本发明公开了一种采用DNA分子重排(DNA Shuffling)技术获得了草甘膦抗性增强的来源于葡萄的EPSP合酶多位点突变体及其编码基因与应用。所述突变体含有7个突变位点,其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,其编码的碱基序列如SEQ ID No.2所示。试验表明,本发明的来源于葡萄的EPSP合酶多位点突变体及其编码的基因,同时具有较高的草甘膦抗性和较强的与PEP亲和性,这些特性将为该基因用于抗草甘膦转基因作物的培育提供了可能。
本发明公开了一种甾体羟化酶的突变体、重组酵母菌株、底物及应用,涉及基因工程领域,甾体羟化酶的突变体包括突变体L1或/和突变体L2,突变体L1的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:3所示,突变体L2的氨基酸序列如序列表中重组酵母菌株由突变体L1或/和突变体L2导入酿酒酵母得到。甾体羟化酶的底物为甾体化合物17α‑羟孕酮。甾体羟化酶的突变体、重组酵母菌株、底物在催化甾体C11β位羟化的应用。
一种鼠李糖苷酶TpeRha突变体及其制备方法和应用,本发明涉及生物医药技术领域,为突变体TpeRha‑R369A、突变体TpeRha‑W512A和突变体TpeRha‑K579A中的任一种;所述突变体TpeRha‑R369A,为将氨基酸序列为如SEQ ID NO:1所示的TpeRha酶的第369位的精氨酸突变为丙氨酸;所述突变体TpeRha‑W512A,为将氨基酸序列为所述TpeRha酶的第512位的色氨酸突变为丙氨酸。本发明通过定点突变技术构建α‑L‑鼠李糖苷酶TpeRha的组合突变体,催化转化淫羊藿总黄酮中的多组分黄酮糖苷制备淫羊藿次苷Ⅰ组合物,酶解时间短,转化率高。