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[发明专利]使用纤维素酶吸附酶解秸秆纤维素的方法-CN200610011216.3无效
发明人：陈洪章;徐建 -专利权人：中国科学院过程工程研究所
申请日： 2006-01-18 - 公布日： 2007-07-25 - 主分类号： C12P19/02 文献下载
摘要：本发明涉及的使用纤维素酶吸附酶解秸秆纤维素的方法，步骤如下：将经蒸汽爆破和干燥处理的汽爆秸秆与纤维素酶酶液混合，在－4℃～0℃下进行吸附－解吸；待吸附－解吸达到平衡后，进行固液分离，得上清和吸附有纤维素酶的汽爆秸秆；再将吸附有纤维素酶的汽爆秸秆在40℃～50℃下酶解48～72小时；如此反复上述吸附－解吸和酶解过程1－4次。其优点：一批酶酶解多批底物，纤维素酶的平均用量最低至6IU/g底物，每国际单位纤维素酶可产生还原糖17.70～27.07mg，低于实施工业化估算的酶最低用量标准10IU/g底物；还可缩短酶解时间，节约耗能；而且纤维素酶可回收。
使用纤维素酶吸附秸秆纤维素方法

[发明专利]一种回收纤维素酶的方法及其纤维素酶回收体系-CN202210577821.6在审
发明人：于海龙;付玉洁;刘仕伟;李露;吴琼;于世涛 -专利权人：青岛科技大学
申请日： 2022-05-25 - 公布日： 2022-07-29 - 主分类号： C12N9/42 文献下载
摘要：本发明涉及纤维素酶回收技术领域，公开了一种回收纤维素酶的方法及其纤维素酶回收体系。本公开提供的纤维素酶在水解体系中对待水解底物进行水解糖化，水解结束后向水解液中加入由K2HPO4和低共熔溶剂[ChCl][PEG]3构建的纤维素酶回收体系，回收得到纤维素酶和葡萄糖。本公开提供的技术方案在提高酶活性的基础上利用DES双水相回收技术实现纤维素酶的高效回收，可解决目前纤维素酶水解效率低和酶回收难的问题，能有效降低纤维素酶水解糖化过程的生产成本。
一种回收纤维素酶方法及其体系

[发明专利]一种基于荧光素酶亚基互补的主蛋白酶抑制剂活性检测系统及在药物筛选中的应用-CN202111473852.9在审
发明人：刘建喜;张志恒;刘霞;孟庆余;高永静;张翼德 -专利权人：南通大学
申请日： 2021-11-30 - 公布日： 2022-03-01 - 主分类号： C12Q1/66 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于荧光素酶亚基互补的主蛋白酶抑制剂活性检测系统及在药物筛选中的应用，将含有蛋白酶酶切位点的多肽序列插入到荧光素酶的两个亚基之间。在蛋白酶没有活性的情况下，荧光素酶两个亚基相互作用的完整性得到保护，因此整个结构具有荧光素酶活性，可以催化化学底物发出荧光。在蛋白酶表现出活性的情况下，连接荧光素酶两个亚基之间的蛋白酶酶切位点的多肽序列被蛋白酶切断，亚基相互作用的完整性被破坏，荧光素酶不再具有荧光素酶活性。据此可以评价主蛋白酶在各种化合物影响下的活性，进而推断化合物对主蛋白酶活性的抑制能力。
一种基于荧光素酶亚基互补蛋白酶抑制剂活性检测系统药物筛选中的应用

[发明专利]一种八氢番茄红素脱氢酶基因及其应用-CN201110190899.4有效
发明人：肖敏;张金华;卢丽丽 -专利权人：山东大学
申请日： 2011-07-08 - 公布日： 2011-11-30 - 主分类号： C12N15/53 文献下载
摘要：本发明涉及一种八氢番茄红素脱氢酶基因，尤其涉及一种高效合成番茄红素的八氢番茄红素脱氢酶基因及其应用，属于基因工程技术领域。一种八氢番茄红素脱氢酶基因，核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。该基因编码的八氢番茄红素脱氢酶，氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明所述八氢番茄红素脱氢酶基因可高效生产番茄红素。经检测，发酵液中番茄红素产量为0.269mg/L，菌体干重中番茄红素含量为0.256mg/g，占类胡萝卜素总量的73.5％，固氮红细菌八氢番茄红素脱氢酶重组酶催化产物以番茄红素为主要色素成分，为番茄红素生产提供了新的酶源
一种番茄脱氢酶基因及其应用

