本发明涉及一种快速检测肺炎克雷伯菌的Elisa检测试剂盒及其制备方法。该试剂盒包含有:包被抗肺炎克雷伯菌ABC transporter substrate‑binding protein receptor及GlpQ蛋白多克隆抗体的酶标板、抗肺炎克雷伯菌FepA及MltD蛋白多克隆抗体、肺炎克雷伯菌阳性对照、阴性对照、洗涤液、酶标二抗、酶显色底物和终止液。本发明的试剂盒对肺炎克雷伯菌四种特异性表面蛋白进行联合检测,大大提高了肺炎克雷伯菌检测的灵敏度、特异性和可重复性,可用于对肺炎克雷伯菌非诊断性检测及研究工作。