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[发明专利]藻种培养系统及藻种传代培养方法-CN202210166779.9有效
发明人：叶乃好;王依涛;范晓;张晓雯;徐东;孙科;王巍;马建;张燕 -专利权人：中国水产科学研究院黄海水产研究所
申请日： 2022-02-23 - 公布日： 2023-09-01 - 主分类号： C12M1/00 文献下载
摘要：本发明提出一种藻种培养系统及藻种传代培养方法，属于微藻生物技术领域，能够解决现有的海洋藻类培养系统无法实现海洋藻类生长环境的精准模拟和藻类长期稳定传代的技术问题。该藻种培养系统包括：CO2光照培养箱和传代培养装置，其中，传代培养装置为微藻传代培养装置或大藻传代培养装置；微藻传代培养装置或大藻传代培养装置进一步包括：预处理槽、传代槽、供气装置、搅拌装置以及光源等部件。本发明能够应用于海洋藻类稳定传代培养方面。
培养系统传代方法

[发明专利]间充质干细胞传代培养方法-CN202011071841.3在审
发明人：程蕊苹;高迎凤;蒲锋星 -专利权人：广东芙金干细胞再生医学有限公司
申请日： 2020-10-09 - 公布日： 2021-04-09 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了一种间充质干细胞传代培养方法，其特征在于，包括以下步骤：1）配制无血清传代培养基，所述无血清传代培养基的组分为：α‑MEM培养基、血小板衍生因子、成纤维细胞生长因子和抗坏血酸；所述血小板衍生因子的浓度为10‑15ng/mL；所述成纤维细胞生长因子的浓度为10‑15ng/mL；2）取原代间充质干细胞，加入到T‑75有孔培养瓶中，加入所述无血清传代培养基，在37℃、5％CO2培养箱中进行培养，待细胞融合度达到80%‑90%时，用胰蛋白酶‑EDTA溶液进行消化，消化完成后按1:4‑5进行传代培养。本培养方法可以在短时间内获得纯度高、分化能力强、干性稳定、增殖能力强的人脐带间充质干细胞。
间充质干细胞传代培养方法

[发明专利]一种改良的PK-15细胞传代培养方法及其应用-CN201510783971.2在审
发明人：佘峥;陈瑞爱;黄红亮;任常宝;谢小雨 -专利权人：肇庆大华农生物药品有限公司;广东温氏大华农生物科技有限公司
申请日： 2015-11-13 - 公布日： 2016-01-20 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了一种改良的PK-15细胞传代培养方法，在PK-15细胞传代培养过程中，加入消泡剂，消泡剂能有效消除细胞传代操作过程中产生的泡沫，使细胞生长状态保持良好，且能有效减少细胞聚团。本发明还把所述改良的PK-15细胞传代培养方法用于猪圆环病毒2型的增殖，增殖后猪圆环病毒2型病毒含量高。
一种改良 pk 15 细胞传代培养方法及其应用

[发明专利]一种脐带间充质干细胞的培养方法-CN202211173443.1在审
发明人：赵耀;李小凡;周蕾 -专利权人：山西房火探生物科技有限公司
申请日： 2022-09-26 - 公布日： 2022-11-25 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了一种脐带间充质干细胞的培养方法，包括以下步骤：(1)自脐带中剥离华通氏胶组织，将华通氏胶组织剪碎后平铺于培养容器中；(2)向步骤(1)的培养容器中加入原代培养基进行培养，待细胞融合度达到80‑90％后用0.25％胰蛋白酶消化传代；(3)将步骤(2)收集的脐带间充质干细胞用传代培养基重悬，进行传代培养。本发明提供的培养方法分别在脐带间充质干细胞的原代和传代培养过程中采用不同成分的培养基。其中在原代培养过程中添加腺苷、瓜籽蛋白、芝麻酚等成分协同作用，有效缩短脐带间充质干细胞原代培养的时间，提高培养效率。在传代培养过程中添加白桦提取物和培养基中的其他成分共同作用，提高脐带间充质干细胞的增殖活性。
一种脐带间充质干细胞培养方法

[发明专利]可传代培养的羊睾丸传代细胞及其传代驯化培养方法及专用培养体系与应用-CN201710208123.8有效
发明人：路荣;刘国英;范秀丽;张燕红;高艳华 -专利权人：金宇保灵生物药品有限公司
申请日： 2017-03-31 - 公布日： 2021-03-19 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了可传代培养的羊睾丸细胞及其传代驯化培养方法及专用培养体系与应用，提供了一株可传代培养的羊睾丸传代细胞LT‑1(CGMCC No.12988)以及驯化培养获得该细胞的方法。本发明采用优化的细胞培养液对羊睾丸原代细胞(LT)进行传代驯化培养，可使羊睾丸原代细胞增加传代次数，适于批量生产；并利用该细胞对羊口疮病毒进行增殖培养，结果显示，羊口疮病毒能连续传代培养3代，均能产生明显的病变，病毒含量可达107.5TCID50/mL，可用于羊口疮病毒的增殖培养和疫苗制备。
传代培养睾丸细胞及其驯化方法专用体系应用