[发明专利]水蛭素抗凝血酶活性的测定方法-CN201510337079.1有效
发明人：杨剑;熊文朋;刘艳芳;修立辉 -专利权人：广西师范学院
申请日： 2015-06-17 - 公布日： 2017-06-16 - 主分类号： G01N27/447 文献下载
摘要：本发明公开了一种水蛭素抗凝血酶活性的测定方法，将已知一定质量的含有未知活性的水蛭素与足量的凝血酶反应后，在交联剂BS3作用下进行交联反应，终止交联后得到含有水蛭素、凝血酶和水蛭素‑凝血酶化合物的第一混合体系，经电泳后采用光密度扫描，在已知蛋白带密度的对照物基础上根据水蛭素‑凝血酶化合物的蛋白带密度得到水蛭素‑凝血酶化合物的质量，根据水蛭素与凝血酶以质量比为1∶5结合得到水蛭素‑凝血酶化合物得出参与反应的有效凝血酶的质量，再根据凝血酶中有效凝血酶的质量分数以及水蛭素的质量计算得出该一定质量的水蛭素抑制凝血酶的活性值即为水蛭素抗凝血酶的活性值。
水蛭抗凝活性测定方法

[发明专利]一种离子液体原位酶解纤维素体系中纤维素酶的回收方法-CN201210434684.7有效
发明人：李强;季更生;冯圆圆;谷绪顶;费娟娟;张子龙 -专利权人：江苏科技大学
申请日： 2012-11-05 - 公布日： 2013-01-30 - 主分类号： C12N9/42 文献下载
摘要：本发明公开了一种离子液体原位酶解纤维素体系中纤维素酶的回收方法，其特征在于包括如下步骤：构建反胶束体系；利用反胶束体系对含纤维素酶的离子液体溶液中的酶进行回收，然后用盐溶液反向萃取至水相，获得含纤维素酶的离子液体溶液中的纤维素酶本发明方法获得的纤维素酶可继续用于酶解反应，在回收酶的同时，使酶与离子液体分开，有利于离子液体这种高值处理溶剂的回收利用。
一种离子液体原位纤维素体系纤维素酶回收方法

[发明专利]一种用转基因植物联产纤维素酶及其它酶的方法-CN200610112217.7无效
发明人：刘均洪;苏忠亮;李凤梅;石琰景;张媛媛;李俊峰;宿烽;宋益民;王繁业;吴汝林 -专利权人：青岛科技大学
申请日： 2006-08-30 - 公布日： 2008-03-05 - 主分类号： C12N9/24 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用转基因植物联产纤维素酶(包含葡聚糖内切酶、葡聚糖外切酶、β－葡萄糖苷酶)、木质素酶、半纤维素酶的方法。将上述酶的基因通过构建植物超强特异表达载体，使纤维素酶、木质素酶、半纤维素酶同时在转基因植株的茎、叶中大量表达，从而可以从中提取纤维素酶、木质素酶及半纤维素酶。与一般纤维素酶相比，此多酶复合体系的酶解效率大大提高，可用作生产生物乙醇等的高效酶制剂。另外，将收获的转基因植物茎、叶粉碎，使其中的纤维素酶、木质素酶、半纤维素酶释放出来，直接将转基因植物本身茎叶转化为可发酵的糖。也可采用同时转化和发酵的方式，将转基因植物茎叶直接转化成乙醇。如果茎叶用作饲料，利用其中的纤维素酶、木质素酶、半纤维素酶，可以较大幅度提高饲料利用率。
一种转基因植物联产纤维素酶其它方法

[发明专利]羟丙基纤维素溶液的制备方法及纤维素酶活力的测定方法-CN202211424709.5在审
发明人：张永勤;陈相玉;邬雅喃;许文廷;吕兴霜;周慧敏;王裕晓;邢明霞;刘银春;董静文;刘建瑞;刘芳;朱涵 -专利权人：青岛科技大学
申请日： 2022-11-14 - 公布日： 2023-01-31 - 主分类号： G01N21/31 文献下载
摘要：本发明属于酶活力测定技术领域。针对羟丙基纤维素溶液制备困难以及现有的MBTH法在测定纤维素酶活力时，准确性、重复性和稳定性不足的问题，本发明提供一种羟丙基纤维素溶液制备方法，将羟丙基纤维素分散到碱性溶液中，然后将分散液冻结，再解冻，不需要高浓度碱就可以制得羟丙基纤维素溶液。本发明还提供纤维素酶活力的测定方法：配制底物溶液和纤维素酶溶液；绘制葡萄糖吸光度值与葡萄糖浓度的标准对应关系曲线；纤维素酶的酶解反应；测定酶解空白；纤维素酶活力计算。本发明的MBTH法与现有技术的MBTH法相比，标准曲线截距更趋近于零，显色产物更稳定，所测酶活力更能够体现纤维素酶对底物的酶解效率。
丙基纤维素溶液制备方法纤维素酶活力测定

