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[发明专利]高分辨率熔解曲线Tm值确定方法、装置及电子设备-CN202310445056.7在审
发明人：杨智;李冬;余海;贺贤汉 -专利权人：杭州博日科技股份有限公司
申请日： 2023-04-19 - 公布日： 2023-08-04 - 主分类号： G16B40/30 文献下载
摘要：本发明提供了一种高分辨率熔解曲线Tm值确定方法、装置及电子设备，涉及PCR检测技术领域，本发明在确定熔解曲线Tm值时，先求取PCR板每个反应孔的熔解曲线对应的高阶导数曲线；然后基于每条熔解曲线对应的高阶导数曲线，确定相应熔解曲线的初始Tm值；最后通过对各条熔解曲线对应的所有初始Tm值进行聚类分析，确定每条熔解曲线的目标Tm值。这样采用高阶导数法(即求取高阶导数曲线)确定熔解曲线的初始Tm值，提高了熔点峰的分辨率，然后采用聚类分析方法确定目标Tm值，缓解了采用高阶导数法带来的信噪比下降问题，从而实现了高分辨率熔解曲线的Tm值分析
高分辨率熔解曲线 tm 确定方法装置电子设备

[发明专利]一种数字微流控器件及高分辨率熔解曲线分析的方法-CN202111281167.6在审
发明人：李明忠;万谅;罗文基;孟李;贾艳伟;麦沛然;马许愿 -专利权人：澳门大学
申请日： 2021-11-01 - 公布日： 2023-05-05 - 主分类号： G01N25/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种数字微流控器件及高分辨率熔解曲线分析的方法，涉及数字微流控技术领域。本发明提供了一种具有分级微纳结构的功能性基板，用于在数字微流控平台上进行高分辨率的nL级薄层液滴分离并阵列化，从而实现精确的一次性熔解曲线分析。在单元体间隙为50‑500μm的超亲水图案阵列上，本发明将μL级DNA样品实现被动分离成高分辨率nL级薄层液滴，其50μm的表征厚度极大程度减小了液滴内的温差，可以用于高分辨率熔解曲线分析。此外，与传统的数字微流控设备相比，本发明提供的数字微流控设备可实现高准确度以及高分辨率的熔解曲线分析。
一种数字微流控器件高分辨率熔解曲线分析方法

[发明专利]一种高分辨率熔解曲线鉴定耳念珠菌的方法-CN201910726815.0在审
发明人：肖盟;龚杰;黄晶晶;范欣;徐英春;张建中 -专利权人：中国医学科学院北京协和医院
申请日： 2019-08-07 - 公布日： 2019-11-05 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明提供一种高分辨率熔解曲线鉴定耳念珠菌的方法，包括如下步骤：步骤一、准备待鉴定菌株包括耳念菌株和对照菌株的DNA模板；步骤二、设计上下游引物；步骤三、利用高分辨率溶解曲线技术HRM，获取各菌株高分辨溶解曲线图，具体为利用Real‑time PCR技术，通过实时检测DNA熔解过程中荧光信号值的变化获取各菌株高分辨溶解曲线图；步骤四、利用分析软件分析鉴定待鉴定菌株的具体类型；步骤五、测定步骤三中结果为阳性菌株的核苷酸序列本发明提供高分辨率熔解曲线鉴定耳念珠菌的方法，可以明确鉴定耳念珠菌并与相近的菌株进行区分，方法操作简单，准确高效。
菌株高分辨率念珠菌熔解曲线溶解高分辨核苷酸序列分析鉴定分析软件实时检测阳性菌株荧光信号灵敏度熔解引物验证

[发明专利]基于高分辨熔解曲线形状的多重PCR检测方法及试剂盒-CN201910574965.4在审
发明人：徐秦峰;马西亚;贺晓玲 -专利权人：陕西科技大学
申请日： 2019-06-28 - 公布日： 2019-08-30 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于高分辨熔解曲线形状的多重PCR检测方法及试剂盒。本发明采用PCR饱和荧光染料，扩增完成后直接进行高分辨熔解，对采集的熔解曲线进行归一化、差异化或主成分分析，即可实现单管有效同时检测多个靶序列的目的。根据高分辨熔解曲线形状信息而非熔解温度来进行鉴别检测，显著降低了多重PCR分析引物的设计难度，使得具有微小Tm差异的多个PCR扩增产物能够同时检测；避免了开管操作造成目的DNA被污染的可能性，弥补了多色荧光标记或者空间分隔平行下的单重扩增反应成本较高的缺陷
高分辨熔解曲线多重PCR检测检测试剂盒熔解饱和荧光染料多色荧光标记主成分分析分析引物鉴别检测空间分隔扩增反应熔解曲线形状信息多重PCR 靶序列差异化高分辨归一化单管扩增通量平行采集污染应用

