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[发明专利]采用亲和层析纯化减少抗体聚集的方法-CN202110373715.1在审
发明人：徐晓渊;张赶;梁泊宁;周佳豪;王贵卫;蔡子健;杨晓明;叶峰 -专利权人：杭州奕安济世生物药业有限公司
申请日： 2021-04-07 - 公布日： 2021-06-04 - 主分类号： C07K16/00 文献下载
摘要：采用亲和层析纯化减少抗体聚集的方法，包括如下步骤：采用洗脱缓冲液洗脱亲和层析捕获的目标蛋白；洗脱缓冲液选自pH3.4～3.8的NaAc‑HAc缓冲液、甘氨酸缓冲液、柠檬酸缓冲液和精氨酸缓冲液中的至少一种；NaAc‑HAc缓冲液的浓度为45～100mM，甘氨酸缓冲液的浓度为0.01～1.0M，柠檬酸缓冲液的浓度为20～100mM，精氨酸缓冲液的浓度为0.01～1.0M。本发明提供多种适于亲和层析过程的洗脱缓冲液，可保护目标蛋白，减少亲和层析洗脱后低pH灭活时抗体的聚集，极大的提高目标蛋白的纯度，稳定目标蛋白。
采用亲和层析纯化减少抗体聚集方法

[发明专利]一种纯化肠激酶的方法-CN201410839183.6在审
发明人：文良柱;朱亮;赵梅 -专利权人：江苏万邦生化医药股份有限公司;上海复星医药（集团）股份有限公司
申请日： 2014-12-30 - 公布日： 2016-07-27 - 主分类号： C12N9/64 文献下载
摘要：针对目前肠激酶纯化领域所存在的问题，提供了一种纯化肠激酶的方法，所述纯化方法是将肠激酶分离液在pH8.5的UniPS30-300层析柱中通过等体积混合的洗脱缓冲液A与洗脱缓冲液B洗脱得到，所述洗脱缓冲液A是由10%乙醇与5mmol T-ris-HCl缓冲液形成的pH为8.5的缓冲液，洗脱缓冲液B是由50%乙醇与5mmol T-ris-HCl缓冲液形成的pH为8.5的缓冲液。采用本发明所公开的技术方案后，仅需要一次纯化洗脱就可以得到电泳纯的肠激酶样品，避免了多次反复洗脱所带来的产品流失以及成本损耗。
一种纯化肠激酶方法

[发明专利]电离对照-CN202080053952.3在审
发明人：斯蒂芬·哈丁;格雷格·沃利斯;杰米·阿什比;尼亚·马洛特;西蒙·诺斯 -专利权人：结合点集团有限公司
申请日： 2020-07-23 - 公布日： 2022-04-12 - 主分类号： C07K1/22 文献下载
摘要：用于从一种或多种分析物特异性抗体或其片段洗脱一种或多种预定分析物或者用于从靶抗原洗脱一种或多种预定抗体或片段的洗脱缓冲液，其中所述洗脱缓冲液的pH为1‑5；并且所述洗脱缓冲液包含预定量的酸稳定的质谱电离对照蛋白还描述了在分析物的检测和定量(例如通过质谱法)中洗脱缓冲液的使用。
电离对照

[发明专利]一种消除层析中洗脱肩峰的方法-CN201811143914.8在审
发明人：陈广勇;周茂志;王丹凤;孙李靖;罗明江;林世文;周伟昌;陈智胜 -专利权人：上海药明生物技术有限公司
申请日： 2018-09-29 - 公布日： 2019-02-01 - 主分类号： C07K1/18 文献下载
摘要：本发明提供一种消除层析中洗脱肩峰的方法，是使用离子交换填料以结合洗脱的方式进行蛋白纯化，同时消除目的蛋白洗脱时UV检测出现的肩峰。其中，离子交换填料为Capto S ImpAct，该方法包括以下步骤：a)平衡：上样前用平衡缓冲液对离子交换填料进行平衡；b)上样：将蛋白样品加载至离子交换填料上，目的蛋白与离子交换填料结合；c)淋洗：用淋洗缓冲液淋洗离子交换填料；d)洗脱：用洗脱缓冲液将目的蛋白从填料上洗脱下来。本发明的方法通过利用差异化平衡缓冲液/淋洗缓冲液和洗脱缓冲液的pH值的方法达到了消除纯化蛋白过程中洗脱肩峰的效果。
离子交换填料洗脱肩峰淋洗目的蛋白平衡缓冲液洗脱缓冲液缓冲液消除层上样纯化蛋白蛋白纯化蛋白样品差异化加载平衡检测

