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[发明专利]表面功能化纳米纤维细菌检测膜及其制备方法和应用-CN201911381283.8有效
发明人：王栋;鲁振坦;张佳琪;黄煜;黄江西 -专利权人：武汉纺织大学
申请日： 2019-12-27 - 公布日： 2022-06-03 - 主分类号： G01N21/78 文献下载
摘要：本发明提供了一种表面功能化纳米纤维细菌检测膜及其制备方法和应用，属于生物化学技术领域。该表面功能化纳米纤维细菌检测膜为表面接枝有显色底物的功能化纳米纤维细菌检测膜，首先制备一种聚乙烯醇‑乙烯共聚物纳米纤维膜，对其进行表面功能化处理，然后在其表面接枝能够与细菌中的特异性酶发生酶促反应的显色底物，得到表面功能化纳米纤维细菌检测膜。将本发明制备的细菌检测膜浸泡在细菌悬浮液中，显色底物在细菌中的特异性酶的作用下发生酶促反应，解离出显色物质，通过测试细菌检测膜表面或溶液的荧光强度或吸光度或者颜色深度变化，实现对细菌浓度的可视化、快速、
表面功能纳米纤维细菌检测及其制备方法应用

[发明专利]一种固定化黄嘌呤氧化酶及其制备方法和用途-CN200610018664.6无效
发明人：胡胜水;吴云华 -专利权人：武汉大学
申请日： 2006-03-30 - 公布日： 2006-09-20 - 主分类号： C12N11/14 文献下载
摘要：本发明涉及一种固定化黄嘌呤氧化酶，包括40－49.5wt％的碳纳米管、40－49.5wt％的双十六烷基磷酸和1－20wt％的黄嘌呤氧化酶，黄嘌呤氧化酶吸附在由碳纳米管和双十六烷基磷酸组成的混合膜上。其制法为：将碳纳米管开管氧化，用水洗涤至中性并烘干，将烘干后的碳纳米管和双十六烷基磷酸加入蒸馏水中，超声分散得分散液；将分散液涂附在基体上，烘干，得到混合膜；将混合膜放入黄嘌呤氧化酶溶液吸附，得到固定化黄嘌呤氧化酶本发明的突出特点是：能同时得到黄嘌呤氧化酶三对氧化还原中心的电化学信号，并且黄嘌呤氧化酶保持其生物活性，能催化其底物—硝酸根的还原，有较好的稳定性和重现性；可用于制备检测硝酸根的生物传感器。
一种固定黄嘌呤氧化酶及其制备方法用途

[发明专利]膜回收脂肪酶催化可再生油脂制备生物柴油的方法-CN200810239182.2有效
发明人：刘德华;杜伟 -专利权人：清华大学
申请日： 2008-12-11 - 公布日： 2009-04-29 - 主分类号： C12P7/64 文献下载
摘要：一种膜回收脂肪酶催化可再生油脂制备生物柴油的方法，属于生物燃料合成技术领域。该工艺是以短链醇ROH作为反应酰基受体，利用非固定化脂肪酶作为催化剂催化油脂原料与短链醇进行转酯反应合成生物柴油，反应结束后，利用膜分离方法进行非固定化脂肪酶的回收，再利用回收的非固定化脂肪酶进行下一批次的反应加入基于油脂4-9摩尔的短链醇，加入基于油脂质量2％-20％的水，加入基于单位油脂质量20-200个酶活单位的非固定化脂肪酶，在生化反应器中进行反应。脂肪酶的回收率达到95％以上，回收的酶液中副产物甘油的残存量小于5％。然后再利用回收的非固定化脂肪酶进行下一批次生物柴油的制备反应，反复操作，达到多次重复使用非固定化脂肪酶的目的。
回收脂肪酶催化再生油脂制备生物柴油方法

[发明专利]导电聚合物及固定化酶的制备方法-CN200510020879.7无效
发明人：蒋亚东;曾红娟;谢光忠;周红阳 -专利权人：电子科技大学
申请日： 2005-05-11 - 公布日： 2006-11-15 - 主分类号： C12N11/08 文献下载
摘要：，4－二氧乙撑噻吩单体和氧化剂对甲苯磺酸铁按1∶4的摩尔比加入一定量的丙酮与异丙醇混合溶剂中，将混合溶液放在放在－5～0℃的冰箱中反应25～35分钟，从反应混合物中收集的生成物就是导电聚合物，所形成的膜就是导电聚合物膜然后按3∶5∶1的体积比将酶溶液、牛血清白蛋白溶液和戊二醛溶液混合后转移到导电聚合物膜上，就可以制得导电聚合物固定化的酶膜。本发明的导电聚合物膜具有电导率高、表面吸附性能好等特点，制备出来的固定化酶具有稳定性好、活性高等特点。
导电聚合物固定制备方法

