[发明专利]一种链霉菌抗生素相关调控基因筛选方法有效
| 申请号： | 202210266274.X | 申请日： | 2022-03-17 |
| 公开（公告）号： | CN114540398B | 公开（公告）日： | 2023-10-24 |
| 发明（设计）人： | 李永泉;徐炜锋;马烈 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N15/76 | 分类号： | C12N15/76;C12N15/31;C12Q1/6869;G01N33/68 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 赵杭丽 |
| 地址： | 310058 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明公开一种链霉菌抗生素相关调控基因筛选方法。通过评估全局调控基因敲除之后与出发菌株在抗生素合成上的差异，然后利用多组学分析和筛选上调下调异常明显的基因，再将筛选得到的基因克隆至高表达载体pSN7上，在链霉菌体内高表达，使用HPLC检测抗生素的产量，记录产量上升明显的菌株，对相应的基因进行修饰位点的突变，随后重复高表达，产量检测，筛选后可获得高产菌株。本发明区别于通过实验仅仅限于合成基因簇钓取蛋白的方法，可在更广的范围内筛选有利于抗生素产量提升的基因，并多组学为这些基因的突变提供了方向。可在任意药用微生物中进行检测筛选，适用性广泛，具有较大的延伸性，可根据不同程度的变化用各类敲除菌株作对比。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 霉菌 抗生素 相关 调控 基因 筛选 方法 | ||
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- 2021-12-20 - 2022-03-22 - C12N15/76
- 本发明涉及含有强启动子的用于链霉菌基因无痕编辑质粒，包括：强启动子Psco5768和密码子优化的毒素基因mazF，强启动子Psco5768控制密码子优化的毒素基因mazF的表达；强启动子Psco5768的序列包括SEQ ID NO:4所示的序列，密码子优化的毒素基因mazF的序列包括SEQ ID NO:3所示的序列。本发明构建的质粒选择了合适强度的启动子，并且可以用于链霉菌基因敲除、大片段敲除、定点突变、基因插入、大片段插入等多种编辑的高效无痕基因编辑质粒，为链霉菌来源的天然产物开发提供高效工具。
- 罗中链霉菌TRM 49605遗传操作体系的构建方法-202111624113.5
- 罗晓霞;万传星;夏占峰;邢利;王建明;刘琴;陈乙煌;姚宇翔 - 塔里木大学
- 2021-12-28 - 2022-03-22 - C12N15/76
- 本发明公开罗中链霉菌TRM 49605遗传操作体系的构建方法，利用罗中链霉菌TRM 49605菌丝体为供体细胞，与受体细胞大肠杆菌进行结合转移，得到接合转移转化子，再对接合子进行纯化与培养。本发明大肠杆菌与罗中链霉菌TRM 49605的接合转移作，不依赖于原生质体的形成与再生；可以避开宿主菌的限制性系统障碍；可利用件实现载体高效的从大肠杆菌向链霉菌中转移；用于接合转移的质粒都是穿梭质粒，大肠杆菌中这些质粒能够自主复制，更加方面表达载体的构建和操作。
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