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[发明专利] SV40LT基因诱导构建T淋巴 细胞 模型及其细胞 库 -CN201310403992.8 在审
发明人：
翁炳焕 ;黄荷凤 ;徐晨明 ;鲁林荣 ;袁武锋 ;张燕
- 专利权人：
翁炳焕
申请日：
2013-09-01
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公布日：
2015-03-18
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主分类号：
C12N15/85 文献下载
摘要： 本发明涉及用于医学研究领域的SV40LT基因诱导T淋巴 细胞 模型及其细胞 库的构建，其主要特征是按常规以T4DNA连接酶、BamHI、pcDNA3.1(-)DNA及SV40LTag DNA构建SV40LTag-pcDNA3.1(-)重组子、以感受态大肠杆菌纯化重组子、以脂质体转染法将其导入体外培养的T淋巴 细胞 ，使重组子与细胞 的DNA整合，以G418筛选的含阳性重组子的细胞 ，作传代、扩大培养，筛选细胞 形态、细胞 生长曲线、染色体核型、裸鼠 致瘤试验、转染细胞 DNA中SV40大T基因检测、mRNA表达产物测定及DNA序列测定结果符合永生化细胞 生物特性者作为T淋巴 细胞 模型冻存于液氮中，以此构建SV40LT基因诱导T淋巴 细胞 模型及其细胞 库，以建立在体外长期传代培养T淋巴 细胞 的方法并用于体外研究T淋巴 细胞 免疫机制。sv40lt 基因 诱导 构建 淋巴细胞 模型 及其 细胞
[发明专利] 一种流式细胞 术分选牙鲆CD4+ -CN202111683722.8 在审
发明人：
邢婧 ;田洪飞 ;战文斌 ;唐小千 ;绳秀珍 ;迟恒
- 专利权人：
中国海洋大学
申请日：
2021-12-28
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公布日：
2022-04-08
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主分类号：
C12N5/0783 文献下载
摘要： 本发明公开了一种流式细胞 术分选牙鲆CD4+ T淋巴 细胞 的方法，包括如下步骤：取牙鲆头肾组织，经Percoll密度梯度离心法，获得头肾淋巴 细胞 ；在头肾淋巴 细胞 中加入抗牙鲆CD4‑1和CD4‑2分子的单克隆抗体和FITC标记的羊抗鼠 IgG孵育；以磷酸盐缓冲液为流式细胞 仪的鞘液，用胎牛血清润洗1.5mL无酶离心管，将其置于流式细胞 仪分选仓中的流式收集管上；孵育抗体后的淋巴 细胞 经流式细胞 仪分析，设置CD4+ T淋巴 细胞 门进行细胞 分选；荧光显微镜下观察分选细胞 的纯度，并通过PI和台盼蓝染色测定细胞 的活性。本发明通过使用适合于鱼类淋巴 细胞 的磷酸盐缓冲液和收集分选细胞 的装置，创造性地建立了流式细胞 术分离海水鱼类CD4+ T淋巴 细胞 的方法，具有重要的科学意义和应用价值。一种 细胞 分选 cd4 base sup
