本发明公开了一种抗菌肽LRGG在制备氟喹诺酮类药物抗菌增效剂中的应用,涉及生物医药技术领域。所述抗菌肽LRGG的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供的抗菌肽LRGG与氟喹诺酮类药物联合应用,可对大肠杆菌、志贺氏痢疾杆菌及多杀性巴氏杆菌等革兰阴性菌产生协同杀菌作用。其中,LRGG与氟喹诺酮类药物联合应用对耐药牛源多杀性巴氏杆菌(MIC=32μg/mL)的协同杀菌作用最强,可使氟喹诺酮类药物对耐药牛源多杀性巴氏杆菌的抗菌活性提高512倍(MIC=0.0625μg/mL),显著提高了氟喹诺酮类药物对耐药牛多杀性巴氏杆菌引起感染的治疗效果。