[发明专利]一种木质纤维素高温酶解发酵产乙醇的方法-CN201610192901.4在审
发明人：姚秀清;李炎炎;陆光 -专利权人：辽宁石油化工大学
申请日： 2016-03-30 - 公布日： 2016-06-01 - 主分类号： C12P7/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种木质纤维素高温酶解发酵产乙醇的方法，包括：（1）对木质纤维素原料进行预处理，获得预处理原料；（2）将预处理原料、纤维素酶、水和甘油加入到酶解罐中进行预酶解，控制酶解体系干物质浓度为15wt%-25wt%；（3）酶解后料液打入到发酵罐中，加入耐温酿酒酵母进行同步糖化发酵；（4）发酵液打入到精馏装置分离乙醇。本发明在酶解体系中加入甘油，提高了纤维素酶的耐受高温的能力，在高温条件下酶解纤维素酶的活性高，降低了纤维素酶的使用量，提高了木质纤维素的酶解效率，提高了经济性。
一种木质纤维素高温发酵乙醇方法

[发明专利]一种多功能纤维素酶基因及其应用-CN201810807008.7有效
发明人：江正兵;宋慧婷;李华南;刘艳芳;肖文静;刘子璐 -专利权人：湖北大学
申请日： 2018-07-21 - 公布日： 2021-08-27 - 主分类号： C12N9/42 文献下载
摘要：本发明涉及一种多功能纤维素酶及其应用，其包括内切葡聚糖酶结构域、外切葡聚糖酶结构域和β‑葡萄糖苷酶结构域，所述内切葡聚糖酶结构域、外切葡聚糖酶结构域和β‑葡萄糖苷酶结构域通过柔性接头连接；还涉及上述多功能纤维素酶的基因表达框的表达载体和表达宿主；还涉及使用上述多功能纤维素酶降解木质纤维素的方法。本发明首次构建了具有三种不同纤维素酶(内切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶和β‑葡萄糖苷酶)活性的多功能纤维素酶，该多功能纤维素酶的底物特异性酶活性和总纤维素酶活性都比原始的单酶显著更高。
一种多功能纤维素酶基因及其应用

[发明专利]一种诱导物控制的连续产纤维素酶并联产乙醇的方法-CN202110378492.8有效
发明人：杨何宝;李秋园;代淑梅 -专利权人：中溶科技股份有限公司
申请日： 2021-04-08 - 公布日： 2022-10-11 - 主分类号： C12P7/06 文献下载
摘要：本发明涉及一种诱导物控制的连续产纤维素酶并联产乙醇的方法，包括：S1：酿酒酵母发酵产乙醇，发酵液去除乙醇后的糖液作为产纤维素酶促进剂；S2：将里氏木霉接种到发酵培养基中，进行发酵培养，发酵过程中，向发酵体系中添加产纤维素酶促进剂，发酵获得纤维素酶。与现有技术相比，本发明利用酿酒酵母发酵产乙醇所得发酵液去除乙醇后的糖液作为产纤维素酶促进剂，所述产纤维素酶促进剂不仅能够解除纤维素酶发酵过程中代谢产物阻遏作用，提高纤维素酶活性，同时能够实现纤维素酶和乙醇的联产，从实质上降低纤维素乙醇工艺中纤维素酶成本高的问题。
一种诱导控制连续纤维素酶联产乙醇方法

