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[发明专利]一种提高昆虫细胞转染效率的阳离子聚合物PEI法-CN201610514302.X在审
发明人：沈鹤霄;华权高;肖颖 -专利权人：武汉金开瑞生物工程有限公司
申请日： 2016-06-30 - 公布日： 2016-11-16 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高昆虫细胞转染效率的阳离子聚合物PEI法，包括如下步骤：1)将昆虫细胞进行悬浮培养；2)转染前，将步骤1)中悬浮培养的昆虫细胞进行贴壁培养；3)将贴壁状态的昆虫细胞进行阳离子聚合物PEI法转染。本发明悬浮状态的昆虫细胞状态更好，大大提高了转染效率，因此，本发明采用低成本的PEI转染法，也取得了相当于脂质体法和电转染法的转染效率。
一种提高昆虫细胞转染效率阳离子聚合物 pei

[发明专利]一种用于递送核酸药物的可雾化吸入性氟碳化合物纳米转染试剂及其制备方法和应用-CN202211232001.X在审
发明人：吴丽娜;柏雪松 -专利权人：哈尔滨医科大学
申请日： 2022-10-10 - 公布日： 2023-04-11 - 主分类号： A61K9/72 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于递送核酸药物的可雾化吸入性氟碳化合物纳米转染试剂及其制备方法和应用，属于基因转染生物技术领域。本发明要解决核酸系统递送容易被血浆和组织中RNase酶降解，需提高转染效率的问题。本发明纳米转染试剂包括阳离子脂质、中性磷脂、胆固醇、辅助脂质、稳定剂、氟碳化合物；采用薄膜分散法、乙醇注入法、逆向蒸发法、冷冻干燥法、冻融法、有机溶剂挥发法、超声分散法制备。为核酸的包载和递送的应用。本发明粒径均匀、纳米级尺寸，高含氧，可雾化吸入给药，同时该雾化的纳米转染试剂具有毒副作用小、患者依从性好、转染效率高，包封率较高等优势。
一种用于递送核酸药物雾化吸入碳化纳米转染试剂及其制备方法应用

[发明专利]小鼠肝脏特异性基因转染方法、转基因人源化小鼠模型及其构建方法-CN201510424777.5有效
发明人：吕丽萍;许金波;康琼;张艳宇;马平;高博;肖军;周锡鹏;邓江;闫舫 -专利权人：中国人民解放军军事医学科学院野战输血研究所
申请日： 2015-07-17 - 公布日： 2019-01-15 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了一种以慢病毒基因转染法和静脉高压注射转染法为基础的小鼠肝脏特异性基因转染方法。该方法将慢病毒基因转染法和静脉高压注射转染法巧妙地结合在一起，通过该方法可以使外源基因特异性地在小鼠肝脏中表达，且对肝脏的损伤可在短时间内恢复。通过本转染方法可在小鼠肝脏内表达外源基因，该技术可以用于转基因人源化小鼠模型的建立。用本发明的方法可以作为建立疾病动物模型的一种手段。
小鼠肝脏特异性基因转染方法转基因人源化模型及其构建

[发明专利]经PEI修饰的锰锌铁氧体纳米磁粒的应用-CN201110173490.1无效
发明人：张东生;林梅;张佳 -专利权人：东南大学
申请日： 2011-06-26 - 公布日： 2011-12-21 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及一种PEI-Mn0.5Zn0.5Fe2O4纳米磁粒的应用，该纳米磁粒可用于介导基因转染肝癌细胞。该系统转染肝癌Bel-7402细胞，获得了较高的转染效率，细胞毒性甚微，显示了比电穿孔转染法和脂质体转染法明显的优越性，而且纳米磁粒转染后，在乏氧辐射共同诱导下，基因表达效率明显高于单独辐射诱导组。
pei 修饰铁氧体纳米应用

[发明专利]一种基于磷酸钙-PEG的质粒转染的方法-CN201510750811.8在审
发明人：桑伟健 -专利权人：上海麒盟生物科技有限公司
申请日： 2015-11-08 - 公布日： 2017-05-17 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明提供了一种基于磷酸钙-PEG的质粒转染方法，该方法中使用PEG能够增强DNA-磷酸钙复合物形成的稳定性，提高磷酸钙转染法的转染效率。
一种基于磷酸钙 peg 质粒转染方法

