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[发明专利]诱导人胚胎干细胞定向分化为肝样组织的培养基及诱导方法和应用-CN201810211144.X有效
发明人：徐安龙;吴芬芳;吴迪;任勇;陈尚武 -专利权人：北京平安普德生物技术有限公司
申请日： 2018-03-14 - 公布日： 2022-02-15 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明属于培养干细胞技术领域，公开了一种体外诱导人胚胎干细胞定向分化为肝样组织的专用培养基及诱导方法和应用。所述专用培养基包括依次使用的分化培养基I，分化培养基II，分化培养基III，分化培养基IV和分化培养基Ⅴ。本发明还公开了该分化培养基在体外诱导人胚胎干细胞定向分化为肝样组织的应用及其具体方法，利用所述培养基和方法可培养得到肝样组织，改变了现有单一胚层的诱导分化方案，实现多胚层的分化，进而分化成组织类器官，而非单一细胞本发明制备得到的肝样组织，具有潜在的临床应用价值，可为药物筛选及肝脏发育等领域提供一个理想的研究平台。
诱导胚胎干细胞定向化为组织培养基方法应用

[发明专利]一种诱发水稻抗氯磺隆体细胞突变体的方法-CN200410013211.5无效
发明人：冯双华;肖国樱 -专利权人：中国科学院亚热带农业生态研究所
申请日： 2004-05-26 - 公布日： 2005-02-23 - 主分类号： A01H3/04 文献下载
摘要：它由诱导培养、继代培养、筛选培养、分化培养、再分化培养组成。操作者先将健康成熟种子去壳，再在无菌条件下，将成熟胚置于乙醇中浸泡，用氯化汞溶液浸泡，用无菌水冲洗，将已消毒的成熟胚接种在诱导培养基上加入5－溴尿嘧啶诱变剂黑暗培养；诱导培养的愈伤组织转入继代培养基上黑暗培养；愈伤组织再转入筛选培养基上加入氯磺隆黑暗培养；筛选培养后，将已成活的愈伤组织转入分化培养基上光照培养，再将已分化的愈伤绿块转入再分化培养基上并加入氯磺隆除草剂，在光照下筛选培养。
一种诱发水稻抗氯磺隆体细胞突变体方法

[发明专利]利用农杆菌获得转基因籼稻的方法及其专用培养基-CN201310717649.0有效
发明人：付永彩;侯晶晶;李倩倩;朱颖;谭禄宾;朱作峰;刘凤霞;才宏伟;孙传清 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2013-12-23 - 公布日： 2014-04-09 - 主分类号： C12N15/84 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用农杆菌获得转基因籼稻的方法及其专用培养基。本发明提供了用于制备转基因植物的试剂盒，包括诱导培养基、感染液体培养基、共培养培养基、恢复培养基、筛选培养基、预分化培养基、分化培养基和生根培养基；本发明的实验证明，本发明针对籼稻9311，优化了植物组培的培养基，其中恢复培养基和筛选培养基中添加了有效的抑菌的抗生素，制备转基因水稻，可以得到转化率较高的转基因植物，因此本发明获得了适合籼稻9311的PMI/甘露糖筛选系统的遗传转化系统，可以重复稳定获得籼稻9311
利用杆菌获得转基因籼稻方法及其专用培养基

[发明专利]一种水稻愈伤组织分化培养基及其制备方法和应用-CN201610110781.9有效
发明人：黄培劲;安保光;陈思兰;李亚梅 -专利权人：海南波莲水稻基因科技有限公司
申请日： 2016-02-29 - 公布日： 2017-07-28 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明涉及一种水稻愈伤组织分化培养基及其制备方法和应用，所述水稻愈伤组织分化培养基，是在MS基础培养基或J3基础培养基中添加KT、NAA和山梨醇；其中，所述KT、NAA和山梨醇在所述水稻愈伤组织分化培养基中的浓度分别为本发明通过探索分化激素配比、温度条件以及添加不同碳源，筛选出一种高效的水稻愈伤组织分化培养基，可显著提高水稻愈伤组织分化率。
一种水稻组织分化培养基及其制备方法应用