[发明专利]一种乙型脑炎疫苗的纯化方法-CN201010264217.5有效
发明人：刘钿莲;沈名锋;艾文 -专利权人：丽珠集团疫苗工程股份有限公司
申请日： 2010-08-27 - 公布日： 2012-01-25 - 主分类号： A61K39/12 文献下载
摘要：本发明提供一种乙型脑炎疫苗的纯化方法，该纯化方法包括以下步骤：将灭活的乙型脑炎病毒浓缩液经聚丙烯葡聚糖分子筛柱层析，洗脱溶剂为pH为7.5～8.5的磷酸缓冲液，紫外检测器波长280nm处检测；收集第一洗脱峰，以带有季胺阳离子的醋酸纤维素膜进行离子交换层析膜层析，采用线性洗脱且洗脱溶剂由体积比为缓冲液A∶缓冲液B＝0～100％匀速变化至缓冲液A∶缓冲液B＝100％～0，其中缓冲液A为pH为7.5～8.5的磷酸缓冲液，缓冲液B为包含500mM/L氯化钠的pH 7.5～8.0的磷酸缓冲液，洗脱速度为200～600厘米/小时；收集NaCl浓度为70～250mM之间的洗脱液。
一种脑炎疫苗纯化方法

[发明专利]一种使用pH梯度进行阳离子层析的抗体纯化方法-CN202310634130.X在审
发明人：夏松;高宏海;倪天琪 -专利权人：鼎康（武汉）生物医药有限公司
申请日： 2023-05-31 - 公布日： 2023-09-15 - 主分类号： C07K16/46 文献下载
摘要：本发明公开了一种使用pH梯度进行阳离子层析洗脱的方法，所述方法包括以下步骤：上样、平衡、洗涤和洗脱；其中，所述洗脱使用缓冲液A和缓冲液B的溶剂体系进行梯度洗脱，梯度洗脱从0％‑100％缓冲液B，收集产品；所述的缓冲液A为10～20mM柠檬酸，pH为4.5～5.5，所述的缓冲液B为10～20mM十二水合磷酸氢二钠，pH为7.5～8.5。
一种使用 ph 梯度进行阳离子层析抗体纯化方法

[发明专利]一种重组人铁蛋白分离纯化方法-CN201811622011.8在审
发明人：崔晴晴;张洪;时鑫;倪春杰 -专利权人：平湖优谱生物技术有限公司
申请日： 2018-12-28 - 公布日： 2019-03-22 - 主分类号： C07K14/47 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组人铁蛋白分离纯化方法，包括以下步骤：发酵后的大肠杆菌菌液离心后获得菌泥，菌泥溶解于缓冲液后进行加热、离心或过滤处理，得滤液；利用阴离子层析对步骤1)得到的滤液进行分离，收集含目的蛋白的洗脱缓冲液；利用阳离子层析对步骤2)得到含目的蛋白的洗脱缓冲液进行二次分离，收集含目的蛋白的洗脱缓冲液；利用疏水层析对步骤3)得到的含目的铁蛋白的洗脱缓冲液进行三次分离，收集含目的蛋白的洗脱缓冲液。
洗脱缓冲液目的蛋白重组人铁蛋白分离纯化菌泥大肠杆菌菌液二次分离过滤处理三次分离疏水层析阳离子层阴离子层缓冲液铁蛋白回收率加热发酵溶解

