本发明公开了氨基酸脱氢酶突变体及其应用。该氨基酸脱氢酶突变体的氨基酸序列是由SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列发生突变得到的氨基酸序列，突变至少包括如下突变位点之一：第64位、第94位、第133位、第137位、第148位、第168位、第173位、第183位、第191位、第207位、第229位、第248位、第255位和第282位；或者氨基酸脱氢酶突变体的氨基酸序列具有发生突变的氨基酸序列中的突变位点，且与发生突变的氨基酸序列具有80％以上同源性的氨基酸序列本发明的氨基酸脱氢酶突变体具有酶活性大幅度提高的优势，其酶活相对于野生型氨基酸脱氢酶提高了大于50倍，并且酶特异性也有相应提高。
本发明公开了一种氨基酸脱氢酶突变体及其应用。其中，该氨基酸脱氢酶突变体具有SEQ ID NO:1所示序列发生氨基酸突变的序列，发生氨基酸突变的位点包括K144G位点。本发明的上述氨基酸脱氢酶突变体是在SEQ ID NO：1所示的氨基酸脱氢酶基础上，通过定点突变的方法进行突变，从而改变其氨基酸序列，实现蛋白质结构和功能的改变，再通过定向筛选的方法，得到具有上述突变位点的氨基酸脱氢酶，本发明的氨基酸脱氢酶突变体具有酶活性大幅度提高的优势，进而降低氨基酸脱氢酶的使用量，并且酶特异性也有相应提高，从而大幅度降低了氨基酸工业生产中的成本。
本发明提供了一种突变的CD19胞外结构域，所述突变的CD19胞外结构域与亲本CD19胞外结构域的氨基酸序列相比，在对应于SEQ ID No.1所示氨基酸序列的以下任一或任意几个氨基酸位点处存在突变：第82位、第83位、第29位、第184位或第234位；所述第82位氨基酸突变为V，所述第83位氨基酸突变为L，所述第29位氨基酸突变为G，所述第184位氨基酸突变为P，所述第234位氨基酸突变为W。
本发明公开了一种D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶的突变体及其应用。该D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶突变体的氨基酸序列是SEQ ID NO：1所编码的氨基酸序列发生突变的氨基酸序列，所述发生突变的氨基酸的突变位点为第39位的I突变为A，可选的突变位点还包括如下任意一个：第158位的Q突变为S，第186位的L突变为V；或者所述D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶突变体的氨基酸序列具有所述发生突变的氨基酸序列中的突变位点，且与所述发生突变的氨基酸序列具有90%以上同源性的氨基酸序列具有上述突变位点的D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构催化生产D‑阿洛酮糖的效率大幅度提高。
本发明涉及一种转氨酶突变体、酶制剂、重组载体、重组细胞及其制备方法和应用。该转氨酶突变体的氨基酸序列由野生型转氨酶的氨基酸序列发生突变得到，野生型转氨酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，发生突变的氨基酸位点包括第226位氨基酸位点、第281位氨基酸位点、第312位氨基酸位点及第406位氨基酸位点中的至少一个。上述转氨酶突变体的酶活较高。
本发明公开了一种醇脱氢酶突变体及其应用。该脱氢酶突变体的氨基酸序列是SEQ ID NO：9所示氨基酸序列发生突变的氨基酸序列，发生突变的氨基酸序列具有如下至少1个突变位点：第40位、第87位、第194位和第331位，且第40位的T突变为S、A或C；第87位的W突变为F、Y或H；第194位的V突变为I、L或E；第331位的R突变为A、K或M；或者，醇脱氢酶突变体的氨基酸序列具有发生突变的氨基酸序列中的突变位点，且与发生突变的氨基酸序列具有90％以上同源性的氨基酸序列。具有上述至少一个突变位点或者保留上述突变位点且与其具有90％以上氨基酸序列同源性的醇脱氢酶突变体，其立体选择性和酶活性大大提高。
本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种氨基酸脱氢酶突变体及其制备方法和应用，所述氨基酸脱氢酶突变体具有(I)、(II)所示的氨基酸序列中任意一个：(I)与SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列具有至少85％同一性的氨基酸序列；(II)与SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的41至301位氨基酸经修饰、取代、缺失或添加一个或几个氨基酸获得的氨基酸序列；所述取代为取代1‑15个氨基酸；其中，所述突变体具有氨基酸脱氢酶的活性本发明中通过设计41至301位氨基酸的多个不同位点的突变，发现这些突变体提高了氨基酸脱氢酶的催化活性，还可以降低氨基酸脱氢酶的使用量。
本发明涉及一种转氨酶突变体，所述转氨酶突变体的氨基酸序列是SEQ ID NO：1所示氨基酸序列发生突变的氨基酸序列；其中，所述发生突变的氨基酸序列具有以下至少1个突变位点：第45位、第75位、第108位、第159位、第234位、第272位；且第45位P突变为V或G，第75位L突变为K，第108位G突变为E或D，第159位T突变为Y、H或P，第234位L突变为C，第272位C突变为R或K；所述转氨酶突变体的氨基酸序列具有发生突变的氨基酸序列中的突变位点，且与发生突变的氨基酸序列具有90％以上同源性。所述转氨酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示时，该酶突变体的热稳定性较高，且对式(a)所示底物具有较高的催化活性。
本发明公开了一种双羰基还原酶突变体及其应用。该双羰基还原酶突变体的氨基酸序列是SEQ ID NO：9所编码的氨基酸序列发生突变的氨基酸序列，发生突变的氨基酸序列具有如下至少两个突变位点：第94位、第151位、第231位、第236位和第251位，且第94位的I突变为V、A或G；第151位的V突变为Q、N或S；第231位的F突变为W、Y或P；第236位的I突变为L、V或A；第251位的Q突变为H、R或K；或者双羰基还原酶突变体的氨基酸序列具有发生突变的氨基酸序列中的突变位点，且与发生突变的氨基酸序列具有90％以上同源性的氨基酸序列。具有上述突变位点的双羰基还原酶突变体酶活性大幅度提高。