[发明专利]一种筛选橡胶树增产刺激剂的方法-CN201510305256.8有效
发明人：张家明;谭德冠;彭晶;韩冰莹;付莉莉;孙雪飘 -专利权人：中国热带农业科学院热带生物技术研究所
申请日： 2015-06-05 - 公布日： 2015-08-19 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，公开了一种筛选橡胶树增产刺激剂的方法。本发明所述方法，以橡胶树古铜期芽条的茎段或叶柄为外植体，消毒后将外植体切段分别接种于对照培养基和添加有待检测化学试剂的筛选培养基，24-28℃暗条件下培养60-100d，然后统计对照培养基和筛选培养基愈伤组织中乳管细胞分化频率，以筛选培养基愈伤组织中乳管细胞分化频率显著高于对照培养基愈伤组织中乳管细胞分化频率为判断标准，筛选出可以作为橡胶树增产刺激剂的待检测化学试剂。与现有方法相比，本发明方法重复性好、时间短，不易受环境影响，能大大提高橡胶树增产刺激剂的筛选效率，可用于橡胶树增产刺激剂的规模化筛选。
一种筛选橡胶树增产刺激剂方法

[发明专利]一种节瓜抗枯萎病变异体的离体筛选方法-CN201410594699.9在审
发明人：华生奎;付燕 -专利权人：重庆市涪陵区生奎蔬菜种植场
申请日： 2014-10-21 - 公布日： 2016-11-02 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种节瓜抗枯萎病变异体的离体筛选方法，包括以下步骤：(1)以节瓜种子灭菌后接种于基本培养基中形成无菌苗，切取无菌苗茎尖，转接入不定芽分化培养基使之形成丛生不定芽，此不定芽可以在不定芽分化培养基上反复继代培养，扩大繁殖，建立节瓜无性繁殖系；(2)用镰刀菌酸作为离体胁迫剂与所述节瓜不定芽分化培养基配制筛选培养基，对已建立的节瓜无性繁殖系进行抗性离体筛选，获得具有对镰刀菌酸抗性的无性繁殖系；(3)将具有抗性的无性繁殖系的不定芽切下，在生根培养基上诱导生根，形成再生植株，即为抗性变异体。本发明不仅筛选出的变异体抗性强，而且选择效率高，选择效果好。
一种节瓜抗枯萎病变异体筛选方法

[发明专利]一种节瓜抗枯萎病变异体的离体筛选方法-CN200410052566.5无效
发明人：何晓明;谢大森;彭庆务 -专利权人：广东省农业科学院蔬菜研究所
申请日： 2004-12-07 - 公布日： 2005-07-20 - 主分类号： A01H1/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种节瓜抗枯萎病变异体的离体筛选方法，包括以下步骤：(1)以节瓜种子灭菌后接种于基本培养基中形成无菌苗，切取无菌苗茎尖，转接入不定芽分化培养基使之形成丛生不定芽，此不定芽可以在不定芽分化培养基上反复继代培养，扩大繁殖，建立节瓜无性繁殖系；(2)用镰刀菌酸作为离体胁迫剂与所述节瓜不定芽分化培养基配制筛选培养基，对已建立的节瓜无性繁殖系进行抗性离体筛选，获得具有对镰刀菌酸抗性的无性繁殖系；(3)将具有抗性的无性繁殖系的不定芽切下，在生根培养基上诱导生根，形成再生植株，即为抗性变异体。本发明不仅筛选出的变异体抗性强，而且选择效率高，选择效果好。
一种节瓜抗枯萎病变异体筛选方法

[发明专利]棉花叶柄组织培养与高分化率材料选育方法-CN200610089439.1有效
发明人：张朝军;李付广;喻树讯;范术丽;王玉芬;武芝侠;李凤莲;刘传亮 -专利权人：中国农业科学院棉花研究所
申请日： 2006-06-27 - 公布日： 2006-11-22 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种棉花的组织培养方法及其应用。其目的是提供一种棉花的组织培养方法及其在筛选高分化率棉花株系中的应用。培养方法包括以下步骤：(1)以经灭菌的叶柄为外植体，将其置于愈伤组织诱导培养基上诱导愈伤组织；(2)将愈伤组织置于分化培养基上进行分化培养；(3)将分化出的胚性愈伤组织在胚状体萌发成苗培养基上培养获得再生植株该培养方法以叶柄为外植体，不仅分化率高，而且可用于高分化率棉花株系的筛选，筛选方法简单、周期短，可以进行推广应用。此外，筛选到的高分化率棉花还可以大幅度提高农杆菌介导法的转化效率，缩短转化周期。
棉花叶柄组织培养分化材料选育方法

