本发明公开了一种鉴别鸡白痢沙门氏菌与鸡伤寒沙门氏菌的引物组、试剂盒及方法,该引物组包括两对特异性引物,其中,两对特异性引物分别是引物1和引物2,引物3和引物4,其中,引物1由SEQ ID NO:1所示,引物2由SEQ ID NO:2所示,引物3由SEQ ID NO:3所示,引物4由SEQ ID NO:4所示;该试剂盒中包含所述引物组;利用引物组通过双重PCR扩增方法对待测细菌进行检测。本发明的鉴别鸡白痢沙门氏菌与鸡伤寒沙门氏菌的引物组的检测反应特异性强;通过PCR反应,能够从样品中同时检测出鸡白痢与鸡伤寒沙门氏菌,检测反应灵敏度高,且检测过程快速、高效,适合进行大批量检测。
本发明公开了高致病性副溶血弧菌快速检测引物及试剂盒,高致病性副溶血弧菌快速检测引物,是由外引物和内引物组成,所述外引物由SEQ ID NO.1所示的外引物上游引物和SEQ ID NO.2所示的外引物下游引物组成;所述内引物由SEQ ID NO.3所示的内引物上游引物和SEQ ID NO.4所示的内引物下游引物组成。本发明的引物能有效检测高致病性副溶血弧菌,具有很好的特异性和准确性。
本发明提供了获取含油菜黑胫病菌突变ERG11基因的重组质粒的引物组合及方法,属于基因工程技术领域,所述引物组合包括第一引物对、第二引物对和第三引物对;所述第一引物对的上游引物的核苷酸序列如SEQ IDNo.1所示,下游引物的核苷酸序列如SEQ IDNo.2所示;所述第二引物对的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示,下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示;所述第三引物对的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示,下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示。采用本发明提供的引物组合能够获得含油菜黑胫病菌突变ERG11基因的重组质粒。
所述检测试剂包括如下四个引物对中的任意一种或多种的组合,所述四个引物对包括:第一引物对,包括序列分别如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2所示的第一引物、第二引物;第二引物对,包括序列分别如SEQID NO:3、SEQ ID NO:4所示的第三引物、第四引物;第三引物对,包括序列分别如SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6所示的第五引物、第六引物;第四引物对,包括序列分别如SEQ IDNO:7、SEQ ID NO:8所示的第七引物、第八引物。本发明提供的检测方法是以标记的特异性引物扩增适当长度的基因片段,能够保证检测的高度特异性,提高了检测结果的准确性。
本发明提供一种念珠菌的引物探针组合,用于检测四种念珠菌,包括第一引物探针组合和第二引物探针组合,核苷酸序列如SEQ ID NO:1‑12所示。第一引物探针组合包括针对白念珠菌的第一上游引物、第一下游引物和第一探针,以及针对光滑念珠菌的第二上游引物、第二下游引物和第二探针;第二引物探针组合包括针对近平滑念珠菌的第三上游引物、第三下游引物和第三探针,以及针对热带念珠菌的第四上游引物、第四下游引物和第四探针。本发明提供的念珠菌的引物探针组合减小了不同引物之间的相互作用,提高了扩增的特异性和灵敏度。
本发明公开了美人鱼发光杆菌快速检测引物、试剂盒及应用,其引物由外引物和内引物组成,外引物由SEQ ID NO.1所示的外引物上游引物和SEQ ID NO.2所示的外引物下游引物组成;内引物由SEQ ID NO.3所示的内引物上游引物和SEQ ID NO.4所示的内引物下游引物组成。扩增引物具有很好的特异性和准确性。采用内置染料的方法,反应结束后不用打开反应管,取出后直接肉眼观察结果,避免了被扩增产物污染后续待检样品,提高了该试剂盒的应用可靠性。
本发明的用于检测鱼中免疫因子的引物组合物,由如下引物对组成:用于扩增TNF-α的引物对1:SEQ ID NO:1所示引物和SEQ ID NO:2所示引物;用于扩增IL-1β的引物对2:SEQ ID NO:3所示引物和SEQ ID NO:4所示引物;用于扩增HSP70的引物对3:SEQ ID NO:5所示引物和SEQ ID NO:6所示引物;用于扩增TGF-β的引物对3:SEQ ID NO:7所示引物和SEQ ID NO:8所示引物。本发明的用于实时定量PCR检测鱼类免疫因子体系的引物,具有特异性好、无干扰背景的特点。本发明中的鱼类饲料组合物可以提高鱼的免疫因子的表达量。