[发明专利]一种串联多酶蛋白质微酶解反应器及其使用方法-CN201510069165.9在审
发明人：张凌怡;上官露露;任俊;张维冰 -专利权人：张凌怡;上官露露;任俊;张维冰
申请日： 2015-02-02 - 公布日： 2015-05-20 - 主分类号： C12M1/40 文献下载
摘要：本发明涉及一种串联多酶蛋白质微酶解反应器，其特征在于，将两种单一酶的微反应器通过膜接口串联成多酶反应器。本发明的串联多酶蛋白质微酶反应器两种酶的固定和酶解都是独立进行，互不干扰；该酶反应器的膜接口可以通过溶液交换满足不同蛋白酶的酶解条件；根据样品需要，选择合适的蛋白酶，不受不同酶间酶解条件差异的限制，且可方便调节不同蛋白酶的酶解顺序，操作容易；特别适用于膜蛋白等复杂样品的酶解；该酶反应器膜实现酶解、富集、鉴定的一体化，降低样品的离线损失，从而大大提高蛋白质分析鉴定的效率。
一种串联蛋白质微酶解反应器及其使用方法

[发明专利]一种基于可见光诱导接枝聚合的碳酸酐酶固定化方法-CN202211112922.2在审
发明人：朱兴;杜晨曦;贺斌 -专利权人：陕西科技大学
申请日： 2022-09-13 - 公布日： 2022-11-18 - 主分类号： C12N11/082 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于可见光诱导接枝聚合的碳酸酐酶固定化方法，首先，将ITX丙酮饱和液滴加在LDPE膜两面，夹在两片石英板中间，在紫外汞灯下照射，洗涤干燥，得到LDPE‑ITXSP膜；将PEGDA、ε‑PLL和去离子水混合，浇铸在LDPE‑ITXSP膜两面，放置在两块石英板间，在可见光下照射聚合，洗涤干燥，将LDPE‑g‑PEGDA‑ε‑PLL膜浸没在戊二醛溶液中，震荡，然后浸没在碳酸酐酶/PBS缓冲液中，本发明方法能够将碳酸酐酶CA通过具有长分子链结构的柔性聚合物刷固定在聚乙烯膜上，利用聚合物刷的柔性使得经固定后的CA仍具备灵活位移的能力，从而提高固定化CA对CO2
一种基于可见光诱导接枝聚合碳酸固定方法

[发明专利]固定化纤维素酶的聚乙烯醇纳米超细纤维膜及其制备方法-CN200410020239.1无效
发明人：袁晓燕;邬丽丽;张春雪;盛京 -专利权人：天津大学
申请日： 2004-08-06 - 公布日： 2005-03-30 - 主分类号： C12N11/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种固定化纤维素酶的聚乙烯醇纳米超细纤维膜及其制备方法，属于酶的固定化技术。该膜材料为由质量百分比为80～99％的聚乙烯醇和质量百分比为1～20％的纤维素酶组成的、平均直径为200nm纤维形成的厚度为10μm～50μm的薄膜。其制备过程包括：将相对分子质量为6万～10万的聚乙烯醇溶于醋酸缓冲溶液中配成浓度为5～8％的溶液，然后按静电纺丝方法制备成膜，经戊二醛蒸气交联即得。该固定化纤维素酶的膜材料用作壳聚糖的降解，具有生物酶活性高且可反复多次使用等优点，其制备过程简单。
固定化纤维素酶聚乙烯醇纳米纤维及其制备方法

