本发明公开了高卢蜜环菌的PCR‑RFLP鉴别方法。本发明提供了用于鉴定或辅助鉴定待测蜜环菌为A型蜜环菌还是B型蜜环菌的引物对，是通过包括如下步骤的方法设计得到的：将SEQ ID No.5与SEQ ID No.6进行序列比对，得到DNA比对序列矩阵；然后根据所述DNA比对序列矩阵中第550位核苷酸之前的保守区域设计上游引物，根据所述DNA比对序列矩阵中第555位核苷酸之后的保守区域设计下游引物；所述上游引物和所述下游引物组成所述引物对。本发明方法可以有效鉴别A型蜜环菌和B型蜜环菌。本发明为市售菌株鉴别提供一种快速、客观的检测方法，为栽培生产中高卢蜜环菌的高效利用奠定基础。
本发明涉及一种高卢蜜环菌多态性微卫星分子标记及其引物与应用，属于分子技术领域，本发明公开了高卢蜜环菌多态性微卫星分子标记，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1～12所示，本发明还公开了高卢蜜环菌多态性微卫星分子标记的引物，其核苷酸序列如SEQ ID NO.13～36所示。本发明的微卫星分子标记引物可用于高卢蜜环菌的遗传图谱的构建、目标基因的标定、指纹图谱的绘制、品种鉴定、谱系分析、群体间遗传距离分析、进化和遗传多样性及品种选育等。
本发明公开了一种天麻谷氨酰胺合成酶(GS)基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；编码353个氨基酸残基；构建天麻GS基因的原核表达载体，原核表达分析表明本发明天麻谷氨酰胺合成酶基因为可溶性蛋白，其分子量约为59.94kDa；本发明构建了天麻谷氨酰胺合成酶基因的真核过表达载体，通过农杆菌法转染天麻共生菌蜜环菌，获得转天麻谷氨酰胺合成酶基因的蜜环菌，将转GS基因工程蜜环菌在13℃和28℃下培养，长势比野生型蜜环菌好且生长快速，因此本发明天麻谷氨酰胺合成酶基因有助于缩短蜜环菌的培养时间和提高蜜环菌的抗寒性和抗高温生长，本发明为增强天麻的抗冷性，扩大天麻种植分布范围，增强天麻氮代谢能力及提高天麻产量提供实验基础
本发明公开了一种天麻超氧化物歧化酶（SOD）基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；编码239个氨基酸残基；构建天麻SOD基因的原核表达载体，原核表达分析表明本发明天麻SOD基因为可溶性蛋白，其分子量约为47.4kDa；本发明构建了天麻SOD基因的真核过表达载体，通过农杆菌法转染天麻共生菌蜜环菌，获得转天麻SOD的蜜环菌，将转SOD基因工程蜜环菌在13℃下培养，长势比野生型蜜环菌好且生长快速，因此本发明天麻超氧化物歧化酶基因有助于缩短蜜环菌的培养时间和提高蜜环菌的抗寒性生长
本发明涉及十二种弱寄生蜜环菌通用多态性微卫星分子标记及其引物与应用，属于分子生物学技术领域，本发明公开了十二种弱寄生蜜环菌通用多态性微卫星分子标记，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1～13所示；本发明还公开了十二种弱寄生蜜环菌通用多态性微卫星分子标记，其核苷酸序列如SEQ ID NO.14～39所示；本本发明所述的多态性微卫星分子标记和引物可用于弱寄生蜜环菌的遗传图谱的构建、目标基因的标定、指纹图谱的绘制、品种鉴定、谱系分析、群体间遗传距离分析、进化和遗传多样性及品种选育
本发明公开了一种锌指转录因子基因AgZFP48，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，本发明通过构建AgZFP48基因抑制表达和过表达载体、双荧光素酶实验发现基因AgZFP48参与了氮营养代谢相关基因的调控，本发明为蜜环菌的氮代谢研究、促进蜜环菌的生长、提高菌材的利用率、提高栽培天麻的产量和质量及优良蜜环菌菌株的育种提供理论基础。