[发明专利]植物愈伤组织的制备方法-CN201810734303.4在审
发明人：刘佳音;米铁柱;张国栋;王亚菲;邵晓宇;丁锦燕 -专利权人：青岛袁策集团有限公司
申请日： 2018-07-05 - 公布日： 2018-12-18 - 主分类号： C12N15/66 文献下载
摘要：本申请公开了一种植物愈伤组织的制备方法，包括：1)诱导：水稻种子去壳消毒后，将成熟胚接种于诱导培养基中，诱导胚性愈伤组织；2)侵染：将步骤1)所得愈伤组织与胚乳、芽分离，接种于农杆菌悬浮液中侵染，之后晾干待用；3)共培养：将晾干的愈伤组织转到共培养基中，培养至愈伤组织表面出现菌体；4)筛选：将共培养后的愈伤组织清洗后接种到筛选培养基中进行抗性筛选，获得抗性愈伤组织；5)分化：将获得的抗性愈伤组织接种到分化培养基上培养至分化出幼苗；6)生根：将幼苗接种到生根培养基上生根，并进行PCR检测，选择检测为阳性的植株作为转化得到的粳稻植株。
愈伤组织接种抗性愈伤组织晾干植株侵染幼苗制备诱导生根胚乳农杆菌悬浮液胚性愈伤组织愈伤组织表面植物愈伤组织分化分化培养基筛选培养基生根培养基诱导培养基共培养基抗性筛选水稻种子选择检测粳稻成熟胚种植物菌体去壳清洗消毒筛选申请转化

[发明专利]以扬麦16为受体的转基因植株快速再生的培育方法-CN201110271121.6有效
发明人：余桂红;孙晓波;张旭;马鸿翔;周淼平;蒋苏 -专利权人：江苏省农业科学院
申请日： 2011-09-14 - 公布日： 2012-01-18 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明涉及一种以扬麦16为受体的转基因植株快速再生的培育方法，对转基因后的愈伤组织进行恢复培养、分化筛选、幼苗生根培养，其特征在于：在进行基因转化时同时导入bar基因或Hyg基因，在分化筛选培养基中添加与bar基因或Hyg基因对应的筛选试剂，在愈伤组织恢复培养后通过分化筛选培养基对愈伤组织进行一次分化筛选，分化的幼苗转入生根培养基，使整个转基因再生植株的培育缩短至45~60天，将在传统的小麦转基因方法中转基因再生植株获得时间由
16 受体转基因植株快速再生培育方法

[发明专利]多能干细胞体外定向分化为心肌细胞的方法-CN201410490078.6有效
发明人：李天晴;蒋斌;季维智 -专利权人：云南中科灵长类生物医学重点实验室
申请日： 2014-09-23 - 公布日： 2017-07-28 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明提供一种在三维悬浮条件下将多能干细胞体外定向分化为心肌细胞的方法，并提供用于建立三维悬浮条件下体外诱导心肌细胞分化的培养基。所述培养基包括用于将多能干细胞诱导分化为中胚层前体细胞的分化培养基，用于将中胚层前体细胞分化为心肌细胞的分化培养基以及心肌细胞的长期维持培养基。本发明方法简单可靠，价格低廉，稳定高效，安全性高，由于采用了悬浮培养系统，可以工业化生产高品质的心肌细胞，无需任何后续的筛选和纯化步骤，可以直接用于心脏发育科学研究，心脏疾病的细胞治疗，心脏损伤的移植以及药物筛选的应用需求
多能干细胞体外定向化为心肌细胞方法

