本发明公开了一种疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶基因、工程菌及其应用，该疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶基因的碱基序列如SEQ ID NO.2所示。本发明在不改变现有的疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶氨基酸序列和蛋白结构的基础上，通过避免稀有密码子和密码子对、强的茎环结构和潜在的提前终止信号等不利于蛋白表达的因素，优化了疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶基因序列，使得该序列在毕赤酵母重组表达系统中能够高效表达疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶，表达活力高达370.65U/ml，较疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶基因原始序列的重组表达活力234.03U/ml，提高了58.38％。
本发明提供一种暗色丝孢霉病病原菌实时荧光定量PCR检测引物和探针组合及试剂盒。所述引物和探针组合的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:1‑12所示。本发明的试剂盒能够快速、特异、灵敏、稳定对暗色丝孢霉病病原菌进行分子诊断。在建立了可靠的暗色丝孢霉病病原菌检测体系的基础上，本发明针对性地设计了竞争性内参，确保阴性结果的真实可信。同时，本发明在DNA提取方案和分子检测方法上均做了一些针对性对性的优化，以确保暗色丝孢霉病中的病原菌准确检出。