[发明专利]一种蛋白质亲和纯化方法-CN202111502380.5在审
发明人：林森珠;杨富豪;费丽;林世文 -专利权人：上海药明生物技术有限公司
申请日： 2021-12-09 - 公布日： 2022-01-28 - 主分类号： C07K1/22 文献下载
摘要：具体而言，本公开提供了包括如下步骤的蛋白质亲和纯化方法：(a)用洗脱前处理缓冲液淋洗上样后的亲和层析柱；以及(b)用洗脱缓冲液洗脱目标蛋白；其中，所述洗脱前处理缓冲液的缓冲能力高于所述洗脱缓冲液的缓冲能力采用本公开的方法和产品可提高洗脱产品的pH环境，有效提高下游工艺的稳健性且易于放大，从而可广泛应用于蛋白质(例如抗体类)药物的纯化。
一种蛋白质亲和纯化方法

[发明专利]糖化血红蛋白检测试剂盒及其应用-CN202110540480.0在审
发明人：郑剑通;罗旭璇;蔡晓霞 -专利权人：深圳市帝迈生物技术有限公司
申请日： 2021-05-18 - 公布日： 2022-11-22 - 主分类号： G01N30/02 文献下载
摘要：本申请涉及生物技术领域，具体公开了一种糖化血红蛋白检测试剂盒及其应用，该糖化血红蛋白检测试剂盒，包括：第一洗脱液，包括：磷酸盐缓冲液、柠檬酸‑柠檬酸钠缓冲液；第二洗脱液，包括：磷酸盐缓冲液、柠檬酸‑柠檬酸钠缓冲液、氯化钠、氯化钾；第三洗脱液，包括：磷酸盐缓冲液、柠檬酸‑柠檬酸钠缓冲液、氯化钠、氯化钾；溶血剂，包括：磷酸盐缓冲液、氯化钠、表面活性剂。
糖化血红蛋白检测试剂盒及其应用

[发明专利]一种重组肠激酶的纯化方法-CN201611215132.1在审
发明人：文良柱;张媛 -专利权人：江苏万邦生化医药集团有限责任公司;上海复星医药（集团）股份有限公司
申请日： 2016-12-26 - 公布日： 2018-07-03 - 主分类号： C12N9/64 文献下载
摘要：本发明提供一种重组肠激酶的纯化方法，所述方法采用芳香族疏水层析填料，通过洗脱液洗脱得到纯品；所述洗脱液由洗脱缓冲液A与洗脱缓冲液B等体积混合形成，所述洗脱缓冲液A的配比为：20mmol Tris‑HCl、1mol/L NH4Cl，pH为7.0‑8.0；所述洗脱缓冲液B的配比为20mmolTris‑HCl，pH为7.0‑8.0。本发明提供的重组肠激酶的纯化方法，仅需要一次纯化洗脱就可以得到电泳纯的肠激酶样品，避免了多次反复纯化所带来的产品流失以及成本损耗，在得到纯品的同时收率得到大幅度的提高。
洗脱缓冲液重组肠激酶配比为洗脱液洗脱疏水层析体积混合肠激酶电泳纯芳香族收率

[发明专利]腺相关病毒分离方法-CN202110695454.5在审
发明人： A·赫莫夫斯基 -专利权人：帕尔公司
申请日： 2021-06-23 - 公布日： 2022-02-18 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：提供了一种从完整腺相关病毒(AAV)衣壳和空AAV衣壳的混合物中富集完整AAV衣壳的方法，所述方法包括提供包含完整AAV衣壳和空AAV衣壳的混合物的样品，使所述样品经受包含洗脱缓冲液的阴离子交换色谱，所述洗脱缓冲液包含提供初始电导率的初始比例的平衡缓冲液和含盐缓冲液，和改变所述平衡缓冲液和所述含盐缓冲液的比例，以提供每个阶梯约0.5‑2.0mS/cm的阶梯梯度电导率增加，以洗脱空AAV衣壳并提供富含完整AAV衣壳的流体。
相关病毒分离方法