[实用新型]一种用于实现磷酸钙法快速批量转染细胞的装置-CN201520715680.5有效
发明人：胡惠忠;蔡永超;潘讴东 -专利权人：和元生物技术（上海）股份有限公司
申请日： 2015-09-16 - 公布日： 2016-03-30 - 主分类号： C12M1/36 文献下载
摘要：本实用新型涉及一种用于实现磷酸钙法快速批量转染细胞的装置，所述装置包括依次设置和通过连接管道连通的，用于存放转染试剂的存储瓶、用于存放转染所用缓冲液的存储瓶、用于输送液体的蠕动泵和用于实现细胞转染的转染瓶本实用新型细胞转染装置结构简单、能耗低、有助于实现半自动、自动、连续批量细胞转染操作，可节省人力消耗，避免手动转染产生的误差；可获得比手动转染更高更稳定的细胞转染效率，转染效果重复再现性好，适合进行规模放大和应用
一种用于实现磷酸钙快速批量转染细胞装置

[发明专利]利用CountStar Rigel系统结合细胞染色来分析转染效率的方法-CN202110597377.X在审
发明人：焦鹏;陈红霞;徐琦;张盼;林文龙 -专利权人：上海碧博生物医药科技有限公司
申请日： 2021-05-31 - 公布日： 2021-09-10 - 主分类号： G01N15/10 文献下载
摘要：本发明公开一种利用CountStar Rigel系统结合细胞染色来分析转染效率的方法，该方法包括步骤：1)使用CloneDetect试剂对转染后的细胞样品进行细胞染色；CloneDetect试剂能与细胞产生并分泌到细胞表面的蛋白特异性结合；2)利用CountStar Rigel系统对步骤1)中完成染色的细胞样品进行检测，读取FITC信号，得出转染后的细胞样品的转染效率。本发明的方法具有快速、简便、准确地获得转染效率结果的特点，能够克服融合蛋白法所存在的后续切割费时费力且非常困难的缺陷，并具有比GFP细胞类比法更好的准确率，且相比荧光显微镜或流式细胞仪具有操作简化、提高效率的优点
利用 countstar rigel 系统结合细胞染色分析转染效率方法

[发明专利]一种纳米磁粒复合系统-CN201110175019.6无效
发明人：张东生;林梅;张佳 -专利权人：东南大学
申请日： 2011-06-26 - 公布日： 2011-12-21 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：该系统中，PEI-MZF-NPs具有良好的结合、保护和释放pHRE-Egr1-EGFP能力，利用PEI-MZF-NPs为载体介导pHRE-Egr-1-EGFP转染肝癌Bel-7402细胞，获得了较高的转染效率，细胞毒性甚微，显示了比电穿孔转染法和脂质体转染法明显的优越性，而且纳米磁粒转染后，在乏氧辐射共同诱导下，基因表达效率明显高于单独辐射诱导组。
一种纳米复合系统

[发明专利]一种适用于外源基因转染的纳米载体材料及其制备方法-CN201811318288.1在审
发明人：李威;梁蓓蓓;黄勇;黄钢;孟继鸿;董霞 -专利权人：上海健康医学院
申请日： 2018-11-07 - 公布日： 2019-03-01 - 主分类号： C12N15/87 文献下载
摘要：本发明提供了一种可用于细胞转染的阳离子型纳米材料及其制备方法，本发明首先利用高分子交联、纳米自组装法，制备出具有高效转染效率的阳离子纳米材料；其次利用DNA电泳检测转染材料携载质粒DNA的能力；最后利用倒置荧光显微镜及流式细胞仪检测转染材料的转染效率该转染材料不但可直接瞬转细胞，还可以作为细胞稳转的载体，尤其是有血清条件下的转染能力，可取得更好的转染效果；且其转染效率可以由温度来调节。本发明获得的纳米转染材料实现了不同真核细胞的瞬转和稳转，可替代病毒载体转染，增加了外源基因转染的生物安全性，应用前景广阔。
转染制备纳米材料外源基因转染效率倒置荧光显微镜纳米载体材料应用前景广阔流式细胞仪生物安全性细胞病毒载体电泳检测高效转染细胞转染血清条件阳离子型真核细胞自组装法阳离子交联可用载质检测替代

