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[发明专利]多基因共表达体系及含二硫键功能性蛋白的生产方法-CN201110039867.4无效
发明人：杨弋;郑文云;张文耀 -专利权人：华东理工大学
申请日： 2011-02-17 - 公布日： 2012-08-22 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明提供一种多基因共表达体系，包括含二硫键目的蛋白编码基因的表达载体和一种或几种具有促进二硫键目的蛋白功能化作用的酶和/或伴侣蛋白的编码基因的表达载体，所述酶或伴侣蛋白的编码基因以融合基因形式构建在表达载体的一个阅读框中或两个或两个以上所述酶或伴侣蛋白的编码基因分别构建在所述表达载体的不同阅读框中，所述目的蛋白的编码基因构建在与所述酶或伴侣蛋白的所述表达载体含有不同抗性基因的表达载体中。还提供多基因共表达系统的制备方法及用其制备可溶性功能性目的蛋白的方法。本发明的多基因共表达系统使其所表达的含二硫键蛋白形成正确的二硫键、折叠成正确空间构象而溶于裂解上清液中，并保持相应生物学功能或活性。
多基因表达体系二硫键功能蛋白生产方法

[发明专利]基于核酸序列的蛋白质相互作用检测方法-CN201410338899.8无效
发明人：吴家睿;梁治;骆斯伟 -专利权人：中国科学技术大学
申请日： 2014-07-16 - 公布日： 2014-10-15 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明涉及基于DNA序列检测蛋白质间相互作用的方法(称为蛋白质二聚化足迹法，Protein Dimerization footprinting，简称PDf)，试剂盒及其用途。基本原理是基于目的蛋白质间相互作用强度对其融合的DNA结合结构域与相应特异性DNA序列间结合动力学的影响，实现将目的蛋白质间相互作用由相应特异性DNA序列表示，而目的蛋白质间相互作用强度则由该特异性DNA
基于核酸序列蛋白质相互作用检测方法

[发明专利]一种基于蛋白N端改造来提高外源蛋白表达水平的方法-CN202211288504.9在审
发明人：刘秀霞;崔思楠;王雨露;王萌;刘雨婷;吴俊恒;蔡艺庆;杨艳坤;白仲虎 -专利权人：江南大学
申请日： 2022-10-20 - 公布日： 2023-08-11 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于蛋白N端改造来提高外源蛋白表达水平的方法，其包括如下步骤：构建负载目的基因的质粒、负载目的基因的质粒转入受体菌中、荧光定量分析。本发明提供了一种对于蛋白N端改造从而实现对于外源蛋白的表达水平进行提高的方法。
一种基于蛋白改造提高表达水平方法

[发明专利]重组猪IgG Fc融合蛋白在非洲猪瘟病毒防控中的应用-CN202310236325.9在审
发明人：魏建超;马志永;杨扬;管志欣;郑家杨;邱亚峰;李宗杰;李蓓蓓;刘珂;邵东华 -专利权人：中国农业科学院上海兽医研究所（中国动物卫生与流行病学中心上海分中心）
申请日： 2023-03-13 - 公布日： 2023-09-12 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明涉及重组猪IgG Fc融合蛋白在非洲猪瘟病毒防控中的应用。本发明根据ASFV‑SY18(GenBank:MH766894.1)基因组序列合成抗原性蛋白目的基因，根据GenBank公布的序列合成猪源IgG Fc片段基因。将抗原性蛋白目的基因和猪源IgG Fc片段基因连接，将目的基因和与IgG Fc连接的目的基因构建杆状病毒表达载体pFast dual，将构建成功的质粒转化并提取Bacmid杆粒，转染至昆虫细胞，拯救可以表达重组融合蛋白的杆状病毒，在昆虫细胞盲传2代收获F2代重组杆状病毒，以进行后续重组蛋白表达。
重组 igg fc 融合蛋白非洲猪瘟病毒中的应用

[发明专利]一种能够将蛋白通过GPI锚定的方法展示在外泌体膜上的信号肽序列-CN202211699356.X在审
发明人：雷祖超;宋波;曾思远 -专利权人：维思克思生物科技（武汉）有限公司
申请日： 2022-12-28 - 公布日： 2023-03-28 - 主分类号： C07K14/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种能够将蛋白通过GPI锚定的方法展示在外泌体膜上的信号肽序列，属于生物技术领域。本发明通过将GPI锚定信号肽(氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示)插入在目标蛋白的C端，可以将原定位于细胞质中的目的蛋白表达在外泌体上，实现目的蛋白的外泌体展示。由于GPI锚定蛋白具有较长的脂肪酸链，赋予目的蛋白在外泌体上具有更好的柔性，同时也提高了外泌体的靶向性，为外泌体作为药物载体开拓应用场景。
一种能够蛋白通过 gpi 锚定方法展示在外泌体膜上信号肽序列

