本发明属于生物工程领域，涉及一种鼠李糖苷酶及其在水解黄姜薯蓣皂苷制备薯蓣皂素中的应用。所述鼠李糖苷酶为α‑L‑鼠李糖酶，基因序列如SEQ ID NO：1所示，制备步骤如下：构建带有α‑L‑鼠李糖苷酶基因的重组载体；重组载体的转化及α‑L‑鼠李糖苷酶的表达；α‑L‑鼠李糖苷酶的纯化。鼠李糖苷酶作为糖苷水解酶，以黄姜薯蓣皂苷为底物，制备葡萄糖基薯蓣皂苷，再用β‑葡萄糖苷酶水解葡萄糖基薯蓣皂苷，制备薯蓣皂素。本发明开发出能特异性水解薯蓣皂苷糖基鼠李糖苷的酶，制备出薯蓣皂素，克服了现有技术所存在的对薯蓣皂苷水解率低，破坏性大、污染严重、目的性差等缺点，具有无污染、目的性强、反应时间断、转化率高的优点。
本发明公开一种茎瘤芥硫苷酶基因MYR1、茎瘤芥硫苷酶及其基因工程表达方法，所述茎瘤芥硫苷酶基因MYR1核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述茎瘤芥硫苷酶氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示；茎瘤芥硫苷酶的基因工程表达方法，提取茎瘤芥叶片中的总RNA，再采用RT‑PCR法扩增硫苷酶基因MYR1，并构建表达载体，采用毕赤酵母表达系统进行表达，利用SalI酶切位点线性化载体，转化入毕赤酵母基因组，通过G418抗性，筛选出遗传霉素抗性转化子经电泳分析，本发明重组子能进行表达，表达蛋白分子量为90KDa，测定纯化后蛋白的比活力，茎瘤芥硫苷酶的比活力约等于0.003U/μL。
本发明公开了一种珠子参转录因子基因PjMYB1的用途，即其在提高珠子参皂苷生物合成关键酶基因PjAS表达量和增加珠子参愈伤组织中皂苷含量中的应用，所述珠子参转录因子基因PjMYB1的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，编码MYB类转录因子；本发明采用功能基因组学和代谢工程相关技术证明珠子参PjMYB1转录因子具有正调控珠子参皂苷生物合成的功能；将本发明所述的珠子参PjMYB1转录因子基因构建到植物表达载体上，并转入珠子参愈伤组织中使其过量表达，不仅增强了珠子参皂苷合成途径关键酶基因的表达量，而且提高了珠子参皂苷的产量。
