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[发明专利]一种猪单胚胎体外培养方法-CN201810426299.5有效
发明人：张立苹;林郑云;毕延震;华再东;郑新民 -专利权人：湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
申请日： 2018-05-07 - 公布日： 2021-01-22 - 主分类号： C12N5/073 文献下载
摘要：本发明公开了一种猪单胚胎体外培养方法。属于农业‑畜牧兽医领域。具体为采用饲养层细胞微滴与单个胚胎进行共培养，获得了较好的发育结果，单胚胎培养与传统所用的多胚胎培养发育进程是一致的，而且，带透明带附着或去透明带的单胚胎7天均可获得猪孤雌发育囊胚。本发明中提供的饲养层细胞微滴制备简单，按照本发明中提供的方法能够为研究单个胚胎的发育提供可靠的原始材料，完全可以满足对猪单个胚胎发育进程跟踪观察及进一步研究的需要。本发明中提供的单胚胎培养方法可广泛应用于多种物种的单胚胎培养中。
种猪胚胎体外培养方法

[发明专利]一种小鼠骨髓极小胚胎样干细胞的分离与鉴定方法-CN201310224803.0无效
发明人：邹刚明 -专利权人：上海刚泽生物科技有限公司
申请日： 2013-06-06 - 公布日： 2013-11-20 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：一种小鼠骨髓极小胚胎样干细胞的分离与鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）骨髓单个核细胞的分离；（2）单个核细胞标记与极小胚胎样干细胞分选；（3）极小胚胎样干细胞RNA的提取；（4）转录PCR检测多能基因的表达；(4.1)反转录，(4.2)PCR反应，(4.3)琼脂糖凝胶电泳；和（5）极小胚胎样干细胞与胚胎干细胞表达谱的比较；（5.1）RNA的提取，（5.2）RNA的浓度测定，（5.3）Illumina法比较本发明通过抗体标记的方法直接从小鼠的骨髓单个核细胞中分选出一种新的干细胞-极小胚胎样干细胞。这种成体干细胞可以分化成任何三个胚层的细胞，对于组织的再生医学具有重要作用。
一种小鼠骨髓极小胚胎干细胞分离鉴定方法

[发明专利]一种制备鲆鲽鱼类单个胚胎染色体的方法-CN201310191707.0无效
发明人：王旭波;张全启;齐洁;王志刚;于海洋;贺艳 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2013-05-22 - 公布日： 2013-08-28 - 主分类号： G01N1/28 文献下载
摘要：本发明一种制备鲆鲽鱼类单个胚胎染色体的方法，属于生物技术中的海洋动物细胞遗传学领域。使用鲆鲽鱼类的胚胎为材料，先以注射器为工具，采用物理加压的方法对胚胎材料卵膜的破除，将处于尾牙期至出膜期之间的胚胎连同海水一起置于针筒中，然后推动注射器活塞将胚胎自针头处挤压出，胚胎即可破膜，且组织保存较完整破膜后的胚胎使用常规染色体制备方法进行染色体的制备，用秋水仙素处理2小时，然后置于低渗液中处理30分钟，最后用卡诺固定液固定三次，每次20分钟。本发明获得的鲆鲽鱼类染色体分裂相非常多，效果也很好，尤其是可以制备单个胚胎的染色体，不浪费材料，且可以针对单个个体进行后续的遗传学分析。
一种制备鱼类单个胚胎染色体方法

[发明专利]一种获得相同遗传背景的哺乳动物胚胎的方法-CN202210933008.8在审
发明人：吴克良;陈子江 -专利权人：山东大学
申请日： 2022-08-04 - 公布日： 2022-10-11 - 主分类号： C12N5/073 文献下载
摘要：本发明提供了一种获得相同遗传背景的哺乳动物胚胎的方法，包括以下步骤：(1)去除哺乳动物卵裂期胚胎的透明带，并分离获得至少一个无透明带保护的单个卵裂细胞；(2)向培养皿中加入透明质酸钠双相凝胶，然后加入培养液；所述透明质酸钠双相凝胶由交联透明质酸钠和游离透明质酸钠组成；(3)将所述单个卵裂细胞分别嵌入透明质酸钠双向凝胶中，放入细胞培养箱中培养，获得至少一个相同遗传背景的胚胎。本发明方法不会对单个卵裂细胞造成损伤，可保留单个卵裂细胞的正常发育潜能，从而简单、高效地获得至少一个具有相同遗传背景的胚胎，在胚胎移植和哺乳动物育种方面具有广阔的应用前景。
一种获得相同遗传背景哺乳动物胚胎方法