[发明专利]检测维生素C生产菌株传代培养过程中营养环境变化的方法-CN201210109628.6无效
发明人：元英进;高赟;邹旸;胡梦龙;任恒千 -专利权人：天津大学
申请日： 2012-04-13 - 公布日： 2012-08-15 - 主分类号： C12Q1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种检测维生素C生产菌株传代过程中营养环境变化的方法，包括如下步骤：(1)混菌传代培养；(2)营养环境中物质的测定；(3)主成分分析；(4)过程分析。利用本发明的方法可以从揭示混菌传代培养对巨大芽孢杆菌、氧化葡糖杆菌以及混菌体系产生的影响，找到影响传代培养营养环境中的重要物质，这些物质含量的变化规律为了解传代培养促进氧化葡糖杆菌生长及2-酮基-L-古龙酸生产的作用机理提供依据
检测维生素生产菌株传代培养过程营养环境变化方法

[发明专利]一种细胞的传代培养方法与应用-CN202110529912.8在审
发明人：朱灏;吴丹枫 -专利权人：达瑟儿（上海）生命科技有限公司
申请日： 2021-05-14 - 公布日： 2022-07-19 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明属于细胞培养技术领域，具体来说，涉及一种细胞的传代培养方法。所述细胞的传代培养方法可培养P1‑P25代人脐带间充质干细胞时均保持增殖能力；步骤包括：(1)离心；(2)清洗；(3)消化；(4)洗涤；(5)收获计数；(6)细胞接种。在本发明选择了特定的培养基和重组酶使得传代培养后的细胞具有良好的形态、较高的增殖能力和存活率。
一种细胞传代培养方法应用

[发明专利]一种小鼠或大鼠肾成纤维细胞分离及传代培养方法-CN201911099193.X在审
发明人：冷毅斌;吴亭;尚振波 -专利权人：武汉普诺赛生命科技有限公司
申请日： 2019-11-12 - 公布日： 2020-02-04 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明提出了一种小鼠或大鼠肾成纤维细胞分离及传代培养方法，本发明切取小鼠或大鼠的完整肾脏，用胰蛋白酶和IV型胶原酶联合消化，在完全培养基中培养5‑7d后经免疫荧光鉴定纯度可达95％以上，将分离的成纤维细胞用成纤维专用培养基传代培养本发明提出的一种小鼠或大鼠肾成纤维细胞分离及传代培养方法，取材方便，操作简单，细胞增殖快、得率高、纯度高，是一种理想的小鼠或大鼠肾成纤维细胞分离及传代培养方法，为实验提供可靠的细胞资源。
传代培养大鼠小鼠肾成纤维细胞细胞增殖胰蛋白酶成纤维细胞完全培养基专用培养基免疫荧光得率切取肾脏取材纤维细胞消化联合

[发明专利]无血清培养基在分离和传代脂肪间充质干细胞中的用途-CN202011568942.1有效
发明人：王正;刘冰;肖海蓉;汤乐 -专利权人：博雅干细胞科技有限公司
申请日： 2020-12-25 - 公布日： 2023-03-21 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及无血清培养基在分离和传代脂肪间充质干细胞中的用途。具体涉及分离和传代培养脂肪间充质干细胞的方法，其包括(a)分离培养原代脂肪间充质干细胞和(b)传代培养脂肪间充质干细胞两个阶段，(b)阶段是将原代间充质干细胞接种，补充传代完全培养基培养，用D‑hanks液清洗，加重组胰酶溶液消化，得到P1代间充质干细胞；接着将P1代间充质干细胞接种参照P1传代培养方法，得到P2代间充质干细胞，继续传代至P10代，得到各代次的间充质干细胞。本发明使用无血清培养基分离培养和传代培养脂肪间充质干细胞的方法呈现优异的技术效果，例如细胞收率高、细胞活率高。
血清培养基分离传代脂肪间充质干细胞中的用途

[发明专利]多环芳烃好氧降解菌的富集筛选方法-CN201010249762.7无效
发明人：宫小燕;刘洪娟;陆雅海 -专利权人：中国农业大学
申请日： 2010-08-10 - 公布日： 2012-03-14 - 主分类号： C12N1/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种多环芳烃好氧降解菌的富集筛选方法，包括1)制备多环芳烃降解菌系、2)筛选多环芳烃降解菌、3)对纯化的降解菌进行复筛三个步骤，所述步骤1)是在无机盐培养基中加入水稻秸秆和滤纸，高温蒸气灭菌后，再加入多环芳烃；以受多环芳烃污染的土壤为菌源，将其接入上述培养基中，摇床避光培养至培养液变为深棕色；将上述培养液进行传代培养，每次传代培养时培养基中水稻秸秆的加入量均比上一代减少，且不再添加滤纸，每次传代培养均以培养液变为深棕色为传代标准，传代培养在五代以上。
芳烃降解富集筛选方法