[发明专利]用于质谱分析的预分离-CN202180041333.7在审
发明人：塞巴斯蒂安·H·约翰逊;尼尔斯·A·库拉克 -专利权人：普雷奥米克斯有限责任公司
申请日： 2021-03-12 - 公布日： 2023-04-04 - 主分类号： G01N30/34 文献下载
摘要：本发明涉及一种分离多种与基质结合的分析物的方法，所述方法包括：(a)用多种洗脱液洗脱所述分析物，其中第一洗脱步骤采用包含第一编号洗脱液的洗脱缓冲液，随后第n次洗脱步骤用包含第n编号洗脱液的洗脱缓冲液，其中所述第(n)编号洗脱液比第一编号洗脱液具有更低的偶极矩和/或更高的疏水性。
用于谱分析分离

[发明专利]一种从蛇毒粉中提取降纤酶的方法-CN202310480680.0在审
发明人：刘达;刘杨;刘选;李多娇;杨世平;蔡小涛;李波;向岳辉;刘坤;康璐;刘雄杰;陈达;张静;刘娟 -专利权人：康普药业股份有限公司
申请日： 2023-04-28 - 公布日： 2023-07-28 - 主分类号： C12N9/64 文献下载
摘要：本发明涉及一种从蛇毒粉中提取降纤酶的方法，包括如下步骤：1)蛇毒粉用缓冲液溶解，去沉淀，得清液；2)离子交换层析：用Tris‑HCl缓冲液和含NaCl的Tris‑HCl缓冲液进行梯度洗脱，收集酶活性部分，超滤浓缩，得浓缩液；3)亲和层析：用含不同浓度的NaCl的NaAc缓冲液进行梯度洗脱，收集酶活性部分，超滤浓缩，得浓缩液；4)凝胶过滤层析：用含不同浓度NaCl的Tris‑HCl缓冲液进行梯度洗脱，收集酶活性部分
一种蛇毒提取降纤酶方法

[发明专利]用于纯化人纤维蛋白原的离子交换层析用缓冲液及填料-CN202111028702.7有效
发明人：鲁涛;牟蕾;李伟;余伟;王黔川 -专利权人：成都蓉生药业有限责任公司
申请日： 2021-09-02 - 公布日： 2023-04-07 - 主分类号： C07K14/75 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于纯化人纤维蛋白原的离子交换层用缓冲液及填料，该离子交换层析用缓冲液包括平衡缓冲液，洗涤缓冲液和洗脱缓冲液。本发明属于血浆制品制备工艺领域。实验结果表明，利用本发明由平衡缓冲液，洗涤缓冲液和洗脱缓冲液组成的缓冲液，配合离子交换层析用填料对人纤维蛋白原进行纯化，能够明显提高所得产品中人纤维蛋白原含量和纯度，还能明显降低产品中的病毒灭活剂残留。本发明提供的离子交换层用缓冲液及填料在纯化人纤维蛋白原中具有良好的应用前景。
用于纯化纤维蛋白原离子交换层析缓冲液填料

[发明专利]一种蛋白质预分离方法-CN201610296505.6在审
发明人：田志新;刘琰 -专利权人：同济大学
申请日： 2016-05-06 - 公布日： 2016-08-24 - 主分类号： G01N1/34 文献下载
摘要：本发明涉及一种蛋白质预分离方法，用尺寸排阻色谱填料、反向色谱填料或离子交换色谱填料作为固定相填料，将固定相填料与蛋白质混合物混合后，先加入一个强度的洗脱缓冲液，充分混合并离心处理，收集洗脱缓冲液，再将固定相填料依次用不同强度的洗脱缓冲液洗脱，分别离心处理并收集洗脱缓冲液，基于蛋白质混合物中不同性质的蛋白质被分别收集到不同强度的洗脱缓冲液中，实现蛋白质混合物的预分离。
一种蛋白质分离方法

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