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- [发明专利]一种利用亲和层析法分离纯化纤溶酶的方法-CN200710027907.7无效
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郭勇;崔堂兵;刘柳
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华南理工大学
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2007-04-30
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2007-11-07
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C12N9/68
- 本发明公开了一种利用亲和层析分离纯化纤溶酶的方法。该方法包括亲和层析介质的制备和亲和层析两个步骤。其中亲和层析介质的制备包括将人血纤维蛋白原溶于无菌水中,35~40℃保温至溶解;将琼脂糖溶于巴比妥纳-HCl缓冲液中,灭菌后冷却;加入人凝血酶,保温,滴入预冷至2~10℃的四氯乙烯中,制成球形颗粒;用无离子水清洗,于35~40℃保温1~2h;加入戊二醛作为交联剂进行交联;亲和层析是在温度为2-10℃的条件下,用缓冲液平衡层析柱,再加入样品液;然后缓冲液冲洗;最后用洗脱液洗脱。该只需通过一次亲和层析便可分离得到所需要的纤溶酶,亲和层析介质可以反复使用,提高了酶的回收率和纯度,节约了时间和人力。
- 一种利用亲和层析分离化纤方法
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