[发明专利]非基质胶依赖性的间充质干细胞的制备和扩增方法-CN202310370285.7在审
发明人：赵建芝;张奇辉;陈肇龙 -专利权人：杭州瑞普晨创科技有限公司
申请日： 2023-04-07 - 公布日： 2023-07-11 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了一种非基质胶依赖性的间充质干细胞的制备和扩增方法，包括以下步骤：(1)培养增殖诱导多能干细胞，得到培养后的诱导多能干细胞；(2)将培养后的诱导多能干细胞更换成MSC诱导培养基，进行诱导培养，诱导培养14天后，转移至无基质胶的培养板上，进行传代培养，传代培养所用的培养基和MSC诱导培养基相同，传至第三代开始出现间充质干细胞，多次传代扩增，检测合格，即获得间充质干细胞。本发明采用了新的诱导培养基和传代培养基，iPSC诱导的MSC在传代培养时无需基质胶，细胞增殖能力快，活力高，贴壁情况良好，不依赖于基质胶的存在，而且没有外来动物源成分，有利于产品的商业化以及大批量生产应用
基质依赖性间充质干细胞制备扩增方法

[发明专利]一种鱼类靶向基因营养调控细胞模型的建立方法及应用-CN202110018244.2在审
发明人：周勇华;刘臻;唐建洲;瞿符发 -专利权人：长沙学院
申请日： 2021-01-07 - 公布日： 2021-04-20 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明属于鱼类细胞培养技术领域，公开了一种鱼类靶向基因营养调控细胞模型的建立方法及应用。所述方法包括鱼类肠道上皮细胞原代、传代培养与鉴定：(1)原代培养：采用的机械法加0.05vol％的胰蛋白酶温和性消化液的处理方法，对肠道细胞的损伤较少，有利于促进其增殖；(2)传代培养：传代培养过程中使用0.05vol％的胰蛋白酶温和性消化液进行消化，保持肠道细胞的活力，有利于细胞的传代培养；(3)鉴定：通过细胞免疫荧光技术鉴定鱼肠道上皮细胞。
一种鱼类靶向基因营养调控细胞模型建立方法应用

[发明专利]适应人乙肝病毒自然感染复制并可传代培养的杂交细胞系-CN200710112948.6无效
发明人：马立宪;王刚;邵丽华;江渊;王爱华 -专利权人：山东大学齐鲁医院
申请日： 2007-09-19 - 公布日： 2008-04-09 - 主分类号： C12N5/22 文献下载
摘要：本发明涉及一种适应人乙肝病毒自然感染复制并可传代培养的杂交细胞系及其制备方法，杂交细胞系HepCHLine是由人原代肝细胞和筛选HGPRT阴性的HepG2作为亲本细胞，经融合杂交而得，是一种全新的物质。HepCHLine继承了亲代人肝细胞对HBV感染的敏感性和HepG2能接种动物或传代培养的特性，既能适应HBV的自然感染又能长期传代培养。本发明首次制备出适应人乙肝病毒自然感染复制并可传代培养的杂交细胞系HepCHLine，很好地满足了对人HBV及其自然状态下感染宿主细胞研究的需要。
适应乙肝病毒自然感染复制传代培养杂交细胞系

[发明专利]胰腺癌类器官培养液、培养试剂组合及培养方法-CN202311112679.9在审
发明人：肖荣荣;刘建闯;程曦;胡皓;周宇 -专利权人：北京大橡科技有限公司
申请日： 2023-08-31 - 公布日： 2023-09-29 - 主分类号： C12N5/09 文献下载
摘要：本申请涉及生物组织工程技术领域，公开一种胰腺癌类器官培养液，包括原代培养液和传代培养液，原代培养液和传代培养液均包括条件培养基、基础培养基、复合抗生素和生长因子。根据胰腺癌类器官的特性，在原代培养液中减去了辅助蛋白条件培养基和FGF，且提高了青霉素‑链霉素浓度，从而更有利于在原代培养中抑制原代组织的污染风险并能够纯化出胰腺癌肿瘤细胞；以及，优化的传代培养液能够维持胰腺癌的多代次传代与快速扩培适用于人源胰腺癌类器官的培养。本申请还公开一种培养试剂组合及培养方法。
胰腺癌器官培养液培养试剂组合方法

[发明专利]提高双歧杆菌培养浓度的传代培养方法-CN201811234034.1在审
发明人：何腊平;邢书奇;李翠芹;张玲 -专利权人：贵州大学
申请日： 2018-10-23 - 公布日： 2019-01-01 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高双歧杆菌培养浓度的传代培养方法。本发明发现了双歧杆菌的生长惰性并通过有特点的传代培养方案，通过传代培养活细胞浓度提高了10倍以上，这对于制得高浓度的双歧杆菌发酵剂和益生菌制剂与推广其应用都具有重要的价值，同时对于满足人民对高品质食品需求也具有重要意义
传代培养双歧杆菌双歧杆菌发酵剂益生菌制剂食品需求重要意义高品质活细胞生长应用发现

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