本发明公开了一种RBP1基因和应用及绵羊卵巢体外发育质量评估方法与扩增引物。其中:分子标记为绵羊第1号染色体RBP1基因,该RBP1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;评估方法是,选择绵羊第1号染色体RBP1基因的启动子区域设计扩增引物;加上保护碱基的扩增引物的核苷酸序列如本发明提供了一种适于评估绵羊卵巢组织中卵母细胞发育质量的分子标记基因RBP1,利用该分子标记,能够根据绵羊卵巢组织中卵母细胞发育质量进行评估,快速有效地优化绵羊卵巢组织体外培养体系,为建立利用绵羊卵巢组织中卵母细胞奠定基础
本发明提供了一种SPP1基因及评估绵羊单卵泡中高尔基体发育质量的方法,SPP1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。评估方法的具体步骤如下:绵羊卵巢组织基因组的提取;绵羊SPP1基因启动子的扩增;SPP1基因启动子序列同pLV‑mCherry构建重构载体;介导SPP1基因启动子‑mCherry转染病毒包装;绵羊卵巢卵泡的体外培养;SPP1基因启动子‑mCherry在绵羊卵巢卵泡中的表达和检测;绵羊卵泡体外培养体系的完善和优化。通过选择SPP1基因启动子构建红色荧光蛋白表达驱动载体,能够准确检测反映绵羊卵泡中高尔基体发育质量的培养体系,从而为优化绵羊卵泡中高尔基体高质量发育的培养体系提供重要科学依据。
本发明涉及分子生物学,具体公开了绵羊B4GALNT2基因全长序列的扩增及其表达量的检测。所述绵羊B4GALNT2基因全长序列的核苷酸序列或其反义核苷酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。本发明首次从体外培养的绵羊颗粒细胞的RNA中克隆到了B4GALNT2基因全长cDNA序列,并为该基因表达量检测提供方法,为绵羊B4GALNT2基因功能尤其在卵巢组织中调控排卵机制的研究奠定序列信息基础,并对了解雌性绵羊排卵数差异具有重要意义。