[发明专利]一株草酸青霉菌XZH-2及其应用-CN202110419980.9有效
发明人：梁翠谊;亓伟;王闻;徐孜晗;王琼;王忠铭 -专利权人：中国科学院广州能源研究所
申请日： 2021-04-19 - 公布日： 2023-06-09 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：本发明提供的草酸青霉菌(Penicillium oxalicum)XZH‑2菌株可分泌大量的纤维素酶和裂解性多糖单加氧酶，其中裂解性多糖单加氧酶，酶活力最高可达到17.17U/g底物，滤纸酶活达7.37IU/g底物，该草酸青霉菌XZH‑2所产的纤维素酶和LPMO酶组合制剂应用于林木纤维素酶解，酶解效率提高13.35％。该纤维素酶和LPMO酶组合制剂是具有协同降解纤维素作用的氧化水解酶，能够通过氧化作用来断裂纤维素的糖苷键，并促进纤维素酶与纤维底物结合以提高酶解效率，从而有效地降低酶解过程的加酶量。可进一步降低纤维素乙醇的生产成本，加快其产业化进程。
草酸青霉 xzh 及其应用

[发明专利]一种提高纤维素酶水解木质纤维素效率的方法-CN201410158678.2有效
发明人：肖林;王新明;夏蕊蕊;覃树林 -专利权人：山东龙力生物科技股份有限公司
申请日： 2014-04-18 - 公布日： 2014-08-13 - 主分类号： C12P19/14 文献下载
摘要：本发明涉及一种提高纤维素酶水解木质纤维素效率的方法，将木质纤维素或经预处理的木质纤维素原料加入水中，调节混合液pH为4～6；向混合液中加入溶菌酶，在温度40℃～60℃搅拌混匀，然后加入纤维素酶进行酶解；或者向上述混合液中加入溶菌酶同时加入纤维素酶在温度40℃～60℃搅拌混匀酶解。溶菌酶作为大分子蛋白质可以改善反应体系传质，有利于酶与底物吸附、解吸，可以有效减少纤维素酶无效吸附木质素，避免微生物消耗酶解产生的葡萄糖，可使纤维素酶水解木质纤维素效率提高15%以上。
一种提高纤维素酶水解木质纤维素效率方法

[发明专利]一种黑曲霉发酵秸秆生产柠檬酸的方法-CN201811196010.1有效
发明人：于有良;刘家印;徐恒德;王学冰 -专利权人：大自然生物集团有限公司
申请日： 2018-10-15 - 公布日： 2022-05-17 - 主分类号： C12P7/48 文献下载
摘要：本发明提供一种黑曲霉发酵秸秆生产柠檬酸的方法，由秸秆原料预处理步骤、发酵纤维素酶浆液的制备步骤、纤维素酶水解混合物生产步骤、秸秆酶解糖液制备步骤、柠檬酸料液发酵步骤、柠檬酸纯化步骤组成。本发明具有以下有益效果：经过机械破碎再进行稀酸处理的纤维素浆液不需要脱毒处理步骤，大大减少了生产柠檬酸的时间成本和生产成本及效率；本方法不需要添加纤维素酶，用发酵纤维素酶浆液替换纤维素酶，发酵纤维素酶浆液包含的纤维素酶50％‑60％，比外购的纤维素酶的成本大大减少。
一种曲霉发酵秸秆生产柠檬酸方法

[发明专利]一锅法酶水解-氧化纤维素制备葡萄糖酸的方法-CN201810554930.X有效
发明人：丁少军;陈凯翔 -专利权人：南京林业大学
申请日： 2018-05-31 - 公布日： 2021-10-29 - 主分类号： C12P7/58 文献下载
摘要：本发明公开了一锅法酶水解‑氧化纤维素制备葡萄糖酸的方法，在含有纤维素原料的酶解体系中，加入里氏木霉纤维素酶，草菇纤维二糖脱氢酶、黑曲霉葡萄糖氧化酶，进行协同酶解反应，一锅法制备出葡萄糖酸。本发明利用纤维二糖脱氢酶氧化纤维素酶解主要产物纤维二糖为新的切入点，可消除葡萄糖氧化酶氧化葡萄糖为葡萄糖酸单一路径的诸多不足，极大地定向强化水解酶系‑氧化酶系相互协同作用，提高木质纤维素酶水解效率和葡萄糖酸得率该方法相比目前纤维素酶/葡萄糖氧化酶法分步水解和氧化技术，采用一锅法技术实现纤维素高效同步酶水解和氧化，具有纤维素酶水解和氧化效率高，工艺和设备简单，成本更低等优点，在利用木质纤维素制备葡萄糖酸中具有良好的应用潜力
一锅水解氧化纤维素制备葡萄糖方法