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[发明专利]用于评价啤酒酵母活力的多重引物、试剂盒及评价方法-CN201810933959.9有效
发明人：余俊红;尹花;董建军;黄淑霞;胡淑敏;刘佳;贺扬;马增新 -专利权人：青岛啤酒股份有限公司
申请日： 2018-08-16 - 公布日： 2021-04-20 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明提出一种用于评价啤酒酵母活力的多重引物、试剂盒及评价方法，属于食品检测领域，能够解决传统测定酵母活力的方法存在的评价结果不准确、评价范围小、操作要求高及操作复杂等问题。该技术方案包括多重引物的设计、以酵母菌株总RNA为模板依次进行反转录合成cDNA模板、多重PCR扩增反应、毛细管电泳分离，并利用GeXP系统对毛细管电泳分离结果进行分析；以内参基因为对照，结合关键基因对应峰的峰面积计算蛋白酶A基因的表达量，采用与荧光底物结合法测定蛋白酶A的活力，根据蛋白酶A基因表达量与蛋白酶A活力的比值判断酵母活力为较好、适中或较差。通过该方法，能够准确、快速地评价啤酒酵母活力，且结果可重复。
用于评价啤酒酵母活力多重引物试剂盒方法

[发明专利]一种新型高活力蒜氨酸酶及其制备方法-CN201610330256.8有效
发明人：路福平;刘逸寒;郭伟;韩杨;贾雷博 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2016-05-18 - 公布日： 2019-07-09 - 主分类号： C12N15/60 文献下载
摘要：本发明涉及一种新型高活力蒜氨酸酶及其制备方法，其技术方案是利用随机突变技术改造来源于大蒜鳞茎的野生型蒜氨酸酶基因，得到高活力的蒜氨酸酶突变体基因，即新型高活力蒜氨酸酶基因，然后将新型高活力蒜氨酸酶基因分别在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统(包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统)中表达，得到产高活力蒜氨酸酶的重组菌株，发酵表达后，检测高活力蒜氨酸酶的比酶活较野生型蒜氨酸酶提高50％。
一种新型活力氨酸及其制备方法

[发明专利]一种快速检测酵母活力的方法-CN201810157204.4在审
发明人：李崎;王增妹;吴卓凡;李永仙;王金晶;刘春凤;郑飞云;钮成拓 -专利权人：江南大学
申请日： 2018-02-24 - 公布日： 2018-06-05 - 主分类号： G01N33/569 文献下载
摘要：本发明公开了一种快速检测酵母活力的方法，属于微生物分析检测领域。本发明实现了通过检测酵母胞内ATP含量，快速、灵敏检测啤酒酵母的活力。采用本方法所评定的结果为，存着啤酒酵母储存间的延长，胞内营养物质的衰竭，酵母胞内ATP含量下降。在储存环境中的胁迫可引起酵母胞内pH变化时，ATP相对含量与胞内pH值存在显著的线性回归关系。当处于储存过程中的啤酒酵母胞内ATP含量降低至刚进入储存阶段时胞内ATP含量的60％时，不建议使用此状态下的啤酒酵母继续进行生产。该方法操作简单、省时，可快速评价酵母活力的变化。
啤酒酵母胞内ATP 酵母活力储存酵母快速检测线性回归关系微生物分析含量降低检测领域快速评价灵敏检测营养物质省时胁迫评定检测生产

[发明专利]一种新型磷脂酶D及其制备磷脂酸、磷脂酰丝氨酸的方法-CN201610402557.7有效
发明人：刘逸寒;路福平;刘浩 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2016-06-02 - 公布日： 2019-07-19 - 主分类号： C12N9/16 文献下载
摘要：其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统(包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统)中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株，表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38‑140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为
一种新型磷脂酶及其制备磷脂酸磷脂丝氨酸方法

[发明专利]一种磷脂酶D突变体及其应用-CN201910528114.6有效
发明人：刘逸寒;路福平 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2016-06-02 - 公布日： 2021-08-03 - 主分类号： C12N9/16 文献下载
摘要：其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统(包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统)中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株，表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38‑140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为
一种磷脂酶突变体及其应用

