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[发明专利]脱羧酶活性的细胞化学和生物化学检测方法及试剂盒-CN02145267.9无效
发明人：缪金明 -专利权人：缪金明
申请日： 2002-11-14 - 公布日： 2004-06-02 - 主分类号： C12Q1/25 文献下载
摘要：一种脱羧酶活性的细胞化学和生物化学检测方法及试剂盒，是采用羧化酶酶藕联固定CO₂的技术，测定脱羧酶的细胞内定位以及活性变化，该检测系统或试剂盒包括：待检测的脱羧酶的底物；羧化酶和羧化酶的底物；羧化酶产物的显色试剂以及比色法所需的增溶试剂，可用来测定所有催化脱羧产生CO₂的酶类，包括鸟氨酸脱羧酶、组氨酸脱羧酶、多巴脱羧酶、羟胺脱羧酶、谷氨酸脱羧酶、丙酮酸脱羧酶、S腺苷蛋氨酸脱羧酶、尿卟啉原脱羧酶、谷氨酰胺脱羧酶、酪氨酸脱羧酶、精氨酸脱羧酶、色氨酸脱羧酶、甘氨酸脱羧酶等。脱羧酶检测试剂盒可供各种研究用的市场。
脱羧酶活性细胞化学生物化学检测方法试剂盒

[发明专利]一种透性化谷氨酸脱羧酶工程菌及其制备方法-CN201410005932.5有效
发明人：梅乐和;赵伟睿;胡升;黄俊;雷引林;姚善泾 -专利权人：浙江大学宁波理工学院
申请日： 2014-01-03 - 公布日： 2014-05-14 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种透性化谷氨酸脱羧酶工程菌及其制备方法，所述方法包括：将已表达谷氨酸脱羧酶的谷氨酸脱羧酶工程菌菌体悬浮于水或缓冲液中，50～70℃处理5～40min后，收集菌体，得到所述的透性化谷氨酸脱羧酶工程菌；其中，所述的谷氨酸脱羧酶工程菌包括宿主细胞和转入宿主细胞的谷氨酸脱羧酶基因，所述的宿主细胞为大肠杆菌。本发明还提供了所述方法得到的透性化谷氨酸脱羧酶工程菌。本发明的方法，简便、成本低，易于操作，可有效提高菌体的谷氨酸脱羧酶表观催化活力。
一种透性化谷氨酸脱羧酶工程及其制备方法

[发明专利]一种谷氨酸脱羧酶及其编码基因和用途-CN201210431917.8无效
发明人：梅乐和;林玲;胡升;雷引林;金志华;姚善泾 -专利权人：浙江大学宁波理工学院
申请日： 2012-11-02 - 公布日： 2013-02-06 - 主分类号： C12N9/88 文献下载
摘要：本发明公开了一种谷氨酸脱羧酶及其用途，该谷氨酸脱羧酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还公开了一种编码该谷氨酸脱羧酶的基因及含有该基因的表达单元、重组载体和转化子。本发明又公开该谷氨酸脱羧酶在生产γ-氨基丁酸中的应用。本发明谷氨酸脱羧酶的催化速率是野生型谷氨酸脱羧酶的2.5倍，能高效合成GABA，为利用谷氨酸脱羧酶进行γ-氨基丁酸的生物制备创造了更有利的条件。
一种谷氨酸脱羧酶及其编码基因用途

[发明专利]一种用酵母表达系统生产重组草酸脱羧酶的方法及应用-CN201810031137.1在审
发明人：汪小锋;汪卫;陈火晴;刘艳红;陈先桥 -专利权人：武汉康复得生物科技股份有限公司
申请日： 2018-01-12 - 公布日： 2018-08-03 - 主分类号： C12N9/88 文献下载
摘要：本发明提供了一种用酵母表达系统生产重组草酸脱羧酶的方法及应用。通过将真核微生物来源的草酸脱羧酶基因导入到酵母表达系统的宿主细胞中，构建能够高效分泌表达重组草酸脱羧酶的系列工程菌株，将重组菌株发酵培养，不同的重组菌分泌表达的草酸脱羧酶活力可达到5750‑9000IU本发明的生产重组草酸脱羧酶的方法实现了草酸脱羧酶在酵母宿主细胞中高效重组分泌表达，重组草酸脱羧酶具有与天然宿主细胞制备的草酸脱羧酶相似的酶学性质。同时，本发明的重组草酸脱羧酶具有糖基化修饰，pH耐受范围宽，在胃肠环境中稳定性强，半衰期长；分泌表达的蛋白可溶，生产和纯化工艺简单，无内毒素污染，可广泛应用于生物医药、特殊医学配方食品和功能性食品加工等领域
草酸脱羧酶酵母表达系统分泌表达生产重组草酸脱羧酶基因高效分泌表达酵母宿主细胞天然宿主细胞内毒素应用功能性食品生产和纯化糖基化修饰真核微生物发酵培养工程菌株酶学性质配方食品生物医药宿主细胞胃肠环境稳定性强重组菌株半衰期重组菌构建可溶耐受制备蛋白医学加工污染