[发明专利]一种干细胞制剂及其制备方法和应用-CN201610873067.5在审
发明人：葛啸虎;陈海佳;王一飞;卢瑞珊;王小燕 -专利权人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
申请日： 2016-09-30 - 公布日： 2017-01-04 - 主分类号： A61K38/19 文献下载
摘要：该干细胞制剂包括胚胎干细胞、骨髓单个核细胞、单核细胞趋化因子‑1和溶媒。本发明采用胚胎干细胞和骨髓单个核细胞联合治疗骨坏死，可有效促进骨坏死的愈合，显著提高新生骨的生长，其治疗效果显著好于单纯采用胚胎干细胞或骨髓单个核细胞的治疗效果。
一种干细胞制剂及其制备方法应用

[发明专利]一种快速有效的鉴定活体斑马鱼胚胎基因型的方法-CN201911015031.3在审
发明人：不公告发明人 -专利权人：南京尧顺禹生物科技有限公司
申请日： 2019-10-23 - 公布日： 2021-04-23 - 主分类号： C12Q1/6806 文献下载
摘要：本发明涉及一种快速有效的鉴定活体斑马鱼胚胎基因型的方法，具体步骤包括将将单个活体斑马鱼胚胎放至一种含蛋白酶的DNA收集液中，转移至适当的环境温度条件下在具一定转速摇动或震动的情况下孵育一段时间，然后收取DNA收集液，同时在单个胚胎中加入胚胎恢复液。收集到的DNA收集液中含从活体胚胎中分离出的含核上皮细胞，经加入裂解处理后可直接用作基因组DNA模板用于未来的基因型鉴定；加入胚胎恢复液的斑马鱼胚胎可正常发育与生长。本发明进一步提供了可用于快速有效鉴定包括斑马鱼活体胚胎在内的行体外发育的动物活体胚胎的基因型鉴定的试剂盒，其特征在于所述试剂盒包括本发明中所述的各种溶液和蛋白酶。
一种快速有效鉴定活体斑马胚胎基因型方法

[发明专利]一种利用实时定量反转录PCR监测IVF胚胎培养液质量的反转录反应体系-CN201110362934.6无效
发明人：金星亮;白丽君;常菁 -专利权人：江苏迈健生物科技发展有限公司
申请日： 2011-11-14 - 公布日： 2013-01-09 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明提出一种利用实时定量反转录PCR监测IVF胚胎培养液质量的反转录反应体系。所述监测培养液质量的方法是利用实时定量反转录PCR分析IVF单个植入前胚胎的基因表达来进行IVF胚胎培养液的质量监测，所述反转录PCR分析IVF单个植入前胚胎的基因表达方法包括步骤：标本收集及纯化；反转录反应利用这种方法，可以弥补Microarray的不足，对分析单个关键基因在单个细胞的表达和在IVF科研与临床上有非常广泛的应用价值。此方法为确定新的IVF和体外胚胎培养培养液的条件提供了一个重要的监测手段。
一种利用实时定量转录 pcr 监测 ivf 胚胎培养液质量反应体系