[发明专利]磷脂酶D及其应用-CN201910528115.0有效
发明人：刘逸寒;路福平 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2016-06-02 - 公布日： 2021-08-03 - 主分类号： C12N9/16 文献下载
摘要：其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统(包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统)中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株，表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38‑140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为
磷脂酶及其应用

[发明专利]一种磷脂酶D-CN201910528141.3有效
发明人：刘逸寒;路福平 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2016-06-02 - 公布日： 2021-08-03 - 主分类号： C12N9/16 文献下载
摘要：其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统(包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统)中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株，表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38‑140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为
一种磷脂酶

[发明专利]磷脂酶D突变体及其在制备磷脂酸、磷脂酰丝氨酸中的应用-CN201910527208.1有效
发明人：刘逸寒;路福平 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2016-06-02 - 公布日： 2021-08-03 - 主分类号： C12N9/16 文献下载
摘要：其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统(包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统)中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株，表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38‑140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为
磷脂酶突变体及其制备磷脂酸磷脂丝氨酸中的应用

[发明专利]一种利用耐高温酵母生产酵母培养物的方法-CN202310380579.8在审
发明人：郭忠海;王卫正;王卫涵;狄小青;张高兴 -专利权人：河北斐默特生物科技有限公司
申请日： 2023-04-11 - 公布日： 2023-06-30 - 主分类号： C12N1/16 文献下载
摘要：一种利用耐高温酵母生产酵母培养物的方法，包括如下步骤：步骤一：高温培养筛选；步骤二：发酵繁殖活力筛选；步骤三：酵母液态发酵；步骤四：酵母培养物固态发酵。本发明通过对饲用酵母经过高温培养筛选和发酵繁殖活力筛选得到耐高温特性酵母，其可以在28‑42℃范围保持良好生长代谢活性，同时耐高温的饲用酵母经过40℃液体发酵培养获得菌液，其湿重达到150g/L以上。其接种于特定固态物料进行酵母培养物的发酵，全程压实厌氧，过程不再需要翻料降温、通气降温或环境降温等措施，解决了酵母培养物在发酵过程中由于持续发酵升温导致酵母活力严重下降的问题，从而实现了酵母培养物的深度发酵
一种利用耐高温酵母生产培养方法

[发明专利]一种磷脂酶D及其制备磷脂酸、磷脂酰丝氨酸的方法-CN201910528146.6有效
发明人：刘逸寒;路福平 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2016-06-02 - 公布日： 2021-08-03 - 主分类号： C12N9/16 文献下载
摘要：其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统(包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统)中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株，表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38‑140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为
一种磷脂酶及其制备磷脂酸磷脂丝氨酸方法

[发明专利]一种磷脂酶A₂突变体及其制备方法-CN201410279966.3有效
发明人：路福平;刘逸寒;张涛;刘晓光;王正祥;王春霞;王建玲 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2014-06-20 - 公布日： 2014-09-03 - 主分类号： C12N9/16 文献下载
摘要：本发明涉及一种磷脂酶A₂突变体及其制备的方法，其技术方案是利用重组DNA技术定点突变来源于天蓝色链霉菌的野生型磷脂酶A₂的Glu37、Asp78的氨基酸残基，得到活力较高的磷脂酶A₂基因，然后将高活力磷脂酶A₂基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统(包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统)中表达，得到产高活力磷脂酶A₂的重组菌株，表达后，检测高活力磷脂酶A₂的比酶活较野生型磷脂酶A₂提高13.7％，其中枯草芽孢杆菌高活力磷脂酶A₂重组菌发酵后磷脂酶A₂的酶活可达到53.5U/ml，毕赤酵母游离表达高活力磷脂酶A₂重组菌的酶活可达106.4U/ml，毕赤酵母细胞表面展示高活力磷脂酶A<
一种磷脂酶 sub 突变体及其制备方法

