本发明公开了一种柔嫩艾美耳球虫棒状体蛋白41及其制备方法和应用。该蛋白是新发现的、柔嫩艾美耳球虫子孢子阶段高表达的蛋白，是与子孢子入侵宿主细胞相关蛋白，该蛋白的氨基酸序列包含编码SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。将EtROP41基因与大肠杆菌表达载体相连获重组表达载体，在大肠杆菌中表达重组EtROP41蛋白，将重组蛋白纯化并与佐剂混合，制得鸡柔嫩艾美耳球虫ROP41重组蛋白疫苗，该疫苗免疫雏鸡后能有效抵抗柔嫩艾美耳球虫感染，提高雏鸡存活率、增高雏鸡的相对增重率、减少球虫卵囊排出量，是一种新的具有良好免疫保护效果的重组蛋白疫苗，具有作为预防鸡柔嫩艾美耳球虫病疫苗研发的潜力。
本发明公开了一种柔嫩艾美耳球虫微线体蛋白2相关蛋白及其制备方法和应用。该蛋白是新发现的、柔嫩艾美耳球虫各发育阶段均高表达的蛋白。该蛋白氨基酸序列包含编码SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。将EtM2AP基因插入大肠杆菌表达载体pET28a获重组表达载体，转入大肠杆菌中表达鸡柔嫩艾美耳球虫重组蛋白(EtM2AP)，将该重组蛋白纯化并与佐剂混合，制得EtM2AP重组蛋白疫苗，该疫苗能有效提高雏鸡存活率和相对增重率，并能够减少免疫后雏鸡的球虫卵囊排出量，具有良好免疫保护效果的重组蛋白疫苗，有作为预防鸡柔嫩艾美耳球虫病疫苗的潜力。
本发明公开了一种grx 5基因缺失的新孢子虫弱毒虫株及其构建方法和应用。该虫株缺失了新孢子虫谷氧还蛋白5(grx5)基因，其中缺失的grx5基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。由于缺失了grx5基因，因此，该虫株具有繁殖能力和毒力显著下降的特点，接种小鼠后能够有效预防动物的新孢子虫的再感染，具有成为新孢子虫病弱毒疫苗的潜力。
本发明公开了一种PUF1基因缺失的新孢子虫弱毒虫株及其构建方法和应用。该虫株缺失了PUF1基因，其中缺失的PUF1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，新孢子虫基因敲除虫株在PUF1基因位点后具有如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。由于缺失了PUF1基因，因此，该虫株具有繁殖能力和毒力显著下降的特点，接种小鼠后能够有效预防动物的新孢子虫的再感染，具有成为新孢子虫病弱毒疫苗的潜力。