[发明专利]一种猴子早期胚胎转基因敲入的PCR鉴定方法-CN201510469573.3有效
发明人：陈文锋;杨宇丰;孙玲 -专利权人：福州大学
申请日： 2015-08-04 - 公布日： 2019-03-12 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本发明属于分子生物学及基因工程领域，涉及一种猴子早期胚胎转基因敲入的PCR鉴定方法。含有0.2‑0.5µl培养基的单个注射完的早期胚胎收集于薄壁透明PCR管底部；用枪头小心加入DLB裂解液5µl至PCR管底部，不要接触到含有胚胎的培养基;置于冰上裂解15‑30min释放基因组DNA;裂解产物直接全部用于全基因组扩增反应本发明的方法能稳定地对少至只有16个细胞的猴子单个胚胎进行操作，所有操作步骤一直在同一PCR管中操作，防止操作过程造成微量基因组的丢失。同时，高保真横向扩增的方法拓展了基因组的下游应用，按照此方法可稳定、准确、简便地实现对猴子单个胚胎基因组敲入的快速PCR鉴定。
一种猴子早期胚胎转基因 pcr 鉴定方法

[发明专利]一种IVF胚胎培养液的质量监测方法-CN201110362870.X无效
发明人：金星亮;白丽君;常菁 -专利权人：江苏迈健生物科技发展有限公司
申请日： 2011-11-14 - 公布日： 2013-01-09 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明提出一种利用实时定量反转录PCR分析IVF单个植入前胚胎的基因表达来进行IVF胚胎培养液质量监测的方法，所述利用反转录PCR分析IVF单个植入前胚胎的基因表达方法包括步骤：标本收集及纯化；逆转录反应利用这种方法，可以弥补Microarray的不足，对分析单个关键基因在单个细胞的表达和在IVF科研与临床上有非常广泛的应用价值。此方法为确定新的IVF和体外胚胎培养培养液的条件提供了一个重要的监测手段。
一种 ivf 胚胎培养液质量监测方法

[发明专利]一种用压电破膜技术进行PGD/PGS胚胎活检的方法-CN202110918355.9在审
发明人：刘晓;刘璟青;王娟 -专利权人：刘晓
申请日： 2021-08-11 - 公布日： 2021-11-09 - 主分类号： C12N13/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种用压电破膜技术进行PGD/PGS胚胎活检的方法。本发明解决了发育中的胚胎穿过透明带分离捕获单个极体或卵裂球、孵出前的滋养层细胞的问题，避免了激光捕获辅助技术应用带来的各种实际问题，尽可能最大程度上保持了需要处理的胚胎发育的活性，这一技术是单个极体或卵裂球、孵出前的滋养层细胞分离的基础，也是后续各项针对上述获取细胞样品进行检测的前期基础，这一技术还可以根据不同需要处理胚胎情况进行各项参数调整并记录，方便了实际操作，提高了实验的工作效率，保证并提高了检测的成功率，最为重要的是这种方法极大地保护了需要处理的各种胚胎活性，提高了后续胚胎发育、着床受孕、活产等的成功率。
一种压电膜技术进行 pgd pgs 胚胎活检方法

[发明专利]一种基于PGD的卵裂期胚胎单细胞检测HBV病毒基因组垂直传播方法-CN201910558025.6在审
发明人：徐永芳;李永刚;马艳萍;李云秀;晏家骢;相立锋;高梦莹 -专利权人：云南省第一人民医院
申请日： 2019-06-26 - 公布日： 2019-09-17 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于PGD的卵裂期胚胎单细胞检测HBV病毒基因组垂直传播方法，本发明通过利用PGD技术分离检测物单个细胞，并应用单细胞扩增试剂盒得到全基因组，进行全基因组测序能早期、准确的了解HBV病毒基因组是否插入到胚胎中的情况，不会影响胚胎继续发育，也不影响最终胚胎移植。
基因组胚胎全基因组卵裂扩增试剂盒单个细胞分离检测胚胎移植影响胚胎检测测序发育应用

