本发明涉及用于检测肠球菌耐药性的组合物和方法,其特征在于利用一对或多对特异性引物和多重PCR方法对肠球菌耐药性进行检测,其中组合物包含以下寡核苷酸引物对:肠球菌16s RNA特异性引物对:SEQ ID No.1和SEQ ID No.2;以及以下耐药基因特异性引物对中的一对或多对:aac-aph特异性引物对:SEQ ID No.3和SEQ ID No.4,tetM特异性引物对:SEQ ID No.5和SEQ ID No.6,ermB特异性引物对:SEQ ID No.7和SEQ ID No.8,TEM特异性引物对:SEQ ID No.9和SEQ ID No.10以及aad特异性引物对:SEQ ID No.11使用本发明,能够简便、快速、灵敏度高且特异性强地测定食品中肠球菌的耐药性。
本发明公开一种动物华支睾吸虫病特异性检测引物、检测方法和检测试剂盒,该特异性引物其上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明用上述特异性检测引物对待测模板DNA进行PCR扩增,扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,紫外光下观察,阳性结果会出现特异性扩增条带,阴性结果则不会出现。本发明根据动物华支睾吸虫病的ITS区序列数据库设计特异性检测引物,建立了用于动物华支睾吸虫病诊断的快速、特异、敏感的PCR方法,可准确地鉴定动物华支睾吸虫病。本发明的试剂盒操作简单程序化,方法特异性强,敏感性高,结果判定客观,可用于动物华支睾吸虫病的诊断和流行病学调查。
本发明涉及一种戈氏梭菌特异性PCR检测引物及方法。戈氏梭菌特异性PCR检测引物,该引物为一对,正向引物核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,反向引物核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。Novyi、Clostridium beijerinckii、Clostridium sporogenes等亲缘关系接近的其他梭菌属厌氧菌硫氧还蛋白基因序列高度保守的规律,并根据该发现设计出戈氏梭菌特异性PCR检测引物,解决了PCR技术进行戈氏梭菌体内分布和临床检测的技术难题。
本发明公开了一种类肠道病原菌感染诊断用基因芯片鼠伤寒沙门菌特异性基因探针,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。通过确定候选序列后,设计特异性引物,选用标准和临床分离的野生菌株进行PCR调查和相应的序列分析验证。根据验证的病原菌特异性探针序列,设计合成引物并经PCR扩增相应的特异性核苷酸片段,每个长约200核苷酸,再通过重叠延伸PCR将某种病原菌的3至5个特异性片段扩增链接,以此作为各种病原菌特异性的探针。本发明将多个基因的高度特异区域串联制成的探针,不但有较高的特异性,而且由于可同时与多个特异片段杂交使检测的灵敏度大为提高。