[发明专利]一种慢病毒载体及其介导的分泌脑源性神经营养因子的骨髓间充质干细胞系的制备方法-CN201110026535.2无效
发明人：张琰;李筱荣;王飞;孙国玲 -专利权人：天津医科大学眼科中心
申请日： 2011-01-25 - 公布日： 2011-09-07 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：包括以下步骤：(1)慢病毒表达载体的构建：利用PCR的方法，扩增人BDNF的cDNA序列，扩增后的人BDNF克隆入慢病毒表达载体，重组慢病毒表达载体命名为lenti-BDNF；(2)用优化参数的磷酸钙转染法包装慢病毒，并用超速离心法浓缩病毒颗粒，测定包装病毒的滴度；(3)用包装后的慢病毒颗粒，用逆转染法转导人骨髓间充质干细胞。本发明通过优化转染前细胞密度，2X转染缓冲液的pH值，转染后换液时间，以及CaCl2浓度，摸索出高效、低成本磷酸钙转染并包装病毒的方法。转导后的人骨髓间充质干细胞可以高效、持续分泌BDNF。
一种病毒载体及其分泌脑源性神经营养因子骨髓间充质干细胞系制备方法

[发明专利]脂质体介导构建表达hPEPT2的海拉细胞方法-CN201010615885.8无效
发明人：刘克辛;郭鑫金;孟强;刘琦;王长远 -专利权人：大连医科大学
申请日： 2010-12-31 - 公布日： 2011-08-17 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明公开一种脂质体介导构建表达hPEPT2的海拉细胞方法，是用脂质体转染法将hPEPT2的质粒转入海拉细胞中，并筛选出稳定转染的细胞。操作简单，没有免疫原性，对细胞没有毒副作用，重复性好，hPEPT2基因转染效率高达30～40％。
脂质体构建表达 hpept2 细胞方法

[发明专利]体内胚胎干细胞转染法建立转基因动物或乳腺生物反应器-CN00114225.9无效
发明人：安靓 -专利权人：安靓
申请日： 2000-04-25 - 公布日： 2000-10-11 - 主分类号： A01K67/027 文献下载
摘要：本发明涉及用于建立转基因动物或乳腺生物反应器,特别是体内胚胎干细胞转染法建立转基因动物或乳腺生物反应器。其特征在于将配制好的转染源,直接引入到动物ESC发育所在的部位,使ESC带上转染源,以ESC为载体,转染源被带入到胚胎体内。
体内胚胎干细胞转染建立转基因动物乳腺生物反应器

[发明专利]一种纳米磁粒复合系统的制备方法-CN201110173486.5无效
发明人：林梅;张东生;张佳 -专利权人：东南大学
申请日： 2011-06-26 - 公布日： 2011-10-26 - 主分类号： A61K48/00 文献下载
摘要：本发明制得的复合物转染肝癌Bel-7402细胞，获得了较高的转染效率，细胞毒性甚微，显示了比电穿孔转染法和脂质体转染法明显的优越性。
一种纳米复合系统制备方法

[发明专利]一种SIV载体的制备方法-CN201110324532.7无效
发明人：朱义;游军;朱亚峰;长谷川户 -专利权人：四川百利药业有限责任公司;日本DNAVEC株式会社
申请日： 2011-10-24 - 公布日： 2013-04-24 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了一种SIV载体的制备方法，采用磷酸钙共沉淀转染法，将培养皿用胶原蛋白进行处理，在转染过程中使用Opti-MEM培养基，在转染过程中增加DNA浓度。
一种 siv 载体制备方法

[发明专利]一种新型无创的内耳耳蜗基因转染给药系统的构建方法-CN201911303588.7有效
发明人：王军义;林寿凯 -专利权人：广东药科大学
申请日： 2019-12-17 - 公布日： 2023-05-16 - 主分类号： A61K48/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种新型无创的内耳耳蜗基因转染给药系统的构建方法，具体步骤如下：利用基因工程技术构建重组Prestin腺相关病毒载体，将重组病毒载体与原位凝胶混合构成内耳基因转染载体混合液，再经鼓膜穿刺鼓室给药的圆窗途径对实验对象耳蜗进行基因转染；转染后通过免疫荧光法观察耳蜗组织病毒转染分布、耳蜗基底膜铺片免疫荧光检测绿色荧光蛋白和Prestin蛋白的表达及分布、Western‑Blot检测耳蜗基底膜Prestin表达水平。本发明实现了内耳耳蜗无创给药基因转染的突破，避免了传统外科手术暴露鼓室对听觉器官的损伤，对内耳的基因转染具有一定的应用价值。
一种新型内耳耳蜗基因转染系统构建方法

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