫩艾美耳球虫重组多肽疫苗VKVQ的制备方法,制备方法包括:步骤一,VKVQ编码基因的克隆,根据鸡球虫基因序列设计上游引物SEQ ID NO:3和下游引物SEQ ID NO:4,进行PCR扩增、电泳得到一条约1200bp的片段,将该产物连接转化后得到序列全长为1245bp的VKVQ,其序列为SEQ ID NO:1以及后续相关步骤。该方法制备的疫苗通过免疫柔嫩艾美耳球虫重组多肽疫苗VKVQ真核表达质粒和原核表达蛋白,能有效控制鸡体感染柔嫩艾美耳球虫,大大降低养鸡场抗球虫药的使用量,有效控制鸡球虫病。
本发明公开了一种核酸分子、PCR引物对及用于检测禽毛滴虫EF1A基因的试剂盒。发明人通过广泛研究,在禽毛滴虫中克隆得到如SEQ ID NO:1所示的禽毛滴虫EF1A全长基因编码序列,并利用该EF1A全长基因编码序列进一步设计得到能够检测禽毛滴虫EF1A基因及其转录水平的PCR引物对和相应的PCR反应条件,进而组装成用于检测禽毛滴虫EF1A基因的试剂盒,从而可以满足寄生生物学、生命科学研究者的检测需要,以及促进对该病原的基因水平检测及其生长应激反应的研究进展,为基因功能研究和药物开发等研究工作提供有利技术支撑。上述PCR引物对重复性高,特异性强,灵敏度高,对非目的基因没有扩增信号。
本发明公开了一种柔嫩艾美耳球虫重组多肽疫苗VNQS的制备方法,制备方法包括:步骤一,VNQS编码基因的克隆,根据鸡球虫基因序列设计上游引物SEQ ID NO:3和下游引物SEQ ID NO:4,进行PCR扩增、电泳得到一条约1500bp的片段,将该产物连接转化后得到序列全长为1452bp的VNQS,其序列为SEQ ID NO:1以及其他相关制备步骤。该方法制备的疫苗通过免疫柔嫩艾美耳球虫重组多肽疫苗VNQS真核表达质粒和原核表达蛋白,能有效控制鸡体感染柔嫩艾美耳球虫,大大降低养鸡场抗球虫药的使用量,有效控制鸡球虫病。
本发明公开了一种核酸分子、PCR引物对及用于检测禽毛滴虫rpoB基因的试剂盒。发明人通过长期研究,在禽毛滴虫中克隆得到如SEQ ID NO:1所示的禽毛滴虫rpoB全长基因编码序列,并利用该rpoB全长基因编码序列进一步设计得到能够检测禽毛滴虫rpoB基因及其转录水平的PCR引物对和相应的PCR反应条件,进而组装成用于检测禽毛滴虫rpoB基因的试剂盒,从而可以满足寄生生物学、生命科学研究者的检测需要,以及促进对该病原的基因水平检测及其致病机制研究的进展,为基因功能研究和药物开发等研究工作提供有利技术支撑。上述PCR引物对重复性高,特异性强,灵敏度高,对非目的基因没有扩增信号。