本发明公开了一种细菌基因组DNA提取方法,DNA的提取方法包括以下步骤:1)取细菌悬浮液离心除去上清液,用无菌的NE缓冲液洗涤沉淀,接着重悬于无菌TE缓冲液,得一混合液;2)在所述混合液中加入甲提取液,混合并放置;3)在所述混合液中加入乙提取液,混合并孵育;4)在所述混合液中加入乙酸铵混合调整;5)在所述混合液中加入苯酚/氯仿溶液,并混合至相混匀;6)将所述混合液转移至Phase Lock Gel Heavy管中混合,并离心,保留顶部水相;7)在所述水相中加入冷的无水乙醇混合,所得白色絮状沉淀为细菌基因组DNA。本发明的提取方法可有效用于细菌基因组DNA提取,提取效率高,操作简单、方便。