[发明专利]一种保持酵母活力的方法-CN201910181135.5在审
发明人：李崎;王增妹;李永仙;王金晶;李磊;刘春凤;郑飞云;钮成拓 -专利权人：江南大学
申请日： 2019-03-11 - 公布日： 2019-06-11 - 主分类号： C12N1/18 文献下载
摘要：本发明公开了一种保持酵母活力的方法，属于发酵工程微生物技术领域。本发明通过海藻糖溶液储存酵母，保持酵母活力。通过使用浓度为50mmol/l的海藻糖溶液在25℃下储存啤酒酵母泥4天，使酵母胞内ATP含量提升2倍以上，并提高啤酒酵母在渗透压胁迫和氧化胁迫下耐受性，有助于酵母储存过程中细胞活力的维持。与对照组相比，经过50mmol/l、100mmol/l海藻糖溶液储存的酵母在渗透压胁迫平板培养基和过氧化氢胁迫平板培养基上有更好的生长能力，50mmol/l海藻糖溶液的保护下即可以达到效果。该方法简单、有效，对啤酒生产中啤酒酵母的储存具有重要意义。
海藻糖溶液酵母储存酵母活力平板培养基渗透压胁迫啤酒酵母耐受性微生物技术领域啤酒酵母泥发酵工程过氧化氢啤酒生产细胞活力氧化胁迫重要意义胞内ATP 胁迫生长

[发明专利]一种提高beta葡聚糖酶活力持续性的方法-CN201010172813.0无效
发明人：阮晖;陈美龄;马风兰;廖文艳;陈赟;徐娟;王睿之;周陈伟;何国庆 -专利权人：浙江大学
申请日： 2010-05-14 - 公布日： 2011-11-16 - 主分类号： C12N9/42 文献下载
摘要：本发明提供一种使β葡聚糖酶成为酿酒酵母细胞有机组成部分的技术，使β葡聚糖酶只要酿酒酵母细胞保持存活即可保持活力，从而显著提高β葡聚糖酶活力持续性。将beta葡聚糖酶基因(Genbank号：U60830)连接(常规方法连接)在酿酒酵母细胞壁成份FLO序列(Genbank号：S73336)的N端，然后插入(通过常规方法插入)酿酒酵母表达载体GAL 1AY428072)下游MFα1信号肽序列(Genbank号：M17301)的C端，构建成表达框，表达框从N端到C端：GAL1启动子+MFα1信号肽序列+beta葡聚糖酶基因+FLO序列；将包含该表达框的酵母质粒转化入酿酒酵母细胞本发明的优点：将β葡聚糖酶与酿酒酵母细胞壁成分FLO连接，如此则只要酿酒酵母细胞保持存活状态，β葡聚糖酶即可保持活力。
一种提高 beta 聚糖活力持续性方法

[发明专利]基于拉曼光谱的酿酒发酵液酵母活力在线检测装置的检测方法-CN201610021401.4有效
发明人：孙大文;潘廷跳;蒲洪彬;朱志伟;韩忠 -专利权人：华南理工大学
申请日： 2016-01-13 - 公布日： 2018-04-13 - 主分类号： G01N21/65 文献下载
摘要：本发明公开了基于拉曼光谱的酿酒发酵液酵母活力在线检测装置，包括泵、样品池、三通阀、流通池、激光器、光纤、拉曼探头、反射镜、光谱仪、计算机；所述激光器通过光纤连接于拉曼探头，所述拉曼探头的头部与样品池的第一表面相连接本发明还公开了基于拉曼光谱的酿酒发酵液酵母活力在线检测方法。本发明实现酿酒过程中发酵液酵母活力进行在线检测，对指导酿酒厂优化发酵过程有着重要的意义，本发明可准确、快速地测出发酵液酵母活力。
基于光谱酿酒发酵酵母活力在线检测装置方法

[发明专利]一种检测大麦或麦芽中致酵母提前凝聚性因子的方法-CN201410314223.5有效
发明人：樊伟;董建军;陈璐;万秀娟;张国征;侯松珍;王寅;赵玉祥;陈嵘;贺扬;侯晓平 -专利权人：青岛啤酒股份有限公司
申请日： 2014-07-03 - 公布日： 2014-09-24 - 主分类号： G01N21/78 文献下载
摘要：本发明涉及啤酒酿造领域，其特别涉及一种检测大麦或麦芽中致酵母提前凝聚性因子的方法。本发明不需要使用酵母，通过测定水溶性木聚糖含量来直接反映大麦、麦芽的PYF活力，能够直观检测大麦及麦芽PYF活力，相对于已有的发酵法及光密度比色法，不使用酵母，不受酵母活性等客观条件的影响，具有数据准确度高
一种检测大麦麦芽酵母提前凝聚因子方法

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