[发明专利]基于夹心法高分辨熔解曲线分析的ALK融合基因检测及分型试剂盒-CN201910125272.7有效
发明人：李梅;吕申 -专利权人：大连医科大学附属第二医院
申请日： 2019-02-20 - 公布日： 2022-06-07 - 主分类号： C12Q1/6886 文献下载
摘要：本发明公开了基于夹心法高分辨熔解曲线分析的ALK融合基因检测及分型试剂盒。通过在基因特异引物5’端添加低GC含量接头，分段式扩增出夹心序列目的片段，包含高、低GC含量共有序列和可变序列的融合基因片段。高分辨熔解曲线一般分析方法可判断融合基因有无，应用荧光强度‑温度二阶导数曲线结合关键参数分析方法，实现数字化判断融合基因类型。本发明解决了目前肺癌ALK融合基因检测成本高、周期长、难分型的问题，并集中了实时定量反转录PCR和高分辨熔解曲线分析两种技术的优势，可应用于新鲜组织、石蜡包埋组织、胸水等类型标本融合基因检测。
基于夹心分辨熔解曲线分析 alk 融合基因检测试剂盒

[发明专利]鲍曼不动杆菌携带qacE*1-sull基因的检测方法-CN201510159854.9在审
发明人：张奕;毛丹丹;王校;何骏奇 -专利权人：上海中优医药高科技有限公司
申请日： 2015-04-07 - 公布日： 2015-07-01 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用高分辨熔解曲线分析技术检测鲍曼不动杆菌中是否携带耐消毒剂qacE∆1-sull基因的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：提取菌株样本DNA，设计目的基因的检测引物，根据高分辨熔解曲线分析技术对PCR扩增后的基因进行分析。
不动杆菌携带 qace sull 基因检测方法

[发明专利]一种高分辨率熔解曲线鉴定光滑念珠菌的方法-CN201910727456.0在审
发明人：肖盟;龚杰;侯欣;赵飞;张建中;徐英春 -专利权人：中国医学科学院北京协和医院
申请日： 2019-08-07 - 公布日： 2019-11-22 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明提供一种高分辨率熔解曲线鉴定光滑念珠菌的方法，包括如下步骤：步骤一、准备待鉴定菌株包括光滑念珠菌、尼瓦利亚念珠菌、布加拉念珠菌和对照菌株的DNA模板；步骤二、设计上下游引物；步骤三、利用高分辨率溶解曲线技术HRM，获取各菌株高分辨溶解曲线图，具体为利用Real‑time PCR技术，通过实时检测DNA熔解过程中荧光信号值的变化获取各菌株高分辨溶解曲线图；步骤四、利用分析软件分析鉴定待鉴定菌株的具体类型；步骤五本发明提供高分辨率熔解曲线鉴定光滑念珠菌的方法，可明确鉴定光滑念珠菌复合体中的不同物种，方法操作简单，准确高效。
菌株光滑念珠菌高分辨率溶解熔解曲线高分辨念珠菌核苷酸序列分析鉴定分析软件实时检测阳性菌株荧光信号复合体灵敏度熔解引物物种验证

[发明专利]一种基于高分辨率熔解曲线的基因编辑水稻的鉴别方法-CN202011369046.2在审
发明人：于海涛;赵新;王燕;王璐平;陈锐;兰青阔;王永 -专利权人：天津市农业科学院
申请日： 2020-11-30 - 公布日： 2021-01-05 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于高分辨率熔解曲线的基因编辑水稻的鉴别方法，它是利用高分辨率熔解曲线技术对基因编辑水稻的突变碱基位点进行分析。该技术不需要荧光标记引物及电泳检测就可对已知短序列进行测序分析。本发明的检测方法具有较好的准确性、高效性及灵敏度等优点，为基因编辑型水稻突变碱基位点定性鉴别分析提供了可行的方法。
一种基于高分辨率熔解曲线基因编辑水稻鉴别方法

[发明专利]一种应用高分辨率熔解曲线法鉴别三种棒状杆菌的方法-CN201910833735.5有效
发明人：李振军;侯雪新;徐帅;周海健 -专利权人：中国疾病预防控制中心传染病预防控制所
申请日： 2019-09-04 - 公布日： 2022-07-08 - 主分类号： C12Q1/689 文献下载
摘要：本发明提供了一种使用高分辨率熔解曲线法鉴别棒状杆菌菌种的方法，以及用于该方法的基因扩增引物。所述方法包括如下步骤：(1)以待检测样本的DNA为模板，扩增棒状杆菌的ssrA基因的区间序列；(2)使用高分辨率熔解曲线法获取步骤(1)的扩增产物的高分辨率熔解曲线；(3)对步骤(2)获得的熔解曲线进行判读本发明提供的高分辨率熔解曲线法扩增条件简单，反应快速，具有优异的灵敏度和特异性，可特异性的检出纹带棒状杆菌、丙酸棒状杆菌和模拟棒状杆菌。
一种应用高分辨率熔解曲线鉴别三种棒状杆菌方法

[发明专利]一种鉴定番茄灰叶斑抗性基因的方法-CN201910004009.2在审
发明人：金凤媚;宋建;薛俊;孙海波 -专利权人：天津市农业生物技术研究中心
申请日： 2019-01-03 - 公布日： 2019-03-29 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本发明公开了一种鉴定番茄灰叶斑抗性基因的方法，主要包括：基因组DNA提取、抗感品种的PCR片段克隆、抗性基因特异性引物的设计；HRM（高分辨率熔解曲线）反应体系等步骤。最后利用LightCycler®480的Gene Scanning 1.5 version软件进行高分辨率熔解曲线分析。通过该方法能科学高效准确地检测出番茄灰叶斑的抗性基因。
抗性基因灰叶番茄高分辨率种鉴定基因组DNA提取熔解曲线分析特异性引物熔解曲线克隆检测

