本发明公开了大赖草的一种DNA指纹图谱及其获取方法与专用引物。获取大赖草DNA指纹图谱的方法,包括以下步骤:(1)用EcoRI和MseI双酶切大赖草的基因组DNA,以所得的双酶切片段为模板,在序列表中SEQ ID №:13和SEQ ID №:14的DNA序列引导下进行非选择性预扩增;(2)以步骤(1)中得到的非选择性预扩增产物为模板,在选择性扩增引物对中的任意一对引导下进行选择性扩增,(3)将步骤(2)中得到的选择性扩增产物进行SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳,分离DNA标记,用银染法显示大赖草的DNA指纹图谱。本发明的大赖草DNA指纹图谱多态性高、指纹丰富,将在大赖草种子纯度鉴定、大赖草基因作图和分子标记辅助育种等领域中发挥重要作用。
本发明提供一种大正三色与昭和三色锦鲤性别特异DNA标记及其应用,所述的DNA标记,其中雄鱼的DNA标记片段的核酸序列为SEQ ID NO:1;雌鱼的DNA标记片段的核酸序列为SEQ ID NO:2。本发明还提供一种鉴定大正三色与昭和三色锦鲤遗传性别的方法,是通过检测性别特异DNA标记存在与否来确定待检测的锦鲤的性别。本发明检测大正三色与昭和三色锦鲤遗传性别的方法,对大正三色与昭和三色锦鲤亲鱼繁育、家系建立及控制养殖群体的雌雄性别比例,推动大正三色与昭和三色锦鲤养殖业可持续健康发展具有重要意义和应用价值。
本发明公开了一种利用酶切技术鉴定大骨鸡品种的方法及PCR扩增专用引物对。专用引物见序列表SEQ ID NO 1‑2。鉴定方法:利用所述PCR扩增专用引物对大骨鸡样本DNA和待测DNA混合样本同时进行PCR扩增和酶切,然后采用2.0%琼脂糖凝胶电泳检测酶切产物,以大骨鸡样本DNA琼脂糖凝胶电泳图谱中两条电泳条带(294bp,460bp)为阳性结果;将待测DNA混合样本酶切产物电泳图谱与阳性结果进行比对,如果待测样DNA酶切产物琼脂糖凝胶电泳图谱中出现两条电泳条带(294bp,460bp)则认定为纯正的大骨鸡品种。该方法利用本实验室检测到的大骨鸡d‑loop区SNP变异位点对待测样本进行PCR扩增酶切检测,所设计引物和酶切酶具有良好的特异性。