[发明专利]一种固定化酶法耦合膜技术制备羟基酪醇的方法-CN201510384388.4在审
发明人：不公告发明人 -专利权人：四川小叶本草生物科技有限公司
申请日： 2015-06-30 - 公布日： 2017-01-11 - 主分类号： C07C39/11 文献下载
摘要：本发明一种固定化酶法耦合膜技术制备羟基酪醇的方法，涉及植物中有效成分的制备方法，具体涉及羟基酪醇的提取制备方法。本发明羟基酪醇的制备方法包括一下步骤：A、提取；B、固定化酶酶解；C、膜滤；D、喷雾干燥。与现有技术相比，本发明采用固定化酶水解提取液，与酸水解液比较，结果表明酸水解会产生较多的副产物，且橄榄苦甙没有被完全转化；而固定化酶水解，专一性强，橄榄苦甙可被完全转化为羟基酪醇，酶解条件温和，提高了羟基酪醇的收率此外，酶的固定化起到保护酶的作用，为酶的重复利用提供了可能。从整个制备过程中缩短了生产周期，节约了生产成本。
一种固定化酶法耦合膜技术制备羟基方法

[发明专利]利用天然油体重构法制备固定化脂肪酶用于生产生物柴油-CN201110283115.2无效
发明人：白林含;张树军;白方文 -专利权人：四川大学
申请日： 2011-09-22 - 公布日： 2012-01-18 - 主分类号： C12P7/64 文献下载
摘要：本发明是一种利用天然油体重构法同步纯化和固定化脂肪酶的方法，该方法是利用天然油体崩解后能自发重构的特点，将表达有融合蛋白脂肪酶油体蛋白的大肠杆菌与天然油体按比例混合后超声处理，利用油体蛋白的特异疏水性使融合蛋白锚定到新组成的油体半单位膜上，形成含有脂肪酶的重构油体，从而达到脂肪酶纯化和固定化同步完成的目的。该发明提供了一种全新的可用于生产生物柴油的脂肪酶固定化技术，解决了当前酶法生产生物柴油过程中固定化脂肪酶成本高、效率低的缺点，制备工艺简单；本发明首次采用天然油体作为固定化酶的基质，成本低廉、底物适应性广泛，并显著提高脂肪酶的稳定性以及对低元醇的耐受能力。
利用天然体重法制固定脂肪酶用于生产生物柴油

[发明专利]一种细菌纤维素固定化漆酶POPs消减材料的制备方法-CN201810718162.7在审
发明人：张勇;徐素芹;潘建义;姚菊明 -专利权人：浙江理工大学
申请日： 2018-06-30 - 公布日： 2018-11-23 - 主分类号： C12N11/12 文献下载
摘要：本发明公开了一种细菌纤维素固定化漆酶POPs消减材料的制备方法。采用方法的要点是将斜面菌种转接到种子培养基中进行动态培养，然后再次转接静态培养获得细菌纤维素膜薄膜；采用0.1%的NaOH在水浴中处理，然后用去离子水冲洗至中性，冷冻干燥得到细菌纤维素干膜；最后采用吸附‑交联法制备固定化漆酶材料，可用于处理自然水体中的持久性有机污染物。本发明制备的细菌纤维素薄膜能安全高效的固定化漆酶，最大限度地保持酶活性，规避了传统游离态漆酶降解水体中POPs污染物流失严重、难以重复使用等问题，有利于自然水体中POPs的高效、安全降解与消除。
固定化漆酶细菌纤维素制备自然水体降解消减持久性有机污染物细菌纤维素薄膜细菌纤维素膜污染物流失种子培养基安全环保动态培养静态培养去离子水斜面菌种转接可控性酶活性游离态干膜交联可用漆酶水浴吸附薄膜冲洗水体安全

[发明专利]一株PAS_chr1-3_0141基因敲除的毕赤酵母基因工程菌及其构建方法与应用-CN202110143053.9有效
发明人：陈勇;侯安奇;应汉杰;余斌;丁赛;蒋颖 -专利权人：南京工业大学
申请日： 2021-02-02 - 公布日： 2022-05-24 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明首次敲除PAS_chr1‑3_0141基因，在固定化发酵过程中，可增加毕赤酵母在固定化发酵中的粘附作用，成膜能力提高，提高了发酵效率，提升了毕赤酵母基因工程菌产植酸酶的发酵性能，不仅提高了产物酶酶活，酶活性更强、更稳定，增加固定化发酵的成膜量、缩短发酵的时间，而且改造后的毕赤酵母基因工程菌能进行多批次连续发酵，在发酵上具有明显优势。
pas_chr1 _0141 基因酵母基因工程及其构建方法应用

