本发明公开了一种人类和其他哺乳动物细胞附着体表达载体、表达系统、制备方法和应用，属于基因工程与基因治疗技术领域。该附着体表达载体上插入有如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示的分段β‑干扰素MAR序列(或者与该序列95％以上同源的核苷酸序列)，相较包含全长MAR序列或387bp MAR序列的表达载体，该载体能高效、持续、稳定地表达外源目的基因，尤其是包含E段MAR序列的载体表达最佳，可用于基因治疗。在该载体中，分段MAR序列插入载体的多克隆位点也即eGFP下游处，一方面能克服转基因沉默，另一方面能提高目的蛋白的表达水平以及后续单克隆细胞株筛选的有效性。
本发明公开了一种杜梨硝酸盐转运蛋白基因Pbr0335，所述硝酸盐转运蛋白基因Pbr0335的全长基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还公开了一种杜梨硝酸盐转运蛋白基因Pbr0335的特异性片段，所述基因Pbr0335的特异性片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还公开了一种杜梨硝酸盐转运蛋白基因Pbr0335的VIGS沉默体系及其构建方法，本发明通过在特异性引物中引入BamH I酶切位点和Kpn I酶切位点，采用烟草脆裂病毒载体TRV构建杜梨Pbr0335基因沉默体系，有效降低了杜梨Pbr0335基因的表达水平，并使其能够在杜梨植株内进行系统扩散传播，为杜梨功能基因组学研究提供技术支撑。
本发明公开了一个响应环境温度调控陆地棉开花的关键基因GhPIF7，属于基因工程技术领域，该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，还公开了该基因在提高棉花抵抗苗期高温胁迫能力中的应用。本发明将目的基因进行克隆，构建目的基因的VIGS沉默载体，研究在苗期相对高温胁迫下的生物学功能，结果发现，GhPIF7基因沉默导致陆地棉的株高变矮、现蕾和开花时间延迟，影响陆地棉的生长发育。以此证实GhPIF7基因正向调控棉花响应高温胁迫反应，改善苗期高温对棉花的开花、现蕾、株高等表型生长发育的影响，为陆地棉耐高温胁迫育种提供重要基因资源。
本发明公开了牡丹PsMYB4基因在改变植物花瓣色斑颜色和大小方面的应用。所述牡丹PsMYB4基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还公开了沉默牡丹PsMYB4基因的载体、表达盒、重组菌或细胞在改变植物花瓣色斑颜色和大小方面的应用。本发明通过将构建的PsMYB4基因沉默载体转化到牡丹花瓣中进行表达，待花瓣生长7天后，观察PsMYB4转基因牡丹花瓣色斑表型，发现色斑较野生型明显变大，色斑颜色明显加深，色斑中总花青素含量显著增加，色斑中花青素生物合成相关基因的表达水平明显上升，创制了具有较大花瓣色斑的牡丹新种质。
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种抑制猪流行性腹泻病毒M基因表达的shRNA和重组表达载体及其应用。该抑制猪流行性腹泻病毒M基因表达的shRNA的靶序列为SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列，该重组表达载体表达上述shRNA。本发明基于猪流行性腹泻病毒的M基因序列筛选出可以使M基因沉默的优势shRNA序列，并通过细胞水平实验验证了该shRNA能有效抑制猪流行性腹泻病毒的复制增殖，因此，上述shRNA及重组表达载体可以用于制备治疗猪流行性腹泻药物
本发明涉及基因工程领域，具体的，本发明涉及一种缓解鱼藤酮慢性中毒的靶位蛋白及其编码基因和应用。本发明发现提供鱼藤酮慢性中毒的靶位基因Transferrin(Tsf)，并通过基因沉默干扰Tsf显著缓解或者延缓鱼藤酮慢性中毒状况。根据本发明，人的鱼藤酮慢性中毒的靶蛋白包括如SEQ ID No.3所示的氨基酸序列，所述基因包括如SEQ ID No.4所示的核苷酸序列。根据本发明的靶位基因，构建携带目标基因的RNAi载体，通过基因沉默可用于改善鱼藤酮慢性中毒病人的运动能力和延长寿命，减缓或阻止鱼藤酮暴露所致的鱼藤酮慢性中毒症状。
本发明属于农业生物技术技术领域，公开了一种小麦转录因子TaCBF1d及其应用，小麦转录因子TaCBF1d氨基酸序列为SEQ ID NO：1；将在小麦和条锈菌互作中的关键基因通过植物表达载体，利用农杆菌介导的遗传转化，获得了TaCBF1d的转基因植株，并验证了转基因过表达植株对条锈菌主要的流行小种表现出广谱抗性。本发明利用反向遗传学方法分析TaCBF1d转录因子基因，TaCBF1d基因受到条锈菌分亲和小种的诱导，采用病毒介导的基因沉默技术沉默TaCBF1d基因，确定TaCBF1d基因在小麦抗条锈病中起正调作用，