[发明专利]一种马铃薯转基因方法-CN201810495021.3在审
发明人：杨兴洪;李健;王雅晴 -专利权人：山东农业大学
申请日： 2018-05-22 - 公布日： 2018-10-16 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：包括：将脱毒马铃薯块茎消毒切片后进行农杆菌侵染；农杆菌活化两次，选用第二次活化的菌液在4℃4000rpm离心15min，用液体MS悬浮侵染，用无菌滤纸吸干马铃薯薄片表面菌液；将浸染的马铃薯薄片平铺到共培养培养基上，28℃黑暗共培养2‑3天直至薄片与共培养基接触界面产生一层农杆菌；将附着农杆菌的马铃薯薄片移到芽分化诱导培养基中；马铃薯薄片具有农杆菌的一面背离芽分化诱导培养基；将芽分化诱导培养基上产生的新芽插入含潮霉素的生根筛选培养基中筛选，生根筛选培养基上生根正常的初步鉴定为抗性小苗。
马铃薯薄片诱导培养基农杆菌芽分化马铃薯筛选培养基生根转基因共培养培养基农杆菌活化农杆菌侵染脱毒马铃薯接触界面抗性小苗无菌滤纸遗传性状转化效率培养基块茎表面菌潮霉素液体MS 活化浸染菌液平铺切片侵染吸干新芽附着悬浮消毒育种背离筛选黑暗

[发明专利]一种耐冷红掌的诱导培育方法-CN200910102073.0无效
发明人：田丹青;舒小丽;葛亚英;叶红霞;周志丹;吴殿星 -专利权人：浙江大学
申请日： 2009-08-25 - 公布日： 2010-02-10 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种耐冷红掌的诱导培育方法，包括以下步骤：取主栽红掌品种的嫩芽为外植体，接种至诱导培养基形成愈伤组织，选取诱导形成2周的愈伤组织，转移至共培养基培养4周，挑取新生的愈伤组织，转移至继代培养基培养至快速增殖期，置于温度5℃和光照2000Lux下筛选2周，选取仍存活的愈伤组织移至继代培养基培养4周，移至温度0℃和光照2000Lux下筛选2周，选取仍存活的愈伤组织转移至分化培养基分化成苗；选取分化的小苗转移至生根培养基长成正常幼苗
一种耐冷红掌诱导培育方法

[发明专利]一种适用于不同种源的黑果枸杞的高效快速繁殖方法-CN201710216881.4有效
发明人：陈金焕;刘丽萍 -专利权人：北京林业大学
申请日： 2017-04-05 - 公布日： 2018-11-09 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种适用于不同种源的黑果枸杞的高效快速繁殖方法，属于植物组织培养技术领域，其步骤如下：(1)无菌苗制备：收集不同种源的黑果枸杞种子，消毒处理后，接种于MS培养基上，长出的小苗待用；(2)嫩茎段诱导不定芽分化培养基的筛选：利用茎段诱导丛生芽中激素种类及梯度设置，进行嫩茎段诱导不定芽的分化培养，筛选培养基条件；(3)生根培养基的筛选：利用步骤(2)得到的嫩芽进行诱导生根，筛选培养基条件。
一种适用于同种枸杞高效快速繁殖方法

[发明专利]一种提高结缕草抗寒性的方法-CN200610012119.6有效
发明人：李瑞芬;孙振元;魏建华;王宏芝;贺杰 -专利权人：北京农业生物技术研究中心;中国林业科学研究院林业研究所
申请日： 2006-06-06 - 公布日： 2006-12-13 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：CBF1/DREB1b转化结缕草胚性愈伤组织，结缕草的抗寒性得到提高，可包括以下步骤：1)将结缕草胚性愈伤组织用携带有CBF1/DREB1b的农杆菌菌液进行侵染；2)将经侵染的结缕草胚性愈伤组织置于共培养基上进行共培养；3)将共培养后的胚性愈伤组织置于筛选培养基上进行筛选；4)将筛选出的胚性愈伤组织置于分化培养基上进行分化培养；5)将分化出芽的小苗置于生根培养基上进行生根培养；6)将生出根系的植株置于壮苗筛选培养基上筛选出抗寒性提高的结缕草壮苗
一种提高结缕草抗寒性方法

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