[发明专利]一种氮掺杂二氧化钛和碳化钛共修饰PVDF膜固定化漆酶及其方法和应用-CN202211260198.8在审
发明人：朱浩;尹大学;钟瑞;王童;王玥;班飒 -专利权人：兰州大学
申请日： 2022-10-14 - 公布日： 2022-11-29 - 主分类号： C12N9/02 文献下载
摘要：本发明属于膜固定化酶技术领域。本发明提供了一种氮掺杂TiO2和Ti3C2共修饰PVDF膜固定化漆酶及其方法Sub>、水、Ti3C2、羟乙基纤维素和聚乙烯醇反应，得到溶胶后涂覆在PVDF表面；之后与交联剂反应，将反应产物、水和漆酶粉末反应，得到氮掺杂TiO2和Ti3C2共修饰PVDF膜固定化漆酶。本发明产物的酶载率为70～80％，可使用5～20次，用于降解废水中的微污染物，降解率可达98～99％；漆酶的酶活性回收率可达95～99％；本发明的方法简单，易于操作，适合推广应用。
一种掺杂氧化碳化修饰 pvdf 固定化漆酶及其方法应用

[发明专利]一种含多酶的高效全能膜清洗剂的制备方法-CN202111568146.2在审
发明人：陆跃乐;孙雪;高倩妮;郑晓宇;孔叶凯 -专利权人：杭州佳嘉乐生物技术有限公司
申请日： 2021-12-21 - 公布日： 2022-03-18 - 主分类号： C11D3/386 文献下载
摘要：本发明提供了一种含多酶的高效全能膜清洗剂的制备方法，包括以下步骤：(1)糖基化酶的制备；(2)负电喷雾电离高能碰撞诱导制备小分子稳定剂；(3)按照下述质量百分比取各原料：步骤(1)制备的糖基化的酸性蛋白酶6％‑10％、酸性纤维素酶6％‑10％、α‑淀粉酶6％‑10％、果胶酶6％‑10％、脂肪酶6％‑10％；步骤(2)制备的小分子稳定剂1‑3％；离子液体5‑10％；防腐剂0.5‑1.5％；络合剂10‑20％；其余为去离子水；(4)膜清洗剂的配制。本发明扩大了膜污染物种类的清洗范围，有效提高了膜污染的清洗效果；多酶清洗和离子液体辅助清洗剂协同，可以减少多流程多种类的膜清洗剂的多次清洗对膜带来的损伤，可以极大地减少清洗时间，进一步提高膜使用寿命。
一种含多酶高效全能洗剂制备方法

[发明专利]一种固定化酶载体、固定化酶以及制备方法-CN202111020669.3在审
发明人：陈峻青;汤玉琪 -专利权人：东南大学
申请日： 2021-09-01 - 公布日： 2021-11-16 - 主分类号： C12N11/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种固定化酶载体、固定化酶及制备方法。本发明通过壳聚糖的大分子颗粒附着在鸡蛋壳膜的表面并通过共沉淀的方式将磁性Fe3O4均匀沉淀分布在蛋壳膜上，制备出磁性Fe3O4/CS/ESMP作为固定化β‑葡萄糖苷酶的酶载体，增加了酶结构的刚性以及耐受性，具有良好的操作稳定性；此外，制备的Fe3O4/CS/ESMP@BG在磁场的作用下易于分离收集从而重复回收利用，提高了酶的使用效率，制备的Fe
一种固定载体以及制备方法

[发明专利]固定过氧化氢酶的明胶-二氧化硅杂化微球制备方法-CN201611167105.1有效
发明人：李健;马俊;姜涛;陈延辉;王艳环;闫冰;邵怀启;曹晨刚;李明凯;姚月 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2016-12-14 - 公布日： 2019-06-28 - 主分类号： C12N11/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种固定过氧化氢酶的明胶‑二氧化硅杂化微球的方法。该方法以微孔膜渗透乳化过程为主加以实现的，其特征在于包括：制备含过氧化氢酶浓度为0.1‑2毫克/升的明胶/过氧化氢酶溶液；制备含有司班‑80质量浓度为0.25‑4.0%的液体石蜡油；将明胶/过氧化氢酶溶液与液体石蜡油混合制粗乳液；粗乳液以压力反复透过微孔膜，得到多级乳化的W/O型乳液；将多级乳化的W/O型乳液滴加入正硅酸乙酯水解液中，经过仿生矿化反应、固化、洗涤后得到用于固定化酶的明胶‑二氧化硅杂化微球。本发明的优点：制备条件温和，工艺简单易行，制得微球粒度均一，用于固定过氧化氢酶的能力强，耐受酸碱性好，储存稳定。
固定过氧化氢酶明胶二氧化硅杂化微球制备方法