[发明专利]一种确定与目的蛋白互作的下游转录因子及其DNA结合序列的方法和其应用-CN202110060890.5有效
发明人：丁琛;田莎;刘洋;秦兆宇;杨冰;吴晓晖;姚珍梅 -专利权人：复旦大学
申请日： 2021-01-18 - 公布日： 2022-10-18 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：本发明公开了一种确定与目的蛋白互作的下游转录因子的方法及其应用，属于生物技术领域。本发明提供的方法通过BioID富集来源于目的蛋白表达体系的蛋白样本中生物素化的蛋白及与其交联的DNA片段，进而对富集的生物素化蛋白进行鉴定和定量，并结合ChIP‑Seq方法对富集的DNA片段进行测序、文库比对和丰度检测，最终筛选并确定出与目的蛋白互作的下游转录因子及其DNA结合序列，具有检测范围宽和准确可靠的优点，提供的方法可以用于科学研究和药物筛选等中。
一种确定目的蛋白下游转录因子及其 dna 结合序列方法应用

[发明专利]一种利用流式细胞仪进行目的基因表达定量检测的方法-CN201710139424.X在审
发明人：周宇荀;李晓宁;王斯佳;肖君华;李凯 -专利权人：东华大学
申请日： 2017-03-09 - 公布日： 2017-07-25 - 主分类号： G01N21/64 文献下载
摘要：本发明提供了一种利用流式细胞仪进行目的基因表达定量检测的方法，在表达待研究的目的基因的细胞中，敲入红色荧光蛋白基因；在目的基因的阅读框中，敲入绿色荧光蛋白基因；使红、绿色荧光蛋白基因与目的基因同时表达，但彼此独立形成各自的蛋白；所形成的能同时表达红、绿两种荧光蛋白的细胞用于对影响目的基因表达的外部因素进行筛选；用流式细胞仪定量检测细胞的绿色荧光信号的强弱，再用其红色荧光信号值进行均一化，从而对外部因素对目的基因表达的影响进行定量比较，定量检测出影响目的基因表达的外部因素。
一种利用细胞进行目的基因表达定量检测方法

[发明专利]一种ADC药物旁杀伤活性的检测方法-CN202210034497.3有效
发明人：秦刚;徐涵文;马赛;宋镐英 -专利权人：启德医药科技（苏州）有限公司
申请日： 2022-01-13 - 公布日： 2022-04-12 - 主分类号： C12Q1/02 文献下载
摘要：本发明提供一种ADC药物旁杀伤活性的检测方法，设置实验组和对照组：实验组为将ADC药物、目的抗原阳性细胞、荧光蛋白标记的目的抗原阴性细胞共培养，对照组为将目的抗原阳性细胞和荧光蛋白标记的目的抗原阴性细胞共培养；采用荧光细胞计数方法分别检测实验组和对照组共培养后的体系中的荧光蛋白标记的目的抗原阴性细胞的数量，其中，检测到的实验组的荧光蛋白标记的目的抗原阴性细胞的数量为n1，检测到的对照组的荧光蛋白标记的目的抗原阴性细胞的数量为
一种 adc 药物杀伤活性检测方法

[发明专利]在宿主微生物中产生目的蛋白质的方法-CN201480068581.0在审
发明人： S·耶内维因;M·F·菲勒;J·勒耶特 -专利权人：巴斯夫欧洲公司
申请日： 2014-12-12 - 公布日： 2016-08-10 - 主分类号： C12N15/64 文献下载
摘要：在宿主微生物中产生目的蛋白质的方法，所述方法包括步骤：a)构建包含用于目的蛋白质的基因和功能性frr基因且无抗生素抗性基因的载体，b)用a)中获得的载体转化具有失活的染色体frr基因的宿主生物，c)在允许目的基因于宿主生物中表达的条件下培养b)中获得的经转化的宿主生物，和d)分离目的蛋白质。
宿主微生物产生目的蛋白质方法

[发明专利]一种大白菜特异蛋白质/同工酶的分离纯化方法-CN200710018761.X无效
发明人：张鲁刚;张少丽;惠麦侠;张明科 -专利权人：西北农林科技大学
申请日： 2007-09-28 - 公布日： 2008-04-30 - 主分类号： C07K1/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种大白菜特异蛋白质/同工酶的分离纯化方法，该方法采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术鉴定目的特异蛋白质/同工酶带，回收特异带区后，通过自制的IEF电泳系统鉴定特异蛋白质/同工酶带的等电点差异，最后通过SDS凝胶电泳分离目的特异蛋白质/同工酶，使组成特异蛋白质/同工酶的多肽完全分离纯化，为进一步蛋白质测序奠定基础。该方法程序适合于各种植物组织特异蛋白质/同工酶的分离纯化，具有技术简单，成本低，目的性强的优点。
一种大白菜特异蛋白质分离纯化方法

