本发明公开了一种柔嫩艾美耳球虫棒状体蛋白41及其制备方法和应用。该蛋白是新发现的、柔嫩艾美耳球虫子孢子阶段高表达的蛋白,是与子孢子入侵宿主细胞相关蛋白,该蛋白的氨基酸序列包含编码SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。将EtROP41基因与大肠杆菌表达载体相连获重组表达载体,在大肠杆菌中表达重组EtROP41蛋白,将重组蛋白纯化并与佐剂混合,制得鸡柔嫩艾美耳球虫ROP41重组蛋白疫苗,该疫苗免疫雏鸡后能有效抵抗柔嫩艾美耳球虫感染,提高雏鸡存活率、增高雏鸡的相对增重率、减少球虫卵囊排出量,是一种新的具有良好免疫保护效果的重组蛋白疫苗,具有作为预防鸡柔嫩艾美耳球虫病疫苗研发的潜力。
本发明公开了一种柔嫩艾美耳球虫基因,该基因为Et STK基因,包含SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。同时提供一种防治鸡球虫病的疫苗的制备方法:将柔嫩艾美耳球虫保守蛋白Et STK的成熟肽与大肠杆菌或毕赤酵母细胞的表达载体相连获重组表达载体,再将重组表达载体转入大肠杆菌或毕赤酵母细胞宿主获得重组菌株,培养该重组菌株,即得防治鸡球虫病的疫苗,具有很高的应用价值。
本发明公开了一种柔嫩艾美耳球虫基因,该基因为Et CHP317基因,包含SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。同时提供一种防治鸡球虫病的疫苗的制备方法:将柔嫩艾美耳球虫保守蛋白Et CHP317的成熟肽与大肠杆菌或毕赤酵母细胞的表达载体相连获重组表达载体,再将重组表达载体转入大肠杆菌或毕赤酵母细胞宿主获得重组菌株,培养该重组菌株,即得防治鸡球虫病的疫苗,具有很高的应用价值。
本发明公开了一种柔嫩艾美耳球虫微线体蛋白2相关蛋白及其制备方法和应用。该蛋白是新发现的、柔嫩艾美耳球虫各发育阶段均高表达的蛋白。该蛋白氨基酸序列包含编码SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。将EtM2AP基因插入大肠杆菌表达载体pET28a获重组表达载体,转入大肠杆菌中表达鸡柔嫩艾美耳球虫重组蛋白(EtM2AP),将该重组蛋白纯化并与佐剂混合,制得EtM2AP重组蛋白疫苗,该疫苗能有效提高雏鸡存活率和相对增重率,并能够减少免疫后雏鸡的球虫卵囊排出量,具有良好免疫保护效果的重组蛋白疫苗,有作为预防鸡柔嫩艾美耳球虫病疫苗的潜力。
本发明公开了一种柔嫩艾美耳球虫重组多肽疫苗VKVQ的制备方法,制备方法包括:步骤一,VKVQ编码基因的克隆,根据鸡球虫基因序列设计上游引物SEQ ID NO:3和下游引物SEQ ID NO:4,进行PCR该方法制备的疫苗通过免疫柔嫩艾美耳球虫重组多肽疫苗VKVQ真核表达质粒和原核表达蛋白,能有效控制鸡体感染柔嫩艾美耳球虫,大大降低养鸡场抗球虫药的使用量,有效控制鸡球虫病。