本发明属于肺炎克雷伯菌检测技术领域,具体涉及肺炎克雷伯菌特征序列及其qPCR快速检测体系和方法。肺炎克雷伯菌特征序列如SEQ ID NO:1所示,用于扩增肺炎克雷伯特征序列的引物组序列如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示。该特征序列可用于制备肺炎克雷伯菌核酸检测试剂盒。本发明的肺炎克雷伯菌的qPCR检测方法灵敏度达皮克级,不仅可以灵敏地将肺炎克雷伯菌与其他呼吸道常见细菌相区分,还能够区分肺炎克雷伯菌的近缘细菌‑‑产酸克雷伯菌。本发明的特征序列检测肺炎克雷伯菌具有灵敏度高、特异强、覆盖度广等特点,可有效降低肺炎克雷伯菌临床检测的假阴性率与假阳性率,对于提升肺炎克雷伯菌临床治疗效果具有重要的意义。
本发明涉及一种快速检测肺炎克雷伯菌的Elisa检测试剂盒及其制备方法。该试剂盒包含有:包被抗肺炎克雷伯菌ABC transporter substrate‑binding protein receptor及GlpQ蛋白多克隆抗体的酶标板、抗肺炎克雷伯菌FepA及MltD蛋白多克隆抗体、肺炎克雷伯菌阳性对照、阴性对照、洗涤液、酶标二抗、酶显色底物和终止液。本发明的试剂盒对肺炎克雷伯菌四种特异性表面蛋白进行联合检测,大大提高了肺炎克雷伯菌检测的灵敏度、特异性和可重复性,可用于对肺炎克雷伯菌非诊断性检测及研究工作。