[发明专利]一种用GhRVW2蛋白增强植株真菌抗性的方法及应用-CN202310216880.5在审
发明人：李冉;戴小枫;马茜月;陈捷胤;张丹丹;孔志强;刘晓炜 -专利权人：中国农业科学院植物保护研究所
申请日： 2023-03-07 - 公布日： 2023-08-22 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本公开涉及一种用GhRVW2蛋白增强植株真菌抗性的方法及应用。该方法包括如下步骤：将GhRVW2蛋白施用于目的植株，和/或，将编码GhRVW2蛋白的基因导入目的植株，并上调植株中所述编码GhRVW2蛋白的基因的表达；所述GhRVW2蛋白的氨基酸序列如SEQ ID 通过上述技术方案，该GhRVW2蛋白和/或编码GhRVW2蛋白的基因提高了植株的真菌抗性。
一种 ghrvw2 蛋白增强植株真菌抗性方法应用

[发明专利]一种家蚕天然免疫蛋白Hemolin及其纯化方法-CN201210452712.8有效
发明人：张耀洲;杜瑶瑶;刘玲玲;陈剑清;舒特俊 -专利权人：天津耀宇生物技术有限公司
申请日： 2012-11-12 - 公布日： 2013-03-20 - 主分类号： C07K14/435 文献下载
摘要：本发明涉及一种家蚕天然免疫蛋白Hemolin及其纯化方法，属于蛋白纯化技术领域。本发明以蚕蛹作为原料，通过不同的离心方法，超滤，得到含有免疫蛋白的组分，将含有目的蛋白的上清溶液然经过AKTAexplorer10蛋白纯化系统中简单的层析技术分离纯化得到目的蛋白Hemolin。本发明主要是利用了Superdex200和Superdex75凝胶层析，这为天然免疫蛋白的纯化提出了一种全新的解决方法，具有重要意义。
一种家蚕天然免疫蛋白 hemolin 及其纯化方法

[发明专利]一种半乳糖结合凝集素纯化铁蛋白纳米颗粒的制备方法-CN202310161492.1在审
发明人：郭玉堃;魏通;王梦雅;柴雪莹;张贺伟;郭晋祥 -专利权人：洛阳职业技术学院
申请日： 2023-02-24 - 公布日： 2023-04-18 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种半乳糖结合凝集素纯化铁蛋白纳米颗粒的制备方法，包括以下步骤：S1、称取120‑150个氨基酸铁蛋白和氨基酸基体进行串联，分别九种不同促溶标签相连；S2、对蛋白洗脱进行测试；S3、对蛋白测试洗脱后，进行洗脱处理，本发明的有益效果是：便于分离纯化，避免了对包涵体变性复性处理，为纯化保持SeFnt16798活性提供保证；EW29蛋白可以和琼脂糖可逆结合，为亲和层析纯化目的蛋白奠定了基础，在含有5mM乳糖的缓冲液通过洗脱得到了纯度高达90％的目的蛋白，通过Westernblot，O型口蹄疫高免血清可以和重组蛋白特异性结合，说明目的蛋白正确表达，且具有良好的免疫原性。
一种半乳糖结合凝集素纯化铁蛋白纳米颗粒制备方法

[发明专利]酸性重组蛋白药物的纯化方法-CN201210376056.8有效
发明人：高栋;王海彬;徐杰;聂磊;邓献存;白骅 -专利权人：浙江海正药业股份有限公司
申请日： 2012-09-29 - 公布日： 2013-02-06 - 主分类号： C07K1/20 文献下载
摘要：本发明提供一种酸性重组蛋白药物的纯化方法，以平均等电点（pI）小于7的酸性蛋白为目的蛋白，选用兼有阴离子交换作用以及疏水相互作用的混合模式层析，得到纯化的目的蛋白。本发明提供了一种新的纯化思路，有效地精细纯化酸性蛋白药物，缩短了工艺流程，提高了产率，降低了生产成本。
酸性重组蛋白药物纯化方法

[发明专利]一种豆状囊尾蚴囊液蛋白的分离纯化和免疫原性检测的方法-CN201510490901.8在审
发明人：潘耀谦;潘博;刘兴友;李瑞珍;孙玉倩;银梅;唐海蓉;张慧辉 -专利权人：河南科技学院
申请日： 2015-08-06 - 公布日： 2015-11-18 - 主分类号： C07K1/34 文献下载
摘要：本发明公开了一种豆状囊尾蚴囊液蛋白的分离纯化和免疫原性检测的方法，包括超滤离心管的预处理、囊液蛋白的处理、离心处理、收集大分子量目的蛋白和小分子量目的蛋白，并对纯化的分子量大小不同的囊液蛋白进行抗原性检测等步骤本发明操作简单，时程短，效率高，作用超滤膜更加灵敏准确，获取的纯化蛋白浓度更高更纯，蛋白回收量大，并能获得抗原性强的纯化蛋白。本法是比较理想的分离纯化囊液蛋白及检测纯化蛋白免疫原性的新方法。
一种豆状囊尾蚴蛋白分离纯化免疫原性检测方法