本发明公开了一种非特异性过氧合酶MroUPO与脂肪酶在催化脂肪酸合成大环内酯反应中的应用,以及该非特异性过氧合酶MroUPO的表达方法;其中该非特异性过氧合酶MroUPO的氨基酸序列如SEQ ID NO该非特异性过氧合酶MroUPO能够催化脂肪酸进行脂肪酸末端羟基化修饰,催化得到的末端羟基化修饰的反应产物再以脂肪酶为催化剂进行酯化反应后能够生成大环内酯。在该非特异性过氧合酶MroUPO的表达方法中,通过构建MroUPO重组菌,并通过对MroUPO重组菌发酵的条件进行优化,实现产MroUPO重组菌的高密度发酵,从而实现MroUPO的高效表达,为MroUPO