[发明专利]一种羧基磁珠固定化谷氨酸脱羧酶及其制备方法和应用-CN201610455225.5有效
发明人：黄俊;梅乐和;李佳男;胡升;谢湉;谢东芳;方卉 -专利权人：浙江科技学院
申请日： 2016-06-21 - 公布日： 2019-04-16 - 主分类号： C12N11/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种羧基磁珠固定化谷氨酸脱羧酶及其制备方法和应用，所述羧基磁珠固定化谷氨酸脱羧酶，以羧基磁珠为载体，所述谷氨酸脱羧酶通过氨基和羧基偶联固定在羧基磁珠表面，所述谷氨酸脱羧酶的编码基因的碱基序列如所述制备方法包括以下步骤：(1)提供谷氨酸脱羧酶和羧基磁珠；(2)将谷氨酸脱羧酶与经活化的羧基磁珠混合，反应完成后，分离得到所述羧基磁珠固定化谷氨酸脱羧酶。本发明羧基磁珠固定化谷氨酸脱羧酶具有易分离、可反复回收利用、热稳定性高、操作稳定性高等优点；与游离酶相比，羧基磁珠固定化谷氨酸脱羧酶半失活温度提高了2.1℃；重复催化10次后，仍保持90.42％的活性。
一种羧基固定谷氨酸脱羧酶及其制备方法应用

[发明专利]一种固定化赖氨酸脱羧酶及其制备方法-CN201910589939.9有效
发明人：徐敏;刘修才 -专利权人：上海凯赛生物技术股份有限公司;CIBT美国公司;凯赛（太原）生物科技有限公司
申请日： 2019-07-02 - 公布日： 2022-08-16 - 主分类号： C12N11/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种固定化赖氨酸脱羧酶及其制备方法，所述固定化赖氨酸脱羧酶为赖氨酸脱羧酶与载体固定化后，经过丹宁处理得到。本发明提供的固定化赖氨酸脱羧酶经过丹宁处理，极大地提高了赖氨酸脱羧酶的多聚体与固定化载体的结合结构的稳定性，显著提高了固定化赖氨酸脱羧酶的催化稳定性和使用效率，能够实现固定化赖氨酸脱羧酶的高活性多批次重复使用
一种固定赖氨酸脱羧酶及其制备方法

[发明专利]草酸脱羧酶的生产中利用的重组表达质粒载体及重组菌、以及重组草酸脱羧酶的生产方法-CN200880123693.6无效
发明人：小山贵史;小嶋裕三;儿岛宪二;箕田正史 -专利权人：天野酶株式会社
申请日： 2008-11-26 - 公布日： 2010-12-15 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：本发明的课题在于提供高效生产微生物来源的草酸脱羧酶的手段。构建包含芽孢杆菌(bacillus)属的α-淀粉酶启动子和在其调控下配置的微生物来源的草酸脱羧酶基因的重组表达质粒载体。用该载体转化宿主细菌，制备草酸脱羧酶产生菌。另外，培养该产生菌后，通过回收产生的草酸脱羧酶，生产重组草酸脱羧酶。
草酸脱羧酶生产利用重组表达质粒载体以及方法

[发明专利]川桑色氨酸脱羧酶TDC及其应用-CN201910342319.5在审
发明人：赵爱春;郑莎;朱映雪;曹博宁;刘长英;张帅;向仲怀 -专利权人：西南大学
申请日： 2019-04-26 - 公布日： 2020-10-30 - 主分类号： C12N9/88 文献下载
摘要：本发明公开了川桑色氨酸脱羧酶TDC及其应用，其中川桑色氨酸脱羧酶TDC的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示，将川桑色氨酸脱羧酶TDC基因克隆后构建原核表达系统，然后进行酶活测定，测得具有较高的色氨酸脱羧酶的活性，因此川桑色氨酸脱羧酶TDC可以作为工程菌的目的基因，川桑色氨酸脱羧酶TDC也可以作为体外催化L‑色氨酸转化为色胺的催化剂，具有很好的应用前景。
色氨酸脱羧酶 tdc 及其应用