[发明专利]数字PCR检测方法-CN201810932950.6有效
发明人：盛广济 -专利权人：思纳福（北京）医疗科技有限公司
申请日： 2018-08-16 - 公布日： 2022-10-21 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本申请提供的数字PCR检测方法，在制备待测核酸扩增反应液时，可以使用基于染料即可实现基因分型、突变扫描、甲基化研究等，具有高分辨率与灵敏度，降低了检测成本。并且，可以使得微液滴阵列在同一个高度集成化的数字PCR检测仪上完成聚合酶链式反应，并在微液滴阵列PCR扩增后对PCR产物进行熔解曲线分析。同时，通过数字PCR检测方法，可以获得微液滴阵列的荧光曲线与熔解曲线，完全可以实现PCR扩增整个过程的实时监测与PCR产物的熔解曲线分析的无痕连接。从而，实现了基于不同荧光曲线的拷贝数识别，与不同特性熔解曲线的核酸扩增特性的识别，以及通过高分辨率熔解曲线实现基因的分型、突变扫描等，更加全面、简便、高效的完成数字PCR的检测。
数字 pcr 检测方法

[发明专利]一种鉴定茄子单性结实基因突变体的引物对及方法-CN202111252929.X在审
发明人：刘松瑜;周晓慧;杨艳;刘军;庄勇 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2021-11-01 - 公布日： 2023-05-05 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明公开了一种鉴定茄子单性结实基因的方法，主要包括:不同品种茄子基因组DNA提取、单性结实基因的PCR片段克隆测序、单性结实基因检测引物的设计、茄子HRM筛选体系的建立、HRM(高分辨率熔解曲线)反应体系等步骤最后利用LightCycler 480的Gene Scanning 1.5version软件进行高分辨率熔解曲线分析。通过该方法能科学高效准确地检测出茄子单性结实基因。
一种鉴定茄子单性结实基因突变体引物方法

[发明专利]检测空肠弯曲菌喹诺酮类抗生素耐药突变位点的方法-CN201410003192.1有效
发明人：吴聪明;汪洋;吴辰斌;沈建忠 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2014-01-03 - 公布日： 2014-04-02 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：该方法包括:以gyrA基因编码序列的第257位是C的空肠弯曲菌作为野生型标准菌株，以gyrA基因编码序列的第257位是T的空肠弯曲菌作为突变型标准菌株，与待测空肠弯曲菌分别同时进行高分辨率熔解曲线分析；根据高分辨率熔解曲线的比较结果确定待测空肠弯曲菌gyrA基因编码序列的第257位是C还是T：如待测空肠弯曲菌的高分辨率熔解曲线与野生型标准菌株的一致，待测空肠弯曲菌候选为gyrA基因编码序列的第257位是C的菌株，如待测空肠弯曲菌的高分辨率熔解曲线与突变型标准菌株的一致，待测空肠弯曲菌候选为gyrA基因编码序列的第257位是T的菌株。
检测空肠弯曲喹诺酮类抗生素耐药突变方法

[发明专利]基于高分辨熔解曲线技术的结核分枝杆菌耐药性基因突变检测-CN201610474803.X在审
发明人：陈华;杨蓉;刘小青 -专利权人：凯杰生物工程（深圳）有限公司
申请日： 2016-06-24 - 公布日： 2016-08-31 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及基于高分辨熔解曲线技术的结核分枝杆菌（TB）耐药性基因突变检测。具体而言，本发明涉及用于基于高分辨熔解曲线技术检测结核分枝杆菌（TB）耐药性基因突变的PCR引物组。本发明还涉及包含PCR引物组的用于基于高分辨熔解曲线技术检测结核分枝杆菌（TB）耐药性基因突变的试剂盒和微阵列。本发明还涉及PCR引物组在制备用于基于高分辨熔解曲线技术检测结核分枝杆菌（TB）耐药性基因突变的试剂盒和微阵列中的用途。
基于分辨熔解曲线技术结核分枝杆菌耐药性基因突变检测

[发明专利]利用高分辨熔解曲线分析技术检测线粒体乙醛脱氢酶基因分型的方法-CN201310288926.0无效
发明人：傅咏南;张奕;王校;毛丹丹 -专利权人：上海中优医药高科技有限公司
申请日： 2013-07-11 - 公布日： 2014-01-22 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用高分辨熔解曲线分析技术检测线粒体乙醛脱氢酶基因分型的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：采用硅胶吸附法抽提被测者口腔上皮细胞/外周血细胞样本的基因组DNA，设计包含目标位点的检测引物，根据高分辨熔解曲线分析技术对PCR扩增后的基因序列进行位点分型。
利用分辨熔解曲线分析技术检测线粒体乙醛脱氢酶基因方法

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