本发明涉及一种重组虎纹克胰肽载体及其制备方法和用途。重组虎纹克胰肽载体包括1或1个以上拷贝虎纹克胰肽,虎纹克胰肽的碱基序列如SEQ ID NO:9所示。其制备方法为:获得虎纹克胰肽基因;以获得的虎纹克胰肽基因为模板,进行扩增,酶切,连接,得到1个拷贝数的虎纹克胰肽重组载体;将1个拷贝数的虎纹克胰肽重组载体进行酶切连接,再以连接产物为扩增模板,进行第二次扩增,所得到的扩增产物与载体双酶切后进行连接得到2个拷贝数的虎纹克胰肽重组载体;重复上述步骤,依次得到2个以上拷贝数的虎纹克胰肽重组载体。本发明的重组虎纹克胰肽载体表达量高、制备方法简单,与天然提取的虎纹克胰肽在生物活性上无明显差异。
本发明涉及一种虎纹蛙抗菌肽及其基因和在制药中的应用,所述虎纹蛙抗菌肽是由12个氨基酸组成的一种环状多肽,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,其第三位半胱氨酸和第十一位半胱氨酸相成分子内二硫键,第十二位酪氨酸带有酰胺化修饰所述虎纹蛙抗菌肽的基因序列由SEQ ID NO.4组成,其中编码有功能的成熟虎纹蛙抗菌肽是第196‑231位核苷酸。本发明由虎纹蛙抗菌肽的基因推导其成熟功能多肽氨基酸序列,合成的虎纹蛙抗菌肽具有很强的抗菌和抗氧化功能。该虎纹蛙抗菌肽具有结构简单、人工合成方便的特点,可以作为制备病原微生物感染性疾病和自由基氧化导致的治疗药物、美容护肤药物和食品添加剂中应用。