[发明专利]一种赖氨酸脱羧酶菌株及其在戊二胺生产中的应用-CN201910117962.8在审
发明人：高世军;刘象刚;吴泽华;马光;王志强;孙敬善;张杰;褚玉强 -专利权人：山东寿光巨能金玉米开发有限公司;寿光金远东变性淀粉有限公司;寿光金玉米生物科技有限公司;临清德能金玉米生物有限公司
申请日： 2019-02-15 - 公布日： 2019-04-19 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种赖氨酸脱羧酶菌株及其在戊二胺生产中的应用方法。本发明赖氨酸脱羧酶菌株是以通过基因工程方法将赖氨酸脱羧酶基因导入大肠杆菌后的重组生物工程菌为出发菌株，经过诱变筛选得到高酶活力赖氨酸脱羧酶菌株，保藏编号为：CGMCC No.16762，和原始工程菌相比，其赖氨酸脱羧酶活力提升了3.93倍。本发明进一步公布了赖氨酸脱羧酶菌株在戊二胺生产中的应用，赖氨酸脱羧酶菌株经过发酵培养，获得含有赖氨酸脱羧酶的发酵液，按5%添加量加入赖氨酸盐酸盐和辅酶溶液中，40℃条件下，转化3h，戊二胺含量最高达到326.3g
赖氨酸脱羧酶菌株二胺应用赖氨酸盐酸盐大肠杆菌赖氨酸盐酸摩尔转化率生物工程菌出发菌株发酵培养高酶活力活力提升基因工程原始工程保藏发酵液添加量辅酶诱变生产筛选基因转化

[发明专利]一种制备阿魏酸脱羧酶的方法-CN201810364667.8有效
发明人：姜华 -专利权人：齐鲁工业大学
申请日： 2018-04-23 - 公布日： 2021-12-10 - 主分类号： C12N9/88 文献下载
摘要：本发明属于生物工程技术领域，特别涉及一种制备阿魏酸脱羧酶的方法。该阿魏酸脱羧酶的制备方法包括：(1)将产阿魏酸脱羧酶的微生物培养、离心收集细胞、细胞破碎，调细胞破碎液pH值和离子强度；(2)配制反胶团体系溶液和反萃取水相溶液；(3)利用反胶团进行萃取阿魏酸脱羧酶；(4)进行反萃取，得到含有阿魏酸脱羧酶的水溶液；(5)采用超滤膜过滤浓缩，截留液冷冻干燥，制得阿魏酸脱羧酶产品。本发明可以实现阿魏酸脱羧酶制备的规模化、连续化，并且酶的生产工艺简便，生产周期短，酶活力回收率高，阿魏酸脱羧酶的生产成本较低。
一种制备阿魏酸脱羧酶方法

[发明专利]一种谷氨酸脱羧酶及其编码基因和应用-CN201510818945.9有效
发明人：杨子银;梅鑫;傅秀敏 -专利权人：中国科学院华南植物园
申请日： 2015-11-20 - 公布日： 2018-11-23 - 主分类号： C12N9/88 文献下载
摘要：本发明公开了一种谷氨酸脱羧酶及其编码基因和应用。本发明从茶(Camellia sinensis)叶中筛选得到了能高效催化形成GABA的谷氨酸脱羧酶CsGAD，通过利用序列敲除方法获得切除了谷氨酸脱羧酶CsGAD的C端31个氨基酸的序列即谷氨酸脱羧酶CsGADm，其具有更高的催化形成GABA的活性；谷氨酸脱羧酶CsGAD和谷氨酸脱羧酶CsGADm的催化活性分别达0.99±0.09、1.67±0.34mg GABA/mg protein/min。本发明利用植物来源的谷氨酸脱羧酶生物合成生产γ‑氨基丁酸，具有来源安全、工艺简单、转化时间快、转化率高等优点，具有良好的应用前景。
谷氨酸脱羧酶编码基因催化应用氨基丁酸催化活性生物合成植物来源氨基酸敲除切除筛选转化安全生产

