本发明涉及分子生物学和生物工程技术领域，具体的说是一种文蛤多巴脱羧酶基因及其编码蛋白和应用。本发明从文蛤中克隆了多巴脱羧酶cDNA全长序列并原核重组表达了该蛋白，文蛤多巴脱羧酶基因cDNA全长具有序列SEQ ID NO.1中所示的核苷酸序列，其编码的蛋白具有SEQ ID NO.2中所示的氨基酸序列，获得的重组多巴脱羧酶具有较高酶活性，具有大规模生产的可能，可以弥补天然蛋白量低以致难以满足需要的局限。鉴于多巴脱羧酶在医药及贝类免疫等领域中的重要作用，本发明所介绍的文蛤多巴脱羧酶基因及其编码蛋白具有在医药等其他相关领域的应用前景，同时可以作为备选的水产养殖贝类新型免疫增强剂。
本发明涉及一种谷氨酸脱羧酶突变体及其在γ‑氨基丁酸生产中的应用，属于生物工程技术领域。本发明所述谷氨酸脱羧酶突变体酶活提高19.8％，同时在60℃孵育24h仍能保持90％的催化活性。以重组谷氨酸棒杆菌的谷氨酸脱羧酶突变体进行转化时，在5L罐中12h分批补料800g底物最终产量高达547.51g/L，比序列如SEQ ID NO.3所述的谷氨酸脱羧酶提高约67.13％，最终底物摩尔转化率达到本发明有效提高谷氨酸脱羧酶的酶活以及热稳定性，为工业上高产γ‑氨基丁酸奠定了基础。
本发明提供了一种硫酸铵促进Eupergit C 250固定化草酸脱羧酶的方法，属于生物化工技术领域。本发明包括：重组草酸脱羧酶的诱导表达，亲和层析分离纯化草酸脱羧酶及草酸脱羧酶固定化三部分。其特征在于：使用含活性环氧基的Eupergit C 250为固定化载体，在固定化过程中添加0.1-2mol/L的中性盐硫酸铵，促进载体对草酸脱羧酶的吸附和共价连接反应。
