本发明提供了一种锚定巢式多重PCR联合高通量测序检测基因融合的多重PCR引物,包括多重PCR特异性引物组1和多重PCR特异性引物组2,所述多重PCR特异性引物组1为SEQ ID NO:1~SEQ IDNO:32所示的核苷酸序列组成的引物组,所述多重PCR特异性引物组2为SEQ ID NO:33~SEQ ID NO:64所示的核苷酸序列组成的引物组。本发明还提供了一种锚定巢式多重PCR联合高通量测序检测基因融合的多重PCR引物和方法,本发明检测方法通用性更高,本发明检测方法能够在仅部分知晓或未知晓融合基因结构的情况下,准确灵敏地检测融合基因。
本发明公开了一种遗传性结直肠癌易感基因检测用的多重PCR引物系统、检测方法和应用。该遗传性结直肠癌易感基因检测用的多重PCR引物系统,包括第一多重PCR引物组合和/或第二多重PCR引物组合;其中,第一多重PCR引物组合含有112对PCR引物对,且该112对PCR引物对的序列分别如SEQID NO:1~SEQ ID NO:224所示;第一多重PCR引物组合含有113对PCR引物对,且该113对PCR引物对的序列分别如SEQ ID NO:225~SEQ ID NO:450所示。本发明的多重PCR引物系统能同时检测结直肠癌相关的11个易感基因,各引物之间相互干扰性小,特异性强,扩增效果好,可提高检测效率,降低检测成本,并且可配合高通量测序技术,进行高通量测序,对结直肠癌易感人群
本发明公开了一种用于T细胞白血病微小残留病检测的方法,包括多重PCR引物,所述多重PCR引物包括上游引物和下游引物,所述上游引物为SEQ ID N081~SEQ ID N0112序列组成的上游引物组;所述下游引物为SEQ ID N0114核苷酸序列组成的;检测方法包括以下步骤S1,提取人外周血单个核细胞获得总RNA;S2,将获得的RNA采用一步RT‑PCR的方法,进行多重PCR反应,获得多重PCR产物;S3,多重PCR反应结束后,磁珠纯化PCR产物,除去多余的引物;S4,在纯化后的多重PCR产物的3’末端添加碱基A,获得具有3’粘性末端A的PCR产物;S5,将具有3’粘性末端A的PCR产物与接头序列相连,获得含接头的连接产物
本发明提供了一种扩增BRCA1/2基因的多重PCR引物及一种多重PCR引物的设计方法,所述多重PCR引物包括SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:234所示的核苷酸序列。本发明还提供了一种多重PCR引物的设计方法。本发明提供的多重PCR引物可以快速的完成BRCA1/2目标序列的富集,进而进行NGS文库构建和测序,实现高度自动化、高通量的遗传性乳腺癌BRCA1/2基因检测。
本发明公开了一种用于鉴定云豹的多重PCR引物,其中,所述多重PCR引物包括如SEQ ID No:1和SEQ ID No:2所示的引物对1,以及如SEQ ID No:3和SEQ ID No:4所示的引物对本发明还公开了一种利用多重PCR鉴定云豹的方法,该方法包括:提取待测样品的总DNA并对总DNA进行PCR扩增;将扩增后的产物做琼脂糖凝胶电泳检测;其中,所述多重PCR引物为上述多重PCR引物,若泳道中出现本发明还公开了一种上述多重PCR引物或鉴定方法在鉴定云豹中的应用。通过设计上述两对引物,实现了简便易行且经济实用地鉴定云豹的目的。
本发明公开了一种用于鉴定金钱豹的多重PCR引物,其中,所述多重PCR引物包括如SEQ ID No:1和SEQ ID No:2所示的引物对1,以及如SEQ ID No:3和SEQ ID No:4所示的引物对本发明还公开了一种利用多重PCR鉴定金钱豹的方法,该方法包括:提取待测样品的总DNA并对总DNA进行PCR扩增;将扩增后的产物做琼脂糖凝胶电泳检测;其中,所述多重PCR引物为上述多重PCR引物,若泳道中出现本发明还公开了一种上述多重PCR引物或鉴定方法在鉴定金钱豹中的应用。通过设计上述两对引物,实现了简便易行且经济实用地鉴定金钱豹的目的。
本发明公开了一种肺癌血浆游离DNA甲基化检测用的多重PCR引物系统、检测方法及应用。该肺癌血浆游离DNA甲基化检测用的多重PCR系统包括第一轮多重PCR引物组和/或第二轮多重PCR引物,其中,第一轮多重PCR引物组包含55对PCR引物对,序列分别如序列表中SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.110所示,第二轮多重PCR引物的序列如SEQ ID NO.111~SEQ ID NO.112所示。本发明提供的肺癌血浆游离DNA甲基化检测方法能一次性同时对肺癌相关的55个甲基化位点进行检测,多重PCR引物之间相互干扰小,特异性强,扩增效率高,并且减少样本损耗,降低检测成本,提高检测效率,配合高通量测序技术