[发明专利]用标记免疫技术测定鸟氨酸脱羧酶的试剂盒及其测定方法-CN02110343.7无效
发明人：朱有名;韩金祥;尤瑞·巴克拉克 -专利权人：山东省医药生物技术研究中心
申请日： 2002-05-09 - 公布日： 2002-11-20 - 主分类号： G01N33/53 文献下载
摘要：一种用标记免疫技术测定鸟氨酸脱羧酶的试剂盒及其测定方法,试剂盒装有下列各种试剂抗鸟氨酸脱羧酶抗体包被的预包被板;生物素标记的抗鸟氨酸脱羧酶抗体;辣根过氧化物酶标记的亲和素;鸟氨酸脱羧酶标准品;样品稀释液它利用标记免疫测定技术通过对鸟氨酸脱羧酶抗原含量的测定来间接反映鸟氨酸脱羧酶的活性,它解决了现有技术通过检测14CO2或腐胺的量来反映鸟氨酸脱羧酶的活性而存在的操作复杂、费时费力、有放射性污染、灵敏度较低的缺点
标记免疫技术测定鸟氨酸脱羧酶试剂盒及其方法

[发明专利]用于生产草酸脱羧酶的重组质粒、大肠杆菌表达系统及方法和应用-CN201810865726.X有效
发明人：汪小锋;吴玉峰;汪卫;刘艳红;陈火晴 -专利权人：武汉康复得生物科技股份有限公司
申请日： 2018-08-01 - 公布日： 2021-07-20 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了用于生产草酸脱羧酶的重组质粒、大肠杆菌表达系统及方法和应用。所述用于生产草酸脱羧酶的重组质粒，包含：草酸脱羧酶基因、分子伴侣基因和调控胞内锰离子浓度的基因。本发明将所述重组质粒导入大肠杆菌表达菌株和MntP基因缺失的大肠杆菌中，均得到可溶表达且有活性的草酸脱羧酶。并对重组菌株的培养温度和诱导温度进行了优化，发现培养温度为37℃，诱导温度为25℃时，草酸脱羧酶的表达量较高。通过有机溶剂沉淀和硫酸铵沉淀两步简单纯化，草酸脱羧酶比活力能达到45.6U/mg，纯度超过95％。本发明技术方案具有生产和纯化工艺简单，草酸脱羧酶的表达量和比活力高，易于工业放大，成本低，有利于草酸脱羧酶的工业化生产和应用。
用于生产草酸脱羧酶重组质粒大肠杆菌表达系统方法应用

[发明专利]一种N-甲基-2;3;7;8-四羟基苯并菲啶类化合物、制备方法和应用-CN201611040050.8有效
发明人：程辟;曾建国 -专利权人：湖南省中药提取工程研究中心有限公司
申请日： 2016-11-21 - 公布日： 2019-04-12 - 主分类号： C07D221/18 文献下载
摘要：本发明属于天然药物化学领域，具体涉及一种用于抑制多巴脱羧酶(DDC)的N‑甲基‑2,3,7,8‑四羟基苯并菲啶季铵盐的制备方法及其在制药中的应用。多巴脱羧酶又名芳香氨基酸脱羧酶，哺乳动物肠道微生物和自身分泌的多巴脱羧酶能够催化芳香氨基酸在肠道和外周组织中脱羧降解，降低芳香氨基酸的吸收和利用率。本发明制备的N‑甲基‑2，3，7，8‑四羟基苯并菲啶季铵盐与商品化的多巴脱羧酶抑制剂比较具有全新的巴脱羧酶的抑制机理。
多巴脱羧酶羟基苯并菲芳香氨基酸季铵盐脱羧酶制备多巴脱羧酶抑制剂制备方法和应用哺乳动物肠道天然药物化学催化芳香类化合物氨基酸肠道降解脱羧外周制药分泌商品化微生物吸收应用

[发明专利]一种没食子酸脱羧酶的分离纯化的方法-CN201510961301.5有效
发明人：王成章;李文君;周昊;陈虹霞;陶冉 -专利权人：中国林业科学研究院林产化学工业研究所
申请日： 2015-12-18 - 公布日： 2019-03-19 - 主分类号： C12N9/88 文献下载
摘要：本发明公开了一种没食子酸脱羧酶的分离纯化方法。以没食子酸为底物，通过底物诱导产生没食子酸酸脱羧酶，再经过粗提、盐析、透析、DEAE纤维素柱和葡聚糖凝胶柱纯化分离，得到了没食子酸脱羧酶样品；再通过PAGE聚丙烯酰氨凝胶电泳初步测定其分子量、MALDI‑TOF/TOF质谱鉴定对没食子酸脱羧酶的分子，本方法制备得到了没食子酸脱羧酶可降解没食子酸生产焦性没食子酸，与没食子酸为原料进行没食子酸脱羧酶方法比较，具有副产物少，污染小，对设备要求较低，生产工艺易实施，且制备得到的没食子酸脱羧酶纯度高
一种没食子酸脱羧酶分离纯化方法

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