[发明专利]胚胎培养和监测系统-CN202011605172.3在审
发明人：曾维俊;顾奇;肖冬根;刘欣瑞;宋宇;孙海旋;赵振英;逄金森 -专利权人：中国科学院苏州生物医学工程技术研究所;中国科学院动物研究所
申请日： 2020-12-29 - 公布日： 2021-03-19 - 主分类号： C12M1/36 文献下载
摘要：本发明公开了一种胚胎培养和监测系统，包括供气模块、胚胎培养模块和光学监测模块；胚胎培养模块包括至少一个可独立进行胚胎培养的胚胎培养室、为胚胎培养室提供培养液的培养液平衡室以及用于培养液输送的液路组件；供气模块包括用于提供胚胎培养所需的多种气体的多路气源供给单元以及用于将多路气源供给单元提供的多种气体以特定比例混合后输送至胚胎培养室的气体混合装置；光学监测模块用于对胚胎培养室中的胚胎进行监测。本发明的胚胎培养和监测系统可实现胚胎培养所需的多种气体的浓度的在线调节和培养液在线自动更换，能实现胚胎长时程连续培养；本发明通过单个光学监测模块能实现对多组胚胎培养室中的胚胎的整个发育周期的监测。
胚胎培养监测系统

[发明专利]一种用于废弃胚胎囊胚发育的培养方法-CN201811407107.2在审
发明人：秦建华;苏文涛;陈雯雯 -专利权人：中国科学院大连化学物理研究所
申请日： 2018-11-23 - 公布日： 2020-06-02 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本发明提供一种用于废弃胚胎囊胚发育的培养方法，属于微流控技术与生殖生物学的交叉领域。本发明所用的芯片为凹陷阵列结构的“倒金字塔型”或“倒V型”芯片，且芯片表面涂覆有Pluronic F‑127，该胚胎培养微流控芯片有助于在体外实现单个胚胎定位和培养过程。本发明所述的胚胎培养芯片与培养方法，能够显著提高废弃胚胎的囊胚发育率，对建立人类不同HLA型别的hES库具有重要意义。
一种用于废弃胚胎囊胚发育培养方法

[发明专利]一种胚胎培养限位栏-CN201811513114.0在审
发明人：郭镇华;吕蕾;杨云春;付博;刘自广;汪亮;彭福刚 -专利权人：黑龙江省农业科学院畜牧研究所
申请日： 2018-12-11 - 公布日： 2019-03-19 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种胚胎培养限位栏，所述胚胎培养限位栏的制作方法具体包括以下步骤：S1、胚胎培养限位栏的材料选择，选取聚苯乙烯或其他医学材料进行胚胎培养限位栏的制作，S2、胚胎培养限位栏的尺寸设计，根据胚胎直径在180‑220um范围内，可设计每一个分离格内部尺寸长300um，宽300um，高200um，每一个分离格厚度50um，边缘四框厚度0.6mm，可得到网格状胚胎培养限位栏，S3、胚胎培养限位栏的标识设计，本发明涉及胚胎工程技术领域。该胚胎培养限位栏，可实现制作良好的胚胎培养限位栏来有效克服单个胚胎在体外培养过程中发育不良的现象，同时简化操作步骤，很好的达到了确保分清胚胎来源的目的，从而大大方便了人们的胚胎培养工作。
胚胎培养限位栏胚胎制作简化操作步骤胚胎工程技术聚苯乙烯标识设计材料选择尺寸设计单个胚胎发育不良体外培养医学材料网格状四框

[实用新型]胚胎培养和监测系统-CN202023268210.9有效
发明人：曾维俊;顾奇;肖冬根;刘欣瑞;宋宇;孙海旋;赵振英;逄金森 -专利权人：中国科学院苏州生物医学工程技术研究所;中国科学院动物研究所
申请日： 2020-12-29 - 公布日： 2022-04-12 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种胚胎培养和监测系统，包括供气模块、胚胎培养模块和光学监测模块；胚胎培养模块包括至少一个可独立进行胚胎培养的胚胎培养室、为胚胎培养室提供培养液的培养液平衡室以及用于培养液输送的液路组件；供气模块包括用于提供胚胎培养所需的多种气体的多路气源供给单元以及用于将多路气源供给单元提供的多种气体以特定比例混合后输送至胚胎培养室的气体混合装置；光学监测模块用于对胚胎培养室中的胚胎进行监测。本实用新型可实现胚胎培养所需的多种气体的浓度的在线调节和培养液在线自动更换，能实现胚胎长时程连续培养；本实用新型通过单个光学监测模块能实现对多组胚胎培养室中的胚胎的整个发育周期的监